Применение дополнительных гистологических методов окраски в доклинических исследованиях
жүктеу/скачать 2,87 Mb.
|
Гиистоло
- Бұл бет үшін навигация:
- Альциановый синий
- ШИК реакцию
| Окраска мукоплисахаридов. Мукополисахариды – это полимерные углеводно-белковые комплексы, содержащиеся в соединительной ткани (хрящевой ткани, роговице) и в жидкостях (слизь, гепарин, синовиальная жидкость, стекловидное тело). В гистологии окраски на мукополисахариды применяются при изучении, прежде всего, структур, выделяющих слизь - кишечника, бронхов, муцинозные опухоли, а так же заболеваний хрящевой ткани.
Альциановый синий (рисунок 9) по химической структуре является медьсодержащим фталоцианином, который образует прочную связь с полианионами мукополисахаридов, избирательно взаимодействуя с их карбоксильными группами и сульфогруппами [пирс]. Краситель, под воздействием тетрабората натрия, становится плохо растворимым синим пигментом, который хорошо визуализируется. На реакцию значительно влияет кислотность раствора, так альциановый синий рН 1.0 образует связи с мукополисахаридами с большим содержанием сульфо-групп, а альциановый синий рН 2.5 способен к окрашиванию всех кислых мукополисахаридов [2,13,16] (рисунок 10). Например, это позволяет добиться селективного окрашивания кислых сиаломуцинов и сульфомуцинов бокаловидных клеток толстой кишки, в то время как нейтральный муцин желудка или желез Бруннера не реагируют с альциановым синим при рН 2,5 [16]. Результатом окрашивания будет: кислые мукополисахариды - бирюзово-голубые, хрящевая ткань – от пурпурного до темно синего. Рисунок 9 – Срез кишки. Окраска Рисунок 10 – Схема окрашивания альциановым синим рН 2.5 [13]. альциановым синим Мукополисахариды бокаловидных клеток окрашены синим. Для выявления гликогена в нормальных и патологически измененных тканях используют ШИК реакцию (аббревиатура от Шифф-йодная кислота) (рисунок 11). В данном случае йодная кислота окисляет и разрывает связи в соединениях, содержащих две смежные гликолевые группы, образуя диальдегид, образующий с серосодержащим фуксином из реактива Шиффа нерастворимое окрашенное соединение, сходное с основным фуксином [13, 17] (рисунок 12). В результате гликоген окрашивается в красные цвета. Таким образом, этот метод широко используется при изучении болезней накопления гликогена, ряда опухолевых заболеваний при которых происходит накопление муцина, грибковых поражений для визуализации клеточной стенки, а так же для изучения лимфопролиферативных заболеваний для детализации патологических клеток крови. Рисунок 11 – Срез тонкой кишки. Накопление Рисунок 12 – Схема ШИК реакции ШИК-положительных субстанций окрашиваются красным. жүктеу/скачать 2,87 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|