Тақырыбы: птр-ды гендерді клондауда, днқ секвенирлеуде мутагенезде полимеразды тізбекті реакцияның маңызы
жүктеу/скачать 1,42 Mb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- ▪ полимеразды тізбекті реакция (ПТР) кезеңдерін түсіну;
- Егер ДНҚ көшірмесін арттырғымыз келсе, бізге не қажет
- ПТР үдерісі
- Таныстырылымындағы негізгі ақпараттарды концепт карта түрінде жұмыс дәптерлеріне түсіріндер.
|
Тақырыбы: ПТР-ды гендерді клондауда, ДНҚ секвенирлеуде мутагенезде полимеразды тізбекті реакцияның маңызы 10 сынып www.astana-modern.kz Сабақтың мақсаты:Сабақтың мақсаты:▪ полимеразды тізбекті реакция (ПТР) кезеңдерін түсіну;▪ ПТР медицинада, таксономия мен криминалистикадағы қолданудың маңызын сипаттау;Полимеразды тізбекті реакция анимациясыhttps://www.youtube.com/watch?v=iQsu3Kz9NYo Мысалы, ПТР көмегімен амплифицирленген ДНҚ, секвенирленген ДНҚ, гель-электрофорез көмегімен көрінетін ДНҚ немесе келесі тәжірибелер үшін плазмидке клондау. ПТР-да әдетте пайдаланылатын ДНК полимераза Таg полимеразa деп аталады, ол оқшауланған ыстыққа төзімді бактериядан (Thermus aquaticus) бөлініп алынған. Бұл термотұрақтылық Таg полимеразaға ПТР жүруі үшін аса қажет. Егер ДНҚ көшірмесін арттырғымыз келсе, бізге не қажет?ПТР үдерісі ПТР үдерісіӘрбір ПТР реакциясына екі праймер пайдаланылады, олардың құрылымы сондай мақсатты аймақтың (көшіріліп алынатын аймақ) екі ұшынан қаптайды. Яғни, оларға қарама-қарсы тізбек ДНҚ-матрицамен байланыстыру үшін ұсынылған реттілік көшірмесі аймақтың шетінен басталады. Праймерлер қосымша нуклеотидтерді ДНҚ үлгісімен жұптастыру арқылы байланыстырады. ПТР үдерісі ПТР САТЫЛАРЫНЫҢ ЕРЕКШЕЛІКТЕРІ: • ПТР 3 негізгі сатыдан тұрады, 20-40 рет қайталанып отырады. Бұл цикл термоциклді аппаратта жүреді, ол оте аз уақыт ішінде қоспалық реакцияның температурасын жоғарылатады немесе төмендетеді. • Денатурация – 94°C жуық: • Денатурация кезінде ДНК-ң 2 тізбегі балқиды да бір тізбекті болып түзіледі. (барлық энзимді реакциялар тоқтайды). • Аннеалинг (күйдіру) – 54°C жуық: • Сутектік байланысы біртіндеп құралады және бір тізбекті ДНК мен жалғыз праймерлер арасы бұзылады. Егер праймер ДНҚ-ң комплементарлы аймағында орналасса, праймер матрицада қалып қояды себебі сутектік байланыс өте күшті. • Ұзаруы (элонгация) – 72°C жуық ПТР үдерісіБекіту сұрақтары▪ ПТР дегеніміз не? ▪ ПТР-ге қажетті ингредиенттер? ▪ ПТР-ның қандай кезеңдері бар? ▪ ПТР нәтижесінде не түзілді? Таныстырылымындағы негізгі ақпараттарды концепт карта түрінде жұмыс дәптерлеріне түсіріндер.ПТР кезерінің суреттері мен сипаттамаларын сәйкестендіріңіз.Жауап: 1 А , 2 В, 3 С, 4 Д, 5 Е Назарларынызға рахмет. жүктеу/скачать 1,42 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|