С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Часть 2. Частные вопросы биотехнологии. Клеточная биотехнология 112 лунках с культурой. Используют по четыре лунки на каждое разведение вируса, начиная с разведения, соответствующего 0,1 условных единиц активности с коэффициентом разведения ×10. После внесения индикаторного вируса и титрования его дозы, культуру клеток инкубируют при температуре (37,0 ±1,0)°С, (5,0±0,5) % СО 2 и (70±5) % влажности. Учет определения активности интерферона осуществляет через 24– 48 часов, когда доза внесенного вируса соответствует 100 условным единицам активности. Учет результатов проводят в случае отсутствия дегенерации в контрольной культуре. За титр интерферона принимают величину, обратную разведению препарата, при котором клеточная культура в 50 % лунок оказалась полностью защищенной от цитопатического действия вируса. Пересчет активности интерферона (X) в МЕ выполняется по формуле: Специфическую безопасность проверяют на животных (тест «токсичность») и на культурах клеток, которые используются в определении противовирусной активности. Для этого односуточный монослой вносят в планшеты, добавляют ту же питательную среду, что и для определения активности, и разведения интерферона-α. Инкубируют в течение трех суток при условиях, описанных выше. Не должно быть разрушения клеток. В контроле без определяемого вещества (отрицательный контроль) также не должно быть разрушения клеток. жүктеу/скачать 2,61 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|