Зерттеудің молекулалық-генетикалық әдістері Нур-Султан 2022г. I ақпараттық блок


ДНҚ-ны бөліп алудың негізгі кезеңдері



бет2/4
Дата04.01.2023
өлшемі3,59 Mb.
#60384
түріСабақ
1   2   3   4
Байланысты:
№9 ОБӨЖ

ДНҚ-ны бөліп алудың негізгі кезеңдері.

  • ДНҚ-ны бөліп алудың негізгі кезеңдері.
  • II кезең Тазалау әдісі.
  • Нуклеин қышқылдарын жасуша экстрактысынан тазарту үшін мынадай әдістер қолданылады:
  • бөлу/тұндыру
  • -хроматография
  • - Центрифугалау
  • - аффиндік бөліну

ДНҚ-ны бөліп алудың негізгі кезеңдері.

  • ДНҚ-ны бөліп алудың негізгі кезеңдері.
  • Бөліп алу/тұндыру
  • Еріткіштерді алу көбінесе нуклеин қышқылдарынан тұратын қоспаларды кетіру үшін қолданылады. Мысалы, еріткіштердің комбинациясы: фенол-хлороформ жиі ақуыздарды кетіру үшін қолданылады. Изопропанолмен немесе этанолмен тұндыру әдетте нуклеин қышқылдарының концентрациясы үшін қолданылады. Нуклеин қышқылын тұндырудың басқа әдістеріне селективті преципитация жатадытұздардың жоғары концентрациясы ("тұздану") немесе РН айнымалысын қолдана отырып ақуыздарды тұндыру.

II. Амплификация. ПТР

  • ДНҚ фрагменттерінің көптеген көшірмелерін алу-ПТР(полимеразды тізбекті реакция) көмегімен.
  • 1983 жылы оны американдық ғалым Кэри Мюллис ашты, ол үшін ол кейіннен Нобель сыйлығын алды.

Таблица 1.
ПТР сипаттамасы

Этапы ПЦР

  • 1.Денатурация (95 ° C) - екі ДНҚ тізбегін бір-бірінен бөлу. • 2.Будандастыру (балқыту) - матрицадағы қосымша алаңдарға праймерді бекіту (45-65 ° C). – 72 °С температурада тізбектің
  • 3.• Синтезі (элонгация) - ДНҚ-ны толықтыратын синтез.

ПТР талдауындағы ДНҚ молекулаларының көшірмелер санының өсу схемасы

III. ДНҚ Электрофорез

  • ДНҚ фрагменттерін агарозды гелмен бөлу. ДНҚ электрофорезі арнайы құрылғы - электрофоретикалық камераның көмегімен жасалады. Камерада полюстері әртүрлі электродтар болады, теріс электрод аймағына ДНҚ фрагменттерінің үлгісі енгізіледі. Тұрақты электрлік алаң әсерінен ДНҚ фрагменттерін олардың көлемі мен молекулалық массасына байланысты бөледі (теріс полюстан оңға қарай қозғалады). ДНҚ электрофорезі молекулалық-генетикалық диагностиканың әртүрлі әдістерінде қолданылады


Достарыңызбен бөлісу:
1   2   3   4




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет