13. Методы выявления антибиотикочувствительности Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам:
1.диффузионные методы:
-с использованием дисков с антибиотиками
-с помощью Е-тестов
2.методы разведения
-разведение в жидкой питательной среде (бульоне)
-разведение в агаре
При определении чувствительности диско-диффузионным методом на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию определенной плотности и затем помещают диски, содержащие определенное количество антибиотика. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. После инкубации чашек в термостате в течение 12ч учитывают результат путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах.
Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие- вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации.
Методы разведения- использование двойных последовательных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. При этом антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду или в агар. Затем бактериальную суспензию определенной плотности, помещают в бульон с антибиотиком или на поверхность агара в чашке. После инкубации в течение ночи проводят учет полученных результатов. Наличие роста микроорганизма в бульоне или на поверхности агара свидетельствует о том, что данная концентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения концентрации антибиотика рост микроорганизма ухудшается. Первую наименьшую концентрацию антибиотика, где визуально не определяется бактериальный рост принято считать минимальной подавляющей концентрацией.
