Репликация днк: учебное пособие
RFC (replication factor C)
жүктеу/скачать 2,57 Mb. Pdf көрінісі
|
|
4.3.2.1.2. RFC (replication factor C) В процессе репликации крайне важно взаимодействие с ДНК и другого фактора репли- кации – репликативного фактора С. RFС представляет собой гетеропентамер, состоящий из субъединиц 140–145, 40, 38, 37 и 36 кДа, он обладает АТРазной активностью, стимули- И. М. Спивак. «Репликация ДНК: учебное пособие» 46 руемой ДНК и РСNА. Все пять субъединиц этого фактора содержат в С-концевой области консервативные РСNА-связывающие участки. Этот фактор способствует посадке на ДНК PCNA, и таким образом образуется тройной комплекс RFСРСNА•Ро1δ– холоэнзим, обеспе- чивающий процессивный синтез ДНК. RFC взаимодействует преимущественно с 5'-концом праймера, но не с его 3'-концом. ДНК-связывающий участок RFС локализован на субъединице р140, поскольку именно эта субъединица обнаруживается в качестве продукта ковалентного присоединения к 5'-концу праймера. Существует модель переключения синтеза ДНК от Ро1α к синтезу, катализируе- мому РСNА-зависимыми ДНК-полимеразами. Согласно этой модели, Ро1α начинает синтез праймера на однонитевой ДНК, покрытой молекулами RРА. RFС связывается с 5'-концом только что синтезированного праймера и блокирует синтез ДНК, выполняемый Ро1α, в тот момент, когда она синтезировала РНК-ДНК-праймер длиной 30 н. На этой стадии реплика- тивный белок С, возможно, способствует посадке РСNА на ДНК. Это приводит к вытесне- нию Ро1α с 3'-конца растущей цепи и синтез продолжается с помощью Роl δ или ε. Схема этого процесса показана на рис. 15. Рис. 15. Роль RFC в репликации ДНК И. М. Спивак. «Репликация ДНК: учебное пособие» 47 4.3.2.1.3. PCNA (proliferating cell nuclear antigene) Три молекулы РСNА (36 кД каждая) образуют кольцевой тример с отверстием для дву- нитевой ДНК в центральной части, который представляет собой перемещающуюся по ДНК подвижную платформу или «скользящий зажим» («sliding clamp») в форме тора (бублика), удерживающую ДНК-полимеразу δ в ходе полимеризации на матрице и обеспечивающую высокопроцессивный синтез ДНК. Структура этого тора показана на рис. 16. Хотя РСNА и прокариотический фактор процессивности – субъединица β ДНК-полимеразы III Е. соli – имеют низкую гомологию на уровне первичной структуры, оба белка формируют близкие по пространственной геометрии структуры "скользящей скрепки". жүктеу/скачать 2,57 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|