Доклинические исследования лекарственных средств на биологических моделях инсульта
Планирование исследования, выбор животного
жүктеу/скачать 182,05 Kb. Pdf көрінісі
|
| Планирование исследования, выбор животного
и статистическая обработка Первым шагом в моделировании эксперимен- тального инсульта является выбор вида животного. Традиционно в исследованиях используются следу- ющие виды: крыса, мышь, песчанка, кошка, свинья, собака, шимпанзе и макака-резус [25]. Многие ис- следователи отмечают, что при создании новых ле- карственных препаратов следует проводить докли- нические исследования минимум на двух, а лучше трех видах животных [5, 26]. Предпочтительнее вы- бирать не только грызунов, но также собак и других крупных млекопитающих. Для доклинических тестирований лекарствен- ных средств предпочтительнее использовать модели in vivo , чем модели на культуре нейронов или на пе- реживающих срезах. Работы на культуре нейронов или на переживающих срезах следует использовать для изучения отдельных механизмов патогенеза ишемии, а не для оценки эффективности воздей- ствия. Вторым этапом после выбора вида животного является планирование эксперимента. Проект экс- периментального исследования должен быть создан до начала исследования и утвержден на заседании локального этического комитета (ЛЭК). В проекте следует подробно указать характер и особенность модели инсульта, анестезию в ходе основного этапа исследования, продленное послеоперационное обез боливание и способ разрешенной эвтаназии животных после завершения обследования. Также заранее требуется описать статистические методы, которые используются на всех этапах исследования [11]. При малой выборке нецелесообразно исполь- зовать методы параметрической статистики (в том числе критерий Стьюдента, среднее арифметиче- ское и стандартное отклонение как в расчетах, так и в графиках), даже при доказательстве правильности распределения. В случае получения негативного ре- зультата считается неправомерным менять описан- ный в проекте статистический метод для подгонки результатов. Документы об утверждении проекта должны храниться в ЛЭК и в исследовательском центре. Для экспериментов необходимо использовать здоровых линейных животных. Требуется предопе- рационное тестирование животных по общему со- матическому здоровью, на наличие неврологиче- ского дефицита и особенностей поведения. При ис- пользовании неврологических и иных шкал реко- мендуется предоперационное тестирование. Ис- пользование стандартных и общепринятых шкал позволит в будущем использовать материал опубли- кованных результатов для метаанализа. Многие тесты для правильного использования требуют учета доминантности полушарий, следова- тельно при проведении поведенческих тестов пред- почтительнее оценить доминантность полушарий (право/леволапость) у каждого животного. Приветствуется проведение предварительных (пилотных) исследований на небольшой группе жи- вотных для последующего более эффективного пла- нирования экспериментов. Однако следует отме- тить, что нельзя ограничиваться небольшими иссле- дованиями, так как они не могут составлять основ- ную часть работы и используются для обоснования дизайна крупного исследования. При работе с крысами и мышами опыт и содер- жание животных следует планировать таким обра- зом, чтобы исключить все возможные варианты не- запланированного стресса для экспериментальных животных. Есть ряд видовых особенностей, которые могут предрасполагать к развитию стресса у грызу- 47 ЖУРНАЛ НЕВРОЛОГИИ И ПСИХИАТРИИ, 12, 2017; Вып. 2 нов. Для профилактики стресса у крыс и мышей во время эксперимента следует учитывать следующее: 1) нельзя брать крысу за холку и конец хвоста, не- обходимо брать животное за хвост ближе к середине его длины; 2) клетки с крысами и мышами должны быть достаточно высокими; 3) в клетку следует по- мещать не более 5 здоровых животных, не рекомен- дуется селить в клетки по одному животному; после операции — не более чем по 3 крысы в клетке; 4) ви- деокамера и приборы включаются заранее до опыта, чтобы животные привыкли к их звуку; 5) необходи- мо выключить мобильные телефоны во время рабо- ты с животным; 6) у крыс должен быть свободный доступ к воде и питанию; 7) световой режим должен составлять 8—10/14 ч свет/темнота для крыс и мы- шей [27]; 8) подстилка после операции должна быть та же, что и до нее (иметь запах этого животного); 9) не рекомендуется шуршать бумагой; 10) требуется исключить вызывающий панику у норных живот- ных звук ссыпания (например, корм и опилки); 11) отличие по массе тела у крыс одной группы не должно быть более 10—20 г; 12) после транспорти- ровки отводится не менее 2, но не более 7 дней для карантина; 13) животным следует в течение экспе- римента давать корм одного типа и производителя; нельзя менять питание в течение исследования. жүктеу/скачать 182,05 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|