Решением Учебно-методического совета фгбоу дпо рманпо минздрава России «28» ноября 2016г


Иммунноцитохимические исследования



Pdf көрінісі
бет88/412
Дата07.12.2022
өлшемі4,09 Mb.
#55498
түріРешение
1   ...   84   85   86   87   88   89   90   91   ...   412
Байланысты:
e6b070e24f4686904d2cdeb41279e63c

Иммунноцитохимические исследования.
Иммуноцитохимическими 
называют методы микроскопического выявления и идентификации 
молекулярных компонентов клеток, основанные на реакции антиген-
антитело. Иммуноцитохимическое исследование – это комбинация 
цитологического и иммуноферментного методов. При постановке 
иммуноцитохимических методов требуется, прежде всего, так фиксировать 
исследуемый клеточный материал, чтобы в клетках сохранялась нативность 
выявляемых антигенов. Пероксидаза хрена в присутствии небольшого 
количества 
перекиси 
водорода 
катализирует 
окисление
3,3'-диаминобензидина 
с 
образованием 
нерастворимого 
золотисто-
коричневого продукта. Если пероксидазу непосредственно или опосредовано 
присоединить к антителам, то эта реакция может происходить только там, 
где меченные ферментом антитела связались с антигеном. При микроскопии 
окрашенных препаратов на фоне обычной цитологической картины, 
например костного мозга, можно идентифицировать коричневый продукт 
ферментативной 
реакции, 
образовавшийся 
в 
местах 
связывания 
использованных антител с выявляемыми антигенами. Иммуноферментное 
маркирование можно осуществлять при помощи комплекса щелочная 
фосфатаза-антитела 
к 
щелочной 
фосфатазе. 
Конечный 
продукт 
ферментативной реакции имеет хорошо заметный красивый красный цвет. 
Ионоселективный анализ. Ионоселективный анализ – один из 
наиболее широко используемых методов клинической биохимии. Он основан 
на использовании ионоселективных электродов, которые представляют собой 
электрохимические системы, формирующие потенциал в растворе электролита, 
зависящий от концентрации ионов. С помощью ионоселективных электродов 


134 
определяется активность ионизированных молекул. Ионы, связанные с 
белками, другими анионами и находящиеся в комплексе, не регистрируются 
ионоселективными электродами, т.е. общая концентрация микроэлемента не 
регистрируется. Это важно, так как биологически активными являются именно 
ионизированные молекулы. В клинической биохимии широко определяемыми 
катионами являются Н
+
(pH), К
+
, Na
+
, Ca
2+
, Mg
2+
, Li
+
и анион Cl
-
. 
Основным элементом ионоселективного электрода является мембрана, 
проницаемая только для определенного иона. Состав мембраны подбирается 
на производстве. В стеклянных электродах формируется кристаллическая 
решетка, ячейки которой чувствительны к тестируемому иону. В 
мембранных электродах в состав полимера вводится индуктор проводимости 
для соответствующего иона, который формирует каналы специфической 
проницаемости. В частности в мембрану для определения активности К
+
часто вводится валиномицин, Na
+
– нистатин. К достоинствам 
ионоселективных электродов относятся: возможность прямого измерения 
активности при контакте электрода с биологической жидкостью, 
портативность и минимальный объем биожидкости (микролитры), быстрый 
ответ, что позволяет использовать метод при неотложных состояниях
Анализаторы ионоселективные измеряют активность ионов в 
сыворотке, плазме, цельной крови, диализатах, моче. Минимальный объем 
пробы 100 мкл. Как правило, диапазон измеряемых концентраций в 
сыворотке, плазме, цельной крови: К+ 0,2-40.0 ммоль/л; Na+. 20.0-200.0 
ммоль/л; Ca
2+
0.10-6.00 ммоль/л; рН 6.0-8.0 ед. рН; Cl
-
25.0-200.0 ммоль/л. 
Разрешение: К
+
0.01 ммоль/л; Na
+
0.1 ммоль/л; Ca
2+
0.01 ммоль/л; рН 0.001 
ед. рН; Cl
-
0.1 ммоль/л. Диапазон измерения и чувствительность вполне 
достаточны для измерения активности ионов в крови в норме и при 
патологии.


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   84   85   86   87   88   89   90   91   ...   412




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет