ГЕНЕТИЧЕСКАЯ РАЗНОВИДНОСТЬ ОСНОВНЫХ  ЛИНИЙ КОСТАНАЙСКОЙ

409 

Важной  задачей  современной  сельскохозяйственной  генетики  является  эффективный 

отбор и подбор родительских пар с помощью генов, маркирующих полезные свойства (MAS  - 

marker  assisted  selection). 

Высокая  информативность  ДНК-маркеров  предоставляет  возможность  селекционного 

вмешательства  в  процесс  развития  пород.В  последние  годы  в  исследованиях  генофондов 

сельскохозяйственных  животных  в  основном  используется  полиморфизм  микросателлитов 

ДНК. 

На  сегодняшний  день,  с  связи  с  быстрым  развитием  ДНК-технологий,  количество 

генных маркеров, обнаруженных в лошадях достигло нескольких десятков [1,2,3]. 

Использование  генных  маркеров  при  проведении  селекционно-племенной  работы 

конных  заводов  многих  стран  стало  одним  из  обязательных  критериев  отбора  и  подбора.  К 

сожалению,  подобных  работ  с  лошадьми,  выращиваемыми  в  Казахстане,  в  том  числе  и  в 

отечественной  костанайской  породе  лошадей  не  проводилось.  Поэтому  изучение 

возможностей  маркерно-вспомогательной  селекции  в  коневодстве  и  использование  его 

результатов  в  практике  конных  заводов  Казахстана  является  назревшей  необходимостью,  а 

проведение  исследований  генетического  полиморфизма  основных  линий  первой 

отечественной породы лошадей – костанайской, актуальной.  

Научные  исследования  выполнены  в  соответствии  с  республиканской  программой  в 

ТОО  «Қазақ  тҧлпары»  МСХ  РК  (№  гос.  регистрации  0106  РК  00859)  по  теме  «Изучение 

иммуногенетических показателей и использование их в качестве маркеров для типирования и 

идентификации лошадей». 

Материалом  для  исследования  послужили  пробы  крови  и  волос  основных  линий 

лошадей костанайской породы: Неон (n=29), Форт (n=18), Бобрик (n=15), Бурелом (n=8) и Зевс 

(n=6). 

Кровь для анализов забирали из яремной вены по стандартной методике в количестве 

10-15 мл [4]. Волосяные луковицы брали в количестве 20-25 штук от животного, для 

хранения до момента выделения ДНК были использованы бумажные пакеты. ДНК 

выделялась из проб крови (суспензия лейкоцитов) и волосяных луковиц с использованием 

наборов «QIAGEN mini kit» (Германия).  

Для  анализа  был  использован  набор  праймеров,  включающий  17  локусов 

микросателлитов,  рекомендованный  Международным  обществом  по  изучению  генетики 

животных  (ISAG).  Выделенную  ДНК  амплифицировали  на  термоциклере  «Мastercycler» 

(Германия)    с  набором  праймеров  «Stock  Marks  for  Horses»  согласно  рекомендациям 

производителя. Электрофорез продуктов  амплификации осуществлялся на автоматическом 1-

капилярном  генетическом  анализаторе  «ABI  Prism  310»  («Applied  Biosystems»,  США). 

Расшифровка  и  документирование  полученных  графических  результатов  осуществлялась  с 

помощью программного обеспечения автоматической расшифровки результатов фрагментного 

анализа GeneMapper

TM

. 

Интерпретацию  графических  изображений  полученных  индивидуальных  генетических 

профилей  и  определение  генотипов  животных  проводили  с  учетом  контрольной  пробы  и 

результатов  участия  в  Международных  сравнительных  испытаниях  (World  Horse  Comparison 

Test). 

Генетико-статистический  анализ  проводился  по  стандартным  методикам  (Е.К. 

Меркурьева,  1977;  Ч.  Ли,  1978;  Л.А.  Храброва,  А.М.  Зайцев,  2005)  [5].  Были  рассчитаны 

следующие  показатели:  частоты  аллелей,  эффективное  число  аллелей  (уровень 

полиморфности, Ae); число аллелей в локусе (Na); выявлены специфические для определенной 

популяции  аллели  –  «приватные»  аллели  (Ра).  Статистический  анализ  полученных  данных 

проводили по компьютерной программе MathCAD 2001 и Excel. 

 

При  тестировании  обследованного  поголовья  было  установлено,  что  сновные  линий 

костанайской  породы  лошадей  заметно  различаются  по  наличию  и  частоте  встречаемости 

аллелей микросателлитных локусов, потому что каждая линия по 17 локусам микросателлитов 

ДНК имеет свою генетическую структуру. 

