Решением Учебно-методического совета фгбоу дпо рманпо минздрава России «28» ноября 2016г

116 
среды: размера частиц, их формы, количества, способности к поляризации.
Если в процессе измерения размер частиц в растворе будет меняться 
(например, в результате взаимодействия антиген-антитело), то будет 
соответственно меняться поток проходящего и интенсивность рассеянного 
света. Методы турбидиметрии и нефелометрии можно автоматизировать, что 
делает возможным получение результата анализа в течение нескольких 
минут. 
Нефелометрия и турбидиметрия – методы количественного
иммунохимического анализа, основанные на измерении интенсивности света, 
рассеянного дисперсной системой (I
r 
) (нефелометрия) или прошедшего через 
нее (турбидиметрия) (I
t 
) (рис. 2.6). 
Турбидиметрия – измерение прошедшего через кювету потока 
светового пучка. В качестве турбидиметра можно использовать большинство 
фотометров и биохимических анализаторов, в которых имеется возможность 
построения нелинейной калибровочной кривой. Закон Бугера-Ламберта –
Бера для прошедшего потока записывается: 
tC
o
t
I
I



10
, где t – молярный 
коэффициент мутности раствора или турбидиметрия, I
o
– интенсивность 
падающего на кювету света, С – концентрация исследуемого вещества.  
Таким образом, интенсивность пучка (плотность потока) параллельных 
лучей света при прохождении через кювету меняется по экспоненциальному 
закону.
Турбидиметрия применяется для анализа взвесей, суспензий и других 
мутных 
сред. 
В 
клинико-лабораторной 
практике 
используют 
иммунотурбидиметрические исследования, основанные на регистрации 
образования иммунных комплексов антиген-антитело, сопровождающихся 
образованием соответствующего преципитата, для повышения мутности 
применяют латексные частицы, на которые сорбируют антитела.

117 
Рис. 2.6. Схема нефелометрии и турбидиметрии. Турбидиметрия – измерение 
прошедшего светового потока через мутный раствор (I
t 
), нефелометрия – измерение 
рассеянного света, которое может регистрироваться под разными углами (I
r 
) 
 
Особенностью турбидиметрических определений является построение 
калибровочного графика с использованием не менее пяти концентраций, так 
как калибровочный график имеет нелинейный характер. Калибровочный 
график (стандартная кривая, рис. 2.7) строится для каждого аналита, для 
каждого прибора, при любом изменении условий регистрации и 
периодически по мере проведения исследований. При серийных 
исследованиях в стандартных условиях допускается корректировка кривой на 
основании измерения одного из стандартов. Это основано на наблюдении о 
том, что характерный вид стандартной кривой не меняется из-за влияния 
систематических факторов, а происходит параллельный сдвиг всей кривой. 
В этих случаях производят пересчет кривой, так, чтобы она шла параллельно 
первичной кривой, но проходила бы через новую точку. Для построения 
стандартной кривой используются стандарты, которые поставляются в 
составе соответствующего тест-набора. 

118 
Рис. 2.7. Стандартная кривая, характерная для определения индивидуальных 
белков турбидиметрическим и нефелометрическим методами. Для построения кривой 
требуется по крайней мере 5 стандартных растворов антигена 

жүктеу/скачать 4,09 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: