С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020
Глава 21. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ И ИНСУЛИНА 261 подкожно раствор стандартного образца инсулина из расчета 0,5 ЕД на 1 кг массы тела животного и определяют величину снижения концентрации сахара в крови в процентах. Кровь для исследования берут из краевой вены уха животных до введения инсулина и через 1,5 и 2,5 часа после его введения. Исключают животных с исходной концентрацией сахара в крови ниже и выше пределов, установленных для используемого метода определения содержания сахара в крови (феррицианидный и глюкооксидазный методы), а также тех животных, которые реагируют на введение инсулина судорогами или у которых снижение концентрации сахара в крови составляет менее 15 % по отношению к исходной концентрации. Отобранных для опытов кроликов лишают корма (но не воды) на 18 ч, предшествующих введению инсулина. Животных распределяют на две группы не менее 9 кроликов. Непосредственно перед введением инсулина кроликов взвешивают и определяют исходную концентрацию сахара в крови. Кроликам одной группы вводят подкожно по 0,5 ЕД стандартного образца инсулина (S) на 1 кг массы тела, кроликам другой группы – такую же дозу испытуемого образца инсулина (Т). Через 1,5 и 2,5 ч после введения инсулина у животных снова определяют концентрацию сахара в крови. Для каждого кролика рассчитывают снижение концентрации сахара в крови в процентах по формуле: (а – в)/а×100 %, гдe а – исходная концентрация сахара в крови в миллиграмм- процентах; в – средняя концентрация сахара в крови в миллиrрамм-процентах из двух определений, проведенных через 1,5 ч и 2,5 ч после введения инсулина. Через 3–5 суток на этих же кроликах проводят повторное испытание с той разницей, что животным из группы, получавшей стандартный образец инсулина (S), вводят испытуемый образец инсулина (Т), а животным группы, получавшей (Т), вводят (S). Рассчитывают среднюю величину снижения концентрации сахара в крови на стандартный образец (%S) и на испытуемый образец (%Т) по данным всего опыта. Отношение %Т и %S выражает относительную активность (R) испытуемого образца (Т). Для выражения активности испытуемого образца (Т) в ЕД его предполагаемую активность (А) |