С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020
- Бұл бет үшін навигация:
- Радиоиммунный метод
Часть 3. Частные вопросы биотехнологии. Микробная биотехнология 262 умножают на относительную активность (Т = R × А). Определение проводят не менее 2 раз с каждым испытуемым образцом (Т). При расчете окончательного результата должны быть использованы данные, полученные не менее чем на 30 кроликах. Радиоиммунный метод или анализ (РИА) – высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген – антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14C, 3Н, 51Сr и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение). Интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. Этот метод количественного определения биологически активных веществ, (гормонов, ферментов и др.) в биологических жидкостях, основан на конкурентном связывании искомых стабильных и аналогичных им меченных радионуклидом веществ со специфическими связывающими системами (например, антитело). В связи с тем, что меченый антиген добавляют в определенном количестве, можно определить часть вещества, которая связалась с антителами, и часть, оставшуюся несвязанной в результате конкуренции с выявляемым немеченым антигеном. Исследование выполняют in vitro и проводят в несколько этапов: смешивают биологический материал с реагентами, инкубируют смесь в течение нескольких часов, разделяют свободное и связанное радиоактивное вещество, осуществляют радиометрию проб, рассчитывают результаты. В ряде случаев исследования выполняют на фоне нагрузочных функциональных проб (например, определение содержания инсулина в сыворотке крови на фоне пробы на толерантность к глюкозе) либо в динамике (например, определение в крови половых гормонов на протяжении менструального цикла). жүктеу/скачать 2,61 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|