Доклинические исследования лекарственных средств на биологических моделях инсульта
жүктеу/скачать 182,05 Kb. Pdf көрінісі
|
| Методы оценки повреждения мозга
Оценка повреждения мозга является основой в современной экспериментальной неврологии. От методов оценки зависит интерпретация результатов исследования. Так, в дискуссии, опубликованной в статье J. Baron и соавт. [5], указано, что в настоящий момент в большинстве экспериментов используют- ся биологические конечные точки — размер инфар- кта мозга и концентрация биомаркеров в крови. В клинических исследованиях используются оценка 50 ЖУРНАЛ НЕВРОЛОГИИ И ПСИХИАТРИИ, 12, 2017; Вып. 2 функциональных исходов и неврологические шка- лы, но почти не учитываются размер инфаркта и ла- бораторные биомаркеры. Экспериментальных ана- логов данным функциональным исходам и тестам пока не разработано. Одной из современных задач является создание новой шкалы для оценки функ- циональных нарушений с учетом видовых особен- ностей морфологии, физиологии, поведения, зоо- психологии и этологии. Такая шкала должна решать те же задачи, которые ставятся для неврологических и реабилитационных шкал у человека, но с учетом видовых особенностей выбранного животного. Для оценки валидности наиболее используемых неврологических шкал предпринималась попытка тестировать их на модели 30-минутной ишемии го- ловного мозга у крыс [53]. Были выбраны следую- щие тесты: тест хождения по балке, тест установки позы, угловой тест, вытягивание лапы, шкала mNSS, Бедерсон-тест и шкала Гарсия на 2, 7, 14, 21 и 28-й дни постишемического периода. Были получены результаты, согласно которым все выбранные тесты позволяли выявить и количественно оценить невро- логический дефицит у крыс. Наиболее чувствитель- ными и репрезентативными оказались шкала Гар- сия, тест с вытягиванием лапы и Бедерсон-тест. Именно эти тесты можно рекомендовать для оценки в эксперименте. При фокальной транзиторной 30-минутной ишемии головного мозга крысы развиваются пове- денческие нарушения и очаговый неврологический дефицит в виде двигательных, чувствительных и ко- ординаторных нарушений, которые постепенно ре- грессируют к 28-м суткам. Данная модель ишемии у крыс позволяет воспроизводить ишемический ин- сульт с регрессом неврологических симптомов в те- чение месяца, что может в некоторой степени соот- ветствовать лишь небольшой группе пациентов [21]. Модель инсульта у крыс формирует только транзи- торный неврологический дефицит, но это позволяет при изучении долговременных эффектов лекар- ственных средств оценивать и сравнивать скорость восстановления после церебральной ишемии. Таким образом, для эффективной оценки по- вреждения целесообразно использовать комплекс методов, включающих [5]: определение размера очага повреждения мозга (витальная окраска трифе- нилтетразолия хлоридом, магнитно-резонансная или компьютерная томография), оценку неврологи- ческого дефицита, мозгового кровотока (ультразву- ковая или лазерная флоуметрия, позитронно-эмис- сионная томография, однофотонная эмиссионная компьютерная томография и др.). Результаты пока- зывают, что возможно изменение выраженности симптомов поражения головного мозга в экспери- менте без изменения размеров очага, поскольку его изменение не всегда влечет за собой уменьшение неврологического дефицита [24]. Все тесты для оценки кровотока и физиологиче- ских показателей могут быть использованы как для оценки действия исследуемого лекарственного пре- парата, так и для контроля качества эксперимен- тальной ишемии головного мозга [22, 24]. При мо- делировании ишемии на протяжении всего опыта необходим контроль степени окклюзии СМА и сте- пени реперфузии с применением соответствующих инструментальных методов. Используются следую- щие точки для контроля: до ишемии, в начале ише- мии, в конце ишемии и после реперфузии [22, 24]. При тестировании новых лекарственных препара- тов следует исследовать их эффективность в зависи- мости от дозы. Рекомендуется использовать не ме- нее 4 точек (доз) [20]. Для комплексной оценки эффективности ней- ропротективных препаратов и вмешательств целе- сообразно использовать как введение препарата до ишемии (профилактический режим), так и во время ишемии и после реперфузии (терапевтические ре- жимы). Для всеобъемлющей оценки требуется от- сроченное введение через 24 ч и более. Предполага- ется, что препарат, обладающий нейропротектив- ным эффектом при всех режимах введения, имеет высокий потенциал клинического внедрения, одна- ко возможно, что некоторые препараты будут воз- действовать в определенные периоды ишемическо- го повреждения. Например, антиоксиданты эффек- тивны при реперфузии, а антиапоптотические сред- ства — в отдаленном постишемическом периоде [17]. Тестирование нейропротекторов должно проис- ходить как на моделях с ишемией без реперфузии, так и с реперфузией. Использование разных сроков длительности ишемии повышает эффективность исследования нейропротективного эффекта. Для окончательной оценки важно длительное наблюдение за животным и отсроченная оценка. Целесообразны длительные эксперименты с оцен- кой повреждения мозга через 1—2 мес после ише- мии [5, 17]. Этот подход позволяет оценить влияние ишемии на дегенеративные процессы в головном мозге, постинсультные когнитивные (поведенче- ские) нарушения и депрессию. жүктеу/скачать 182,05 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|