С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020
Глава 16. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ВИТАМИНОВ 191 том, что они синтезируют исключительно истинный витамин В 12 (до 58 мг/л). В качестве источника углерода в составе питательной среды используют глюкозу. Установлено, что концентрация глюкозы в процессе выращивания бактерий должна поддерживаться на уровне 1,0–1,5%, что осуществляется путем постоянной подачи стерильного 40% раствора глюкозы на протяжении всего процесса ферментации. Важное значение имеет азотное питание. В качестве источника органического азота в состав среды вводят кукурузный экстракт в концентрации 2 %. Также в состав среды вводят неорганический источник азота – (NH 4 ) 2 SO 4 . Установлено, что катион аммония принимает участие в реакциях амидирования уксусной и пропионовой кислот. Существенное значение для синтеза витамина В 12 имеет определенная концентрация в среде солей Со 2+ . Поэтому дополнительно в состав среды вводят хлористый кобальт – СоС1 2 . При этом необходимо учитывать, что соли кобальта относятся к довольно эффективным бактерицидным веществам. Поэтому концентрацию этой соли подбирают такую, чтобы она не тормозила рост продуцента, но стимулировала синтез витамина. Эта величина составляет около 0,0005 %. Для биосинтеза витамина В 12 в состав питательной среды добавляют предшественник – 5,6-диметилбензимидазол (5,6-ДМБ), который входит в состав нуклеотидной части молекулы витамина. Наличие в среде этого соединения способствует направленному синтезу истинного витамина, понижая до минимума, или вовсе исключая наличие в микробной массе псевдоформ. Культура P. shermanii в процессе ферментации образует аналоги витамина В 12 – так называемый кофактор В – витамин без нуклеотидной части или псевдовитамин, где нуклеотидная часть представлена аденином. Эта форма биологической активностью не обладает. Установлено, что лучшие результаты по накоплению истинного витамина В 12 наблюдали в том случае, если 5,6-ДМБ добавляли на 4 сутки ферментации, то есть за сутки до окончания процесса. За это время 5,6-ДМБ вытесняет все неактивные соединения, превращая псевдоформы в истинный витамин В 12 . Одной из существенных положительных сторон процесса ферментации витамина В 12 является отсутствие аэрации. Показано, что наибольшее количество витамина В 12 образуется при культивировании бактерий в анаэробных условиях. В связи с этим первые 4 |