410 

Определены  специфичные  аллели  5  линий  17  локусов  ДНК.  Самый  широкий  спектр 

распределение  аллелей  в  костанайской  породе  лошадей  составляет    в  линии  Неона  (число 

встречаемых аллелей 121 и число приватных аллелей 10), средний показатель линий  Бобрика 

(число встречаемых аллелей 115 и число приватных аллелей 10) и Форта (число встречаемых 

аллелей 114 и число приватных аллелей 9).А в линиях Зевса (число общевстречаемых аллелей 

94  и  число  приватных  аллелей  5)  и  Бурелома  (число  встречаемых  аллелей  83  и  число 

приватных аллелей 2) показатели ниже по сравнению с другими линиями (рисунок 1). 

Рисунок 1 – Общее число и число приватных аллелей  по 17 локусам микросателлитов 

ДНК  основных линий костанайской породы лошадей 

 

По  17 локусам микросателлитов ДНК, обнаружено десять «приватных» аллеля в линии 

Неона (VHL20

R

, HTG4

H

, HTG6

H

, AHT5

I

, HMS6

Q

, ASB23

N

, HMS2

P

, ASB17

K

, LEX3

E

 и  HMS1

G

), 

девять приватных аллеля в линии Форта (HTG4

N

, AHT4 

L,Q

, HMS7

Q

, HMS6

R

, ASB23 

T,R

, LEX3

G

, 

CA425

E

),  десять  -  в  линии    Бобрика  (HTG4

G,J

,  AHT4

M,N

,  AHT5

S

,  ASB23

U,O

,  ASB17

H,Q

,

 

LEX3

T

),  пять  аллелей  в  линии  Зевса  (VHL20

J

,  HTG4

F

,  HTG6

Q

,  АHT5

L

,  HMS2

N

)  и  два 

аллеля в линии Бурелома (ASB23

F

, CA425

H

). 

В ходе исследований в каждой линии костанайской породы лошадей было определено 

общее  число  и  среднее  число  аллелей  на  один  локус  (%)  микросателлитов  ДНК  основных 

линий костанайской породы лошадей (таблица 1). 

 

Таблица  1  –  Число  аллелей  (Nа)  встречаемых  в  17  локусах  микросателлитов  ДНК  и 

среднее  число  аллелей  на  один  локус  (NV,  %)  в  основных  линиях  костанайской  породы 

лошадей  

 

Локусы 

Основные линий костанайской породы лошадей 

Неон 

Форт 

Бобрик 

Зевс 

Бурелом 

n=28 

n=18 

n=15 

n=6 

n=8 

Nа 

NV 

Nа 

NV 

Nа 

NV 

Nа 

NV 

Nа 

NV 

VHL20 

8 

4,908 

8 

4,908 

7 

4,294 

7 

4,294 

5 

3,067 

HTG4 

5 

3,067 

5 

3,067 

6 

3,681 

4 

2,454 

4 

2,454 

AHT4 

6 

3,681 

7 

4,294 

8 

4,908 

6 

3,681 

4 

2,454 

HMS7 

7 

4,294 

8 

4,908 

7 

4,294 

5 

3,067 

3 

1,840 

HTG6 

8 

4,908 

8 

4,908 

8 

4,908 

8 

4,908 

6 

3,681 

AHT5 

7 

4,294 

6 

3,681 

8 

4,908 

5 

3,067 

5 

3,067 

HMS6 

6 

3,681 

6 

3,681 

5 

3,067 

4 

2,454 

4 

2,454 

ASB23 

6 

3,681 

7 

4,294 

8 

4,908 

6 

3,681 

6 

3,681 

ASB2 

8 

4,908 

8 

4,908 

7 

4,294 

4 

2,454 

6 

3,681 

HTG10 

9 

5,521 

9 

5,521 

9 

5,521 

8 

4,908 

7 

4,294 

HTG7 

6 

3,681 

5 

3,067 

5 

3,067 

6 

3,681 

4 

2,454 

411 

HMS3 

7 

4,294 

7 

4,294 

5 

3,067 

5 

3,067 

4 

2,454 

HMS2 

7 

4,294 

7 

4,294 

6 

3,681 

6 

3,681 

4 

2,454 

ASB17 

8 

4,908 

5 

3,067 

6 

3,681 

6 

3,681 

4 

2,454 

LEX3 

10 

6,135 

7 

4,294 

7 

4,294 

5 

3,067 

6 

3,681 

HMS1 

6 

3,681 

5 

3,067 

6 

3,681 

4 

2,454 

4 

2,454 

CA425 

7 

4,294 

6 

3,681 

7 

4,294 

5 

3,067 

7 

4,294 

среднее  7,118  4,366  6,706  4,114  6,765  4,150 

5,529 

3,392 

4,882 

2,995 

 

Исследования  показали,  что  число  приватных  аллелей  в  линиях  Неона  и  Бобрика 

одинаковые, в линий Форт среднее, а в линиях  Зевса и Бурелома число приватных аллелей по 

сравнению с другими линиями меньше. 

