Выявление микобактерий методом микроскопии препаратов, окрашенных по Цилю-Нильсену
Вестник ЦНИИТ № 1 2019
107
6. Осторожно (!)
смывают остатки краски
слабой струей проточной воды или водой из ре-
зервуара (рис. 4.5). Вода должна быть комнат-
ной температуры или холодной.
7. После каждой процедуры промывки, во
избежание разбавления реактивов,
каждое стек-
ло аккуратно ставят пинцетом на ребро, чтобы
стекли остатки воды (рис. 4.6).
8. Мазок обесцвечивают 25% раствором
серной кислоты или 3% солянокислым спиртом
(рис. 4.7), добиваясь визуального эффекта пол-
ного обесцвечивания. Продолжительность про-
цедуры обесцвечивания –
3 минуты.
9. Мазок промывают проточной водой, как
описано ранее.
10. Мазок докрашивают 0,3% раствором ме-
тиленового синего (рис. 4.8) в течение
60 секунд.
11. Мазок промывают проточной водой, как
описано ранее.
12. Мазок высушивают при комнатной темпе-
ратуре в вертикальном положении (рис. 4.9). Не
следует промокать препарат!
В результате МБ окрашиваются в малино-
во-красный цвет, а
другие микроорганизмы
и клеточные элементы – в голубой. Препарат
микроскопируют в световом микроскопе с мас-
ляной иммерсией.
При
проведении процедуры обесцвечива-
ния мазков рекомендуется визуально оценивать
степень обесцвечивания мазка, добиваясь ис-
чезновения красного цвета. При неполном обес-
цвечивании мазка процедуру следует повторить.
Препарат считается недостаточно обесцвеченным
в том случае, если в окрашенном мазке мокроты
сохраняется пигмент карболового фуксина.
Считается,
что сапрофитные виды МБ зна-
чительно менее устойчивы к обесцвечиванию,
чем патогенные штаммы. В связи с этим наилуч-
шим вариантом является проведение процедуры
обесцвечивания мазка с помощью 25% серной
кислоты в течение 3 минут, после чего может
быть рекомендовано проведение дополнитель-
ной обработки мазка 96%
этиловым спиртом
в течение 5 минут для удаления с мазка кристал-
лов и остатков краски. Указанный режим обес-
цвечивания позволяет избежать ложноположи-
тельного выявления КУМ.
Достарыңызбен бөлісу: