Вопросы для ветеринарных специалистов лабораторий ргп «рвл» Бруцеллез, инфекционный эпидидимит и методы их диагностики?Бруцеллёз

Постановка и учет кольцевой реакции с молоком на бруцеллез

жүктеу/скачать 434 Kb. бет 45/54 Дата 21.10.2022 өлшемі 434 Kb. #44662

Бұл бет үшін навигация:

• 168. Диагностическая оценка результатов исследований сывороток крови на бруцеллез при исследовании методами РСК, РА, РБП.

167. Постановка и учет кольцевой реакции с молоком на бруцеллез. Уленгутовские пробирки устанавливают в резиновые штативы и нумеруют в соответствии с описью проб молока. В пробирки разливают по 0,05 мл антигена, затем шприцем с иглой длиной 50-60 мм, нажимая на поршень слабыми толчками, вливают в них по 1 мл молока и тщательно смешивают его с антигеном. После каждой пробы молока шприц двукратно промывают теплой водой. При постановке КР в пробирках Флоринского или серологических берут по 2 мл молока и добавляют по 0,1 мл антигена, затем пробирки тщательно встряхивают для перемешивания молока с антигеном. При каждой постановке реакции одновременно с испытуемыми пробами молока ставят контроли: с молоком от заведомо здоровой коровы (буйволицы); со смесью молока здоровой коровы и позитивной бруцеллезной сыворотки (0,05 мл сыворотки на 1 мл молока). Штативы с испытуемыми и контрольными пробами молока помещают в водяную баню или термостат при 370С на 1 ч. Учет результатов: +++ четко выраженное синее кольцо в верхней части столбика молока в слое сливок (остальная часть молока остается белой);++ достаточно выраженное синее кольцо в слое сливок (остальная часть молока имеет синеватый цвет); +синее кольцо в слое сливок выражено слабо, и весь столбик молока имеет синий цвет; - столбик молока остается равномерно окрашенным в первоначальный синий цвет, кот был получен сразу после добавления к нему антигена, а слой сливок белого или слегка желтоватого цвета. Все пробы, давшие 2, 3 креста считают положительными, а 1 крест сомнительной. 168. Диагностическая оценка результатов исследований сывороток крови на бруцеллез при исследовании методами РСК, РА, РБП.Учет результатов при РСК: # (4 креста) отсутствие гемолиза, надосадочная жидкость прозрачная и бесцветная; +++ (3 креста) гемолиз 25% эритроцитов; ++ (2 креста) гемолиз 50% эритроцитов; + (1 крест) гемолиз 75% эритроцитов; - (минус) полный гемолиз эритроцитов, осадок отсутствует, жидкость интенсивно окрашена гемоглобином. Реакцию связывания комплемента учитывают визуально. При постановке реакции в одной пробирке (при массовом исследовании) учет проводят один раз – сразу после извлечения штативов из водяной бани. Учет результатов РА: # (четыре креста) Полное просветление жидкости, микробные тела антигена осели на дно пробирки в виде «зонтика», при легком встряхивании «зонтик» разбивается на хлопья и комочки, а жидкость остается прозрачной (100% агглютинация) +++ (три креста) Неполное просветление жидкости и хорошо выраженный «зонтик» (75% агглютинации) ++ (два креста) Просветление жидкости, «зонтик» умеренно выражен (50% агглютинации) + (один крест) Едва заметное просветление жидкости, «зонтик» выражен слабо, при встряхивании заметно небольшое количество хлопьев или комочков (25% агглютинации) - (минус) Просветление жидкости и образования «зонтика» не наступило, на дне пробирки виден «пунктик» осевших микробов антигена, при легком встряхивании образуется равномерная взвесь Для объективной оценки результатов РА готовим в четырех пробирках стандарты мутности, соответствующие 0 (нулю), 25, 50, и 75%-там просветления жидкости в следующей последовательности:в четыре пробирки последовательно вносит антиген в дозировках 1, 2, 3 и 4 мл соответственно, разведенного 1:10 или 1:20;в том же порядке в три первые пробирки добавляет соответствующий фенолизированный раствор в дозировках 3, 2 и 1 мл соответственно (в четвертую пробирку раствор не добавляется);встряхивает пробирки и переносит из каждой пробирки жидкость в дозировке 0,5 мл в отдельные пустые пробирки;добавляет в каждую пробирку фенолизированный физиологический раствор в дозировке 0,5 мл.Полученные стандарты соответствуют 75, 50 и 25%-там просветления жидкости. В последней, четвертой пробирке просветление отсутствует. Реакция считается положительной при наличии агглютинации с оценкой не менее чем 2 креста (++).Учет результатов РБП:Оценка результатов реакции проводится невооруженным глазом в течение 4 минут после смешивания сывороток с антигеном при слегка наклонном положении пластинки.Реакция агглютинации, появляющаяся позже 4 минут, не учитывается.Реакция считается положительной при наличии выраженной агглютинации окрашенных бруцелл антигена в виде мелких или крупных хлопьев розового цвета, выделяющихся на белом фоне лунки.Реакция считается отрицательной при отсутствии агглютинации (смесь гомогенна, равномерно окрашена). жүктеу/скачать 434 Kb. Достарыңызбен бөлісу: