Ақуыздар. Ақуызды тазалау әдістері Хамидов Султанбек

Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Бөлінетін белоктардың зарядына байланысты функциялық топтары бар белоктардың бір бөлігін колонкада алмасатын және кідіртетін лайықты ион алмастырғыш шайыр пайдаланылады, ал басқа белоктар колонкадан кедергісіз ағады. Колонкадағы "тұнған" ақуыздар колонкадан неғұрлым концентрацияланған тұз ерітінділерін қолдана отырып немесе элюенттің рН-ін өзгерте отырып алынады.
Ион алмасу хроматографиясының жаңа әдістері, атап айтқанда тиімділігі жоғары сұйық хроматография (ВЭЖХ) фармакологияда (дәрілік заттарды жасау және анықтау кезінде), клиникалық биохимияда (физиологиялық сұйықтықтарда биологиялық белсенді заттарды анықтау кезінде), Биотехнологиялық процестер мен өндірістерде және басқа салаларда кеңінен қолданылады: олар заттарды нано -, пико - және фемтаграммалық мөлшерде анықтауға мүмкіндік береді.

Аффинды хроматография (ұқсастығы бойынша хроматография).
Ақуыздардың (немесе басқа да макромалекулдердің) тасымалдағышта бекітілген (иммобилизацияланған) ерекше заттармен – субстраттар немесе коферменттер (қандай да бір фермент бөлінгенде), антигендер (немесе антиденелер), гормондар немесе рецепторлар және т.б. болуы мүмкін лигандтармен (немесе басқа да макромалекулдар) таңдамалы өзара іс-қимыл принципіне негізделген.

Бұл ақуызды колонкадан алу өзгерген рН немесе өзгертілген иондық күшпен буферлік қоспаларды элюирлеумен, сондай-ақ элюент құрамына ақуыздар мен лигандар арасындағы байланысты әлсірететін детергенттерді енгізумен жүзеге асырылады. Әдістің сөзсіз артықшылығы-берілген ақуызды немесе тазалықтың жоғары дәрежедегі басқа да биополимерді бір кезеңді бөліп алу мүмкіндігі. Аффинды хроматографияның көмегімен, мысалы, лигандтар ретінде белгілі бір тРНК (көліктік РНК) қосылған полиакрилгидразидагар геліне аминоацетил-тРНК-синтетазды тазартылған препараттарды салыстырмалы түрде оңай бөліп алуға мүмкіндік алды.

Достарыңызбен бөлісу:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10