О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология



Pdf көрінісі
бет111/305
Дата20.12.2022
өлшемі14,39 Mb.
#58441
түріУчебник
1   ...   107   108   109   110   111   112   113   114   ...   305
Байланысты:
8dccb36

Реакция кольцепреципитации. В преципитационную пробирку с 
помощью пастеровской пипетки вносят 0,2-0,3 мл (5-6 капель) сыворотки 
(сыворотка не должна попадать на стенки пробирки). На сыворотку осторожно 
наслаивают антиген в таком же объеме, наливая его тонкой пастеровской 
пипеткой по стенке пробирки. Пробирку при этом держат в наклонном 
положении. При правильном наслаивании между сывороткой и антигеном 
должна получиться четкая граница. Осторожно, чтобы не перемешать 
жидкости, пробирку ставят в штатив. При положительном результате реакции 
на границе антигена и антитела образуется мутное "кольцо" - преципитат (см. 
рис. 48). 
Реакцию сопровождают рядом контролей (табл. 18). Очень важна 
последовательность внесения в пробирку ингредиентов реакции. Нельзя 


наслаивать сыворотку на антиген (в контроле - на изотонический раствор), так 
как относительная плотность сыворотки больше, она опустится на дно 
пробирки, и граница между жидкостями не выявится. 
 
Таблица 18. Схема постановки реакции кольцепреципитации 
Примечание. + наличие "кольца"; - отсутствие "кольца". 
Учет результатов производят через 5-30 мин, в некоторых случаях через час, 
как всегда начиная с контролей. "Кольцо" во 2-й пробирке свидетельствует о 
способности иммунной сыворотки вступать в специфическую реакцию с 
соответствующим антигеном. В 3-5-й пробирках "колец" не должно быть - там 
нет соответствующих друг другу антител и антигенов. "Кольцо" в 1-й пробирке 

положительный результат реакции - говорит о том, что испытуемый антиген 
соответствует взятой иммунной сыворотке, отсутствие "кольца" ("кольцо" 
только во 2-й пробирке) свидетельствует о их несоответствии - отрицательный 
результат реакции. 
Реакция преципитации в агаре (геле). Особенность реакции в том, что 
взаимодействие антигена и антитела происходит в плотной среде, т. е. в геле. 
Образующийся преципитат дает в толще среды мутную полосу. Отсутствие 
полосы свидетельствует о несоответствии компонентов реакции. Эту реакцию 
широко применяют при медико-биологических исследованиях, в частности 
при изучении токсинообразования у возбудителя дифтерии. 
Контрольные вопросы 
1. В чем основное различие между реакцией агглютинации и преципитации? 
2. Почему нельзя применять мутные ингредиенты в реакции преципитации? 
Задание 
1. Поставьте реакцию кольцепреципитации и зарисуйте результат. 


2. Изучите характер взаимодействия антигена с антителом в реакции 
преципитации в агаре, зарисуйте результат (чашку получите у преподавателя). 
Реакция лизиса (иммунный цитолиз) 
Иммунный лизис - это растворение клеток под воздействием антