Литература 6, с 27-35 Контрольные вопросы: 1 Какие компоненты клетки можно рассмотреть в оптический микроскоп?
2 Какие органеллы составляют структуру клетки?
Тема 4 Клеточные включения. Нуклеиновые кислоты. Ферменты Цель: - ознакомить с клеточными включениями, нуклеиновыми кислотами и ферментами
План: 1 Расмотреть под микроскопомпрепарат печени хвостатых амфибий
2 Расмотреть и зарисовать клеточные включения, клеточные границы, клеточные ядра
Методические рекомендации по подготовке к занятию Чтобы сохранить жир на срезах, полученных от залитых в целлоидин или парафин объектов, необходимо применить фиксатор, в состав которого входит осмиевая кислота, фиксирующая жир и переводящая его в нерастворимое для последующих реактивов состояние; в то же время она окрашивает жир в черный цвет. После осмиевых фиксаторов обычная окраска ядер гематоксилином не удается, поэтому в качестве ядерного красителя применен сафранин, окрашивающий ядра в красный цвет.
Снова под микроскопом знакомый объект — печень хвостатых амфибий, но на этот раз препарат обработан специальным образом для сохранения жировых включений в печеночных клетках. Рассматривая препарат при слабом увеличении, легко заметить в печеночных клетках черные шарики, представляющие собой окрашенные осмием липидные включения.
Нужно выбрать место, где включения видны вполне отчетливо, хорошо заметны клеточные границы и окрасились клеточные ядра; рассмотреть и зарисовать препарат следует при сильном увеличении.
Клеточные границы при примененной здесь фиксации не так заметны, как на препаратах или но все же видны достаточно ясно.
Ядра печеночных клеток — гепатоцитов как обычно, круглые, окрашены сафранином в красный цвет и, как это типично для осмированных препаратов, имеют более гомогенный вид, чем при других фиксациях; только местами в них заметны крупные хроматиновые глыбки.
Цитоплазма гепатоцитов окрашена в бледный желтовато-зеленый цвет. В цитоплазме видны липидные включения в виде шариков различной величины, разбросанных по всей клетке и окрашенных в темный (от бурого до черного) цвет. Между печеночными клетками видны пигментные клетки.
