У грамотрицательных бактерий пептидогликаноднослоен и покрытнаружной мембраной с мозаичным строением. В ее состав входит липопротеид, образующий глобулярный слой в результате ковалентной связи с пептидогликаном. Он покрыт пластинчатой мембраноподобной структурой, состоящей из фосфолипидов, липополисахарида (ЛПС) и белков. Наружная мембрана пронизана белками-поринами — своеобразными выводными каналами, которые обеспечивают диффузию химических веществ из внешней среды в микробную клетку. У грамотрицательных бактерий между клеточной стенкой и цитоплазматической мембраной расположено периплазматическое пространство,заполненное гидролитическими ферментами, рибонуклеазой 1, фосфатазой, Р-лактамазой и др. В периплазматическом пространствепроисходит расщепление большинства питательных веществ, поступающих в бактериальную клетку.
4.Простые и сложные методы окраски. Определение и примеры. Техника окраски по Граму. Простыми методами окрашивания называют окрашивание препаратов каким-либо одним красителем. Чаще всего при этом используется фуксин, генциановый фиолетовый, метиленовый синий.
При сложных методах окрашивания на один и тот же препарат воздействуют несколькими красящими веществами, одно из которых называется основным, другие – дополнительными.
Метод окраски по Граму является важным диагностическим методом. Все бактерии по отношению к окраске по Граму делятся на грамположительные - темно-фиолетового цвета и грамотрицательные - розового.
Метод Ожешко. Используется раствор соляной кислоты в качестве протравы, разрыхляющей оболочку споры, которая плохо воспринимает красители. Методом Ожешко выявляют споры.
Метод Нейссера используется для выявления зерен волютина. Мазок окрашивается уксуснокислым метиленовым синим 2-3 минуты, при этом происходит химическое взаимодействие красителя и волютина.
Метод Бурри-Гинса используется для окраски капсульных бактерий и основан на том, что капсула не воспринимает красители. Капсулу выявляют негативным контрастированием фона по Бурри.
Универсальным методом окраски микроорганизмов является окраска по Романовскому-Гимзе (смесью азура, эозина и метиленового синего). Этот метод используют при исследовании риккетсий, хламидий, спирохет.
