Применение дополнительных гистологических методов окраски в доклинических исследованиях
Окраска эластических волокон фуксин-резорцином по Вейгерту
жүктеу/скачать 2,87 Mb.
|
Гиистоло
| Окраска эластических волокон фуксин-резорцином по Вейгерту. Окраска (рис. 3) позволяет выявить эластические волокна в тканях, что полезно при изучении заболеваний и патологических процессов, поражающих сосуды или, например кожу. Взаимодействие между эластином и красителем осуществляется за счет сложных эфирных групп, а также путем образования водородных связей между фенольными гидроксильными группами красителя и эластином [14] (рис. 4). При этом хлорид железа, используемый при окраске, с одной стороны, взаимодействуя с резорцином, дает насыщенный синий цвет, а, с другой, увеличивая насыщенность раствора солями, препятствует окрашиванию таких базофильных структур, как хроматин и рибосомы цитоплазмы, а значит повышает селективность метода [15]. Но специфичность метода все равно остается низкой, причем возможно окрашивание и других структур коллагена, а также базальных мембран. Поэтому для лучшей визуализации эластических волокон необходимо проводить тщательное дифференцирование под микроскопом в процессе окраски [13].
Есть возможность использовать данный метод в комбинации с окраской по Ван Гизону, что позволяет одновременно выявить так же коллаген и окрашивать ядра. Тогда результатом будет следующая картина: ядра-черные, эластические волокна – от темно-синих до черного, коллагеновые волокна - оттенки красного, цитоплазма, гладкая и поперечнополосатая мышечная ткань, ороговевающий эпителий, нейроглия и эритроциты желтые [2, 13]. Рисунок 3 – Кровеносный сосуд [13]. Рисунок 4 – Схема окрашивания Окраска по Вейгерту. Эластичные волокна эластических волокон по Вейгерту темно-синие Орсеин – еще один распространенный краситель, позволяющий выявить эластические волокна в тканях, и прежде всего в сосудах (рисунок 5,6). Результат – эластические волокна от тёмно-красных до коричневых [10, 11]. За счет окрашивания белков, связанных с медью данная методика применяется для диагностики заболеваний накопления меди (болезнь Вильсона). А связываясь с поверхностными антигенами вируса гепатита В позволяет использовать краситель для визуализации пораженных клеток [16]. Механизм окрашивания до конца не ясен. Есть предположение, что краситель взаимодействует с эластином за счет образования в кислой среде водородных связей между фенольными группами орсеина, заряженными положительно, и отрицательно заряженными боковыми цепями белка, который отличается от коллагеновых волокон меньшим содержанием аргинина, гистидина и лизина и большим количеством нейтральных лейцина и валина. Кроме того повышенное (до 90%) содержание неполярных аминокислот делает эластические волокна, в отличие от коллагеновых, малорастворимыми в большинстве органических и неорганических растворителей, что может быть применено для выделения компонентов ткани [17]. Рисунок 5 – Кровеносный сосуд в почке. Рисунок 6 – Схема окрашивания орсеином Окраска орсеином [13]. Эластичные волокна от красного до коричневого цвета жүктеу/скачать 2,87 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|