9.Принципы микрбиологического контроля лекарственных препаратов Обсеменение ЛС возможно на всех этапах его заготовки и при хранении. Размножившееся микроорганизмы вызывают изменение фармакологических свойств препаратов, полученных из лекарственных растений.
ЛП, не требующие стерилизации, обычно содержат микроорганизмы. Поэтому их испытывают на микробиологическую чистоту: проводят количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов, также выделяют организмы, которые должны присутствовать в нестерильных ЛС.
Методы определения стерильности: • Мембранная фильтрация– наиболее предпочтительный метод, если испытуемый препарат фильтруется;
Принцип метода:
• Образец фильтруют через мембранный фильтр, который задерживает присутствующие микроорганизмы.
• Помещают фильтр с задержанными на нем микроорганизмами в питательную среду и инкубируют.
• Если все условия проведения анализа соблюдены, то есть правильно выбраны материал, структура и размер пор фильтра, условия проведения фильтрования, состав питательной среды, температура и время инкубирования, то микроорганизмы быстро размножаются и образуют визуально обнаруживаемый рост (помутнение среды).
• Метод прямого посева.
Методы определения микробиологической чистоты нестерильных ЛС: 1.Метод высева на чашки Петри с питательной средой:
- метод глубинного посева
- метод поверхностного посева
2. Метод мембранной фильтрации
3. Метод наиболее вероятного числа (наименее точный метод, используется для продуктов с очень низкой бионагрузкой).
Принцип: методы основаны на посеве на/в питательные среды определенного количества образца препарата, инкубировании, подсчете выросших колоний и выявлении специфических микроорганизмов, интерпретации полученных результатов.
По ТУ (техническое условие) в препаратах, применяемых через рот, допускается содержание в 1,0 г 1000 бактерий из них 100 клеток дрожжевых и плесневых грибов.
В препаратах, предназначенных для введения в полость уха, носа, интравагинально, допускается содержание в 1,0 г 100 бактерий, в том числе и грибов.
Кроме микробиологического контроля чистоты препаратов по микробному числу, не разрешено содержание в них ряда микроорганизмов, что контролируется высевами на специальные среды.
- для обнаружения анаэробных микроорганизмов делают посев 1,0 мл разведенного препарата на тиогликолевую среду.
- для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae (кишечная палочка, сальмонелла, протей) 10,0 мл препарата вносят в накопительные среды, затем делают высев на Эндо и Висмут-сульфитный агар.
- для определения Pseudomonas aеruginosa (палочка синезеленого гноя). 10,0 мл вносят в МПБ с глицерином, инкубируют 48 часов и делают высев на МПА с глицерином или глюкозой.
- для обнаружения Staph. aureus. 10,0 мл препарата засевают сначала в мясо-пептонный бульон (МПБ) с маннитом, затем делают высев на МПА с маннитом или ЖСА.
