Ақуыздар. Ақуызды тазалау әдістері Хамидов Султанбек
Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау
жүктеу/скачать 39,5 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалау
Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалауГельді хроматография. Препаративтік мақсаттарда, әсіресе ақуыздарды қоспалардан тазарту кезінде молекулалық електер немесе гель-хроматография әдісін кеңінен қолданады. Декстран полисахариді эпихлоргидринмен өңдеу кезінде суда ерімейтін және сефадекс деп аталатын ірі гидрофильді дәндердің қалыптасуына әкелетін көлденең байланыстың әр түрлі дәрежесі пайда болады. Суда еріп жүрудің арқасында астық хроматографиялық колонканы толтыратын гельдің пайда болуымен су ортасында қатты құрғайды. Заттардың осы әдіспен бөлінуі үлкен молекулалар стационарлы болып табылатын гельдің ішкі су фазасына енбейтіндігіне және жылжымалы фазамен бірге колонканың бойымен төмен қарай қозғала отырып, сыртынан қалатынына негізделген; шағын молекулалар, керісінше, жылжымалы және стационарлық фазалар арасында тепе-тең жүйе құрай отырып, дәннің ішіне еркін диффундирленеді және сәйкесінше аз жылдамдықпен колонканың бойымен қозғалады. Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалауӘдетте элюент сефадексі бар колонкадан шығатын заттардың пайда болу сәті формуламен көрінеді V=V0+KVi мұнда V – К деректері бар заттың элюирлеуші сұйықтығының көлемі, мл; V0 – колонканың бос көлемі немесе сыртқы еріткіштің жалпы көлемі (гель дәнінен тыс), мл; Vi – гель ішіндегі еріткіштің көлемі, мл; K – гель дәнінің ішіндегі еріткіш пен айналадағы еріткіш арасында еритін зат үшін таралу коэффициенті. Егер с = 1 бір ерітілген заттан тұратын Талданатын сынаманы С = 0 бағанына енгізсе, онда екінші зат элюирлеуші сұйықтықта V0 бағанасынан шыққаннан кейін бірден, ал біріншісі – v0+ Vi көлемі шыққаннан кейін ғана пайда болады. Ақуызды тазалау әдістері Белокты фракциондау және тазалауҮлкен молекулалық салмағы мен өлшемдері бар ақуыз молекулалары сефадекс дәндерінің ішіне диффундирленбейтіндіктен, олар v0 колонкасының бос көлемі шыққаннан кейін колонкадан бірінші болып жуылады, ал қалған заттардың барлығы (төмен молекулалық қоспаларды қоса алғанда) v0+ К · Vi тең көлем шыққаннан кейін жуылады. Әдіс препаративті энзимологияда кеңінен қолданылады. Сефадекстің көмегімен ақуызды әртүрлі молекулалық массамен бөлуге болады. жүктеу/скачать 39,5 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|