Использование  полиморфизма  микросателлитных  локусов  генома  дает  возможность 

точного  расчета  между  гетерозиготностью  и  генетическим  расстоянием  пород  и  популяций 

животных. 

Благодаря  очень  высокому  уровню  полиморфизма  этот  метод  является  хорошим 

средством  для  анализа  внутренней  и  промежуточной  популяционной  изменчивости  и 

определения генетического расстояния между группами организма. 

Использование  микросателлитных  маркеров  является  эффективным  при  определений 

генетических строений пород, при определении дифференциации между линией и семейством 

животных,  при  уточнений  уровня  гетерозиготности,    контроле  наследования    хозяйственно-

полезных признаков. 

Для  сохранения  генетического  внутрипородного  разнообразия  большой  интерес 

представляет  среднее  число  аллелей  (NV)  по  всем  исследованным  маркерам  в  конкретной 

породе.Наиболее полиморфной оказалась линия Неона, в который NV=4,366 (рисунок 2). 

 

 

 

 

 

Рисунок  2  –  Число  аллелей  (Nа)  встречаемых  в  17  локусах  микросателлитов  ДНК  и 

среднее число аллелей на один локус (NV) 

 

 

По результатам исследованийустановлено, что  основные линии лошадей костанайской 

породы заметно различаются по наличию и частоте встречаемости аллелей микросателлитных 

412 

локусов, так как каждая линия по 17 локусам микросателлитов ДНК имеет свою генетическую 

структуру. 

Анализ  17-ти  локусов  микросателлитов  ДНК    основных  линиий  костанайской  породы 

лошадей выявил наличие выраженной генетической дифференциации между ними.   

В  каждом  из  17-ти  изученных  микросателлитных  локусов  в  среднем  по  всем  линиям 

идентифицировано от 7 до 12 аллелей, при этом в локусах HMS6 и ASB23 обнаружены ранее 

не описанные аллели  

Среднее значение числа аллелей (NV) в среднем  составило 3,8 - от 5,2  в локусе НТG10 

до  2,9  в  локусе  НТG4,  число  эффективно  действующих  аллелей  (Ae)  –  3,5  -  от  5,8  в  локусе 

НТG10 до 2,05 в локусе НMS1.  

Самый  широкий  спектр  аллелей  (121  аллелей  по  17  локусам),  а  также  максимальное 

число  «приватных»  аллелей  (Pa=10)  были  выявлен  у  линии  Неона  костанайской    породы 

лошадей.  У  остальных  линий  аллелофонд  включал  в  себя  около  100  аллелей,  в  том  числе 

несколько «приватных» аллелей. 

По каждому исследованному локусу генетический анализ линии костанайской породы 

лошадей показал, что каждая линия выделяется свойственной ей генетической структурой.Это 

доказательство  того,  что  генетическая  разновидность  основных  линий  костанайской  породы 

лошадей  по  17  локусам  микросателлитов  ДНК  высокая  и  имеет  достаточный  генетический 

фонд.  Обнаруженные  особенности  позволяют  более  эффективно  использовать  отдельные 

локусы для различных целей генетико-популяционных исследований. 

Исходя  из  этого  для  усиления  передачи    хозяйственно-полезных  свойств 

родоначальника линии потомкам, рекомендуем подобрать кобыл, имеющих высокую частоту 

встречаемости аллелей, свойственных данной линии, а также применение целенаправленного 

умеренного инбридинга. 

При построении селекционных программ,  при проведении генетического мониторинга 

линий и семейств в породе, при оценке генетической разновидности рекомендуем применение 

локусов  полиморфных  микросателлитов  ДНК  в  качестве  универсального  генетического 

маркера.  

 

Список использованных источников 

 

1 Lanteri, S., Barcaccia, G., Ruane, J., Sonnino, A., 2006. Molecular marker based analysis for 

crop  germplasm  preservation.  In:  The  Role  of  Biotechnology  for  the  Characterisation  and 

Conservation  of  Crop,  Forestry,  Animal  and  Fishery  Genetic  Resources.  Turin,  Italy,  5–7  March 

2005, pp. 105–120. 

