Зерттеудің молекулалық-генетикалық әдістері Нур-Султан 2022г. I ақпараттық блок

КеАҚ «Астана Медицина Университеті»

БӨЖ №9

Тақырып: Зерттеудің молекулалық-генетикалық әдістері

I Ақпараттық блок

• I Ақпараттық блок

Ағымдағы сабақтың сұрақтары :

• Молекулалық-генетикалық зерттеудің маңызы
• Негізгі молекулалық-генетикалық әдістер

I. ДНҚ үлгілерін алу.

II. Амплификация. ПТР

III. ДНҚ электрофорезі

IV. ДНҚ-ны секвенирлеу

V. Рестрикциялық талдау

VI. Саузерн-блот гибридизация (Southern blot hybridization)

4. Глоссарий

II Практическая часть.

Тапсырма №1. ПТР-дің сипаттамасын альбомға көшіру

Тапсырма №2. Альбомға ПТР талдауындағы ДНҚ молекулаларының көшірмелер санының өсу схемасын сызу

Тапсырма №3.ДНҚ-ны секвенирлеуінің нәтижесін альбомға сызу

Бақылау сұрақтарға жауап беру

1. Молекулалық-генетикалық зерттеудің маңызы

• Молекулалық-генетикалық әдістер ДНҚ фрагменттерін талдауға, жеке гендер мен олардың сегменттерін табуға және оқшаулауға және оларға нуклеотидтер тізбегін орнатуға мүмкіндік береді. Молекулалық-генетикалық әдістер зерттелетін ДНҚ учаскесінің (Аллель, ген, хромосома аймағы) құрылымындағы вариацияларды анықтауға арналған.
• Бұл әдістердің негізінде ДНҚ мен РНҚ-ны манипуляциялау жатыр. Бұл күрделі диагностикалық әдістер, белгілі бір зертханалық жағдайларды және білікті қызметкерлерді дайындауды қажет етеді. Көптеген мутацияларды толық сипаттау үшін қатесі бар ДНҚ аймағындағы нуклеотидтер тізбегін анықтау қажет.

Биологиялық материалдан ДНҚ-ны бөліп алу процесінде негізгі міндет - жасушаларды ыдырату үшін тіндерді жақсы тазарту, содан кейін препаратты алу үшін ДНҚ-ны онымен бірге жүретін ақуыздардан және бөгде қоспалардан бөлу және таза және жарамды үлгіні ПТР қоюға.

• Биологиялық материалдан ДНҚ-ны бөліп алу процесінде негізгі міндет - жасушаларды ыдырату үшін тіндерді жақсы тазарту, содан кейін препаратты алу үшін ДНҚ-ны онымен бірге жүретін ақуыздардан және бөгде қоспалардан бөлу және таза және жарамды үлгіні ПТР қоюға.

• Ақуыздардың ферментативті ыдырауы(мысалы, протеиназа К көмегімен).

Жасуша мембраналарының ыдырау процесі және жасушаішілік нуклеазалардың инактивациясымен біріктірілуі мүмкін. Мысалы, бір ерітіндіңің құрамында жасушаішілік ферменттердің инактивациясын және жасуша мембранасын ерітетін детергенттер және хаотропты тұздар болуы мүмкін . Жасуша лизисінен және нуклеазалардың инактивациясынан кейін жасуша массасын сүзу немесе тұндыру арқылы оңай жоюға болады.