С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров
жүктеу/скачать 2,61 Mb. Pdf көрінісі
|
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020
Глава 5. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ 63 По физическому состоянию среды подразделяются на три группы: плотные (добавляется агар-агар или желатин), жидкие и сыпучие. Питательные среды должны содержать в легко усвояемом виде все вещества, необходимые для удовлетворения пищевых и энергетических потребностей. При культивировании ряда микроорганизмов в среды вносят факторы роста – витамины, некоторые аминокислоты, которые клетка не может синтезировать. Кроме этого в питательных средах должно строго соблюдаться значение pH и изотоничность. При культивировании большинства микроорганизмов и животных клеток оптимальна слабощелочная среда (pH 7,2–7,4). При нарушении изотоничности, возникает осмотический шок, приводящий к разрыву клеточной стенки или потери жизнеспособности клетки. К базовым компонентам питательных сред относятся источники углерода, азота и минеральных соединений. К наиболее доступным источникам углерода относятся углеводы. Получают питательные среды массо-объемным способом, при необходимости рассчитывают количество сухого вещества, которое нужно добавить к среде, или готовят долив. После приготовления среду стерилизуют, при невозможности – стерилизуют отдельные компоненты до смешивания. В ряде случаев сухие концентраты питательных сред разводят в необходимом количестве стерильной воды. Большинство используемых питательных сред являются «именными». Среда Мурасиге–Скуга (MS0 или ЭмЭс-ноль)) – это питательная среда, используемая в лабораториях для выращивания растительных клеток. Эта среда была предложена физиологами растений Тошио Мурасиге и Фольке К. Скугом в 1962 году. При проведении экспериментов было установлено, что за счет варьирования количества минеральных веществ и органически связанного азота можно добиться существенно ускорения роста по сравнению с существовавшими составами. Данная среда и ее модификации – до сих пор наиболее часто используемая в лабораторной практике среда для экспериментов на культурах растительных клеток. Среда Мюллера–Хинтон (универсальная среда на основе мясо-пептонного бульона или агара используется для культивирования большинства микроорганизмов), среда Сабуро (культивирование грибов), среда Мозера–Рогоза–Шарпа (MRS) (культивирование лактобацилл), среда Эндо (определение лактазной активности микроорганизмов). Среда RPMI (англ. – Roswell Park Memorial Institutemedium) и ее модификации используются для выращивания |