2 M. Soattin, G. Barcaccia, C. Dalvit, M. Cassandro, G. Bittante Genomic DNA fingerprinting 

of indigenous chicken breeds with molecular markers designed on interspersed repeats Hereditas, 146 

(2009), pp. 183–197. 

3  Костюченко  М.В.,  Удина  И.Г.,  Зайцев  А.М.,  Храброва  Л.А.,  Сулимова  Г.Е.  ДНК-

технологии  для  оценки  генетического  разнообразия  пород  лошадей  отечественной  селекции 

//С.-х. биология. Сер. Биология жив-х. - 2001. - №6. – С. 29-34.  

4 Храброва Л.А., Зайцева М.А. Рекомендации по взятию и транспортировке проб крови 

для генетической экспертизы происхождения лошадей. Издание ВНИИК, 2004. 

5 Зайцева М.А. Породоспецифические особенности аллелофонда микросателлитов ДНК 

лошадей заводских и местных пород: автореф. дисс. канд. с.-х. наук:. 06.02.07. – Дивово, 2010. 

– 22 с.  

 

 

УДК. 633.913.32 

 

КӚК-САҒЫЗ ӚСІМДІГІНІҢ БИОЛОГИЯЛЫҚ БЕЛСЕНДІ ЗАТТАРЫН АНЫҚТАУ 

 

413 

Бекмҧратова Г.Т., 

guljan.b_94@mail.ru

, 

Қазақ мемлекеттік қыздар педагогикалық университеті, Алматы 

Ғылыми жетекші – Г.Е.Азимбаева 

 

Зерттеудің  ӛзектілігі:Кӛк-сағыз  (Taraxacum  kok-saghyz  Rodin)  кҥрделі  гҥлділер 

тҧқымдасының  бақ-бақ  тҥріне  жататын  кӛп  жылдық  шӛптесін  ӛсімдік.  Алғаш  рет  оны  1931 

жылы  колхозшы  Спиваченко  мен  саяхатшы-комсомол  Буханевич  Кеген  және  Нарынқол 

аудандары мен Алматы облысынан тапқан. 

Кӛк-сағыздың  жеке  тҥр  ретінде  зерттеп  және  оның  тамырынан  каучук  синтезделу 

жолдары  аз  дамыған.  Кӛк-сағызға  жақын  бақ-бақ  туысына  жататын  тҥрлері  дҥние  жҥзінің  әр 

тҥрлі  аймақтарында  таралған,  бірақ  каучук  ӛндіруге  бейімделмеген  болып  келеді.  Кӛк-

сағыздың  табиғи  ӛсіп-жетілетін  аймақтарында  шамамен  600  миллион  ӛсімдік  ӛсіп  келеді,  ал 

қалған  туыстары  жабайы  тҥрінде  ӛсіп,  тек  биологиялық  қасиеттерімен  кӛк-сағызға  ҧқсас 

болады [1]. 

Ӛсімдіктің негізгі кӛлемін тамыр және жапырақтар қҧрайды. Кӛк-сағыздың тамыры тік, 

жан  жағына  жай  тармақталған,  жақсы  дамыған  тамырдың  тармақтары  1,5-2  см-ге  жетеді. 

Каучук жиналатын жері  ӛсімдіктің сҥтті тҥтіктерінде, олар тамырдың  қабығында орналасады 

[2]. 

Шырынның қҧрамында тҥрлі химиялық қосылыстар болғандықтан сҥтті шырын кӛптеген 

техникалық  және  тағамдық  ӛнімдерде,  кейбір  медициналық  препараттар  жасауда 

қолданылады[3. 

Зерттеудің  мақсаты:Кӛк-сағыз  ӛсімдігінің  биологиялық  белсенді  заттарын  анықтау 

арқылы қолдану аясын кеңейту.   

Зерттеудің міндеттері:  

-

 

Кӛк-сағыз ӛсімдігінің химиялық экстрактивтілігін анықтау;   

-   Биологиялық белсенді заттарын анықтау 

Зерттеудің нысаны: Қытай Халық Республикасы, Шинжяң Ҧйғыр автономиялы районы, 

Тарбағатай  аймағы,  Шағантоғай  ауданының  шілде-тамыз  айларында  алынған  кӛк-сағыз 

ӛсімдігі.  Кесте 1. Кӛк-сағыз ӛсімдігінің химиялық қҧрамы  

 

 

 

 

 

№ 

Ши

кі

за

т а

та

уы

 

Ылға

лдылығы

,%

 

К

ҥлді

лігі

, %

 

Экстрактивтілігі, % 

рН 

С

уда

 

 

С

пи

рт

те

 

 

А

це

тон

да

 

суда 

 

 

1 

С

аба

ғы

 

 

 

79,4 

 

 

3,97 

 

 

29,13 

 

 

12,14 

 

 

33,98 

 

5,35 

 

 

5,42 

 

5,36 

 

 

6,45 

 

6,66 

 

 

6,62 

 

6,86 

 

 

6,86 

 

 

2 

Та

м

ыры

 

 

 

74 

 

 

4,70 

 

 

23,07 

 

 

17,3 

 

 

26,9 

      1-ші кесте мәліметтері кӛрсеткендей судағы рН-ы әлсіз қышқылдық ортаны кӛрсетсе, 

спиртті ерітінділерінің рН бейтарап ортаны кӛрсетеді. 

Спирт% 

40            70           90 

 

414 

Кӛк-сағыз  ӛсімдігінің  ылғалдылығы  мен  кҥлділігі  гравиметриялық  әдіспен  анықталды. 

Кҥлі арқылы қҧрамындағы макро және микро элементтердің мӛлшері анықталды. 

 Аскорбин қышқылы титриметриялық әдіспен анықталды. Экстрактивтілігі суда, 80% этил 

спиртінде және ацетонда 2 сағататта жҥргізілді. Кӛк-сағыздың экстрактивтілігі су және 

ацетонмен салыстырғанда спирттегісі екі еседей тӛмен. 

Кесте 2. Кӛк-сағыз ӛсімдігінің биологиялық белсенді заттарының мӛлшері  

 

 

 

 

№ 

Ши

кі

за

т а

та

уы

 

Ан

тоц

иа

нда

р, %

 

Поли

фено

лдар, %

 

Б

елок

, %

 

К

ле

ча

тк

а, 

%

 

Май, 

%

 

К

арот

ин

, м

кг

/100г

 

К

ум

ари

н,%

 

Ас

корби

н қ

ышқылы, 

м

г/%

 

 

 1 

С

аба

ғы

 

 

0,11 

 

47,60 

 

5,38 

 

58,30 

 

 

1,06 

 

24,10 

 

1,20 

 

52,08 

 

  2 

Та

м

ыры

 

 

   0,08 

 

   34,30 

 

  5,12 

 

     6,20 

 

  0,84 

 

   11,50 

 

3,10 

 

62,16 

 

Кӛк-сағыз  ӛсімдігінің  қҧрамындағы  антоциандар,  полифенолдар,  каротин,  кумариндер 

фотоколориметрлік  әдіспен  КФК-2  маркалы  фотоколориметрінде  анықталды.  Зерттеу 

мәліметтері  1–  кестеде  кӛрсетілген.  Полифенолдарға,  каротинге,  бай  екенін  кӛруге  болады. 

Клечатка А.Е. Ермаковтың модификациясы бойынша салмақтық әдіспен анықталды. Клетчатка 

мӛлшері  сабағында  кӛп.  Кӛк-сағыз  ӛсімдігінің  қҧрамындағы  шикі  май  мӛлшері  Сокслет 

аппаратының  кӛмегімен  салмақтық  әдіспен  анықталды.  Шикі  майдың  мӛлшері  тамырымен 

салыстырғанда  сабағында  кӛп.  Полифенолдардың  мӛлшері  сабағында  да,  тамырында  да  кӛп 

екенін кӛруге болады.  

Ӛсімдікте  фенолды  қосылыстармен  қатар  полимерлі  фенолды  қосылыстар  да  болады. 

Олар:  илегіш  заттар,  лигниндер  және  меланиндер.  Кейде  бҧларға  ӛсімдіктің  қалдықтары 

гумирленуі нәтижесінде тҥзілген гумин қышқылы да жатады.   

Полифенолдар  кҥшті  табиғи  антиоксиданттар  болатын  ӛсімдік  пигменттері. 

Полифенолдар:жҥзімнің,  шайдың,  алманың,  шокалат  т.б    жеміс  жидектердің  қҧрамында 

кездеседі.  Канада  ғалымдарының  зерттеулерінше  қызыл  шарап  қҧрамында  болатын 

полифенолдар  тіс  жиегі  ауруларына  ем  болатынын  кӛрсетті.  Жҥзімнің  қҧрамында  болатын 

полифенолдар:  антиоксидантты,  антимутагенді,  антибактериалды  және  Р  витаминіне  бай. 

Полифенолдар буын ауруларына емдеп, қан айналым жҥйесін жақсартады. Полифенолдардан 

рактың  кейбір  тҥрлеріне  препараттар  жасайды,  метаболизімді  жоғарлатады.  Жҥрек  бҧлшық 

еттеріне қарсы ем. 

жүктеу/скачать 15,22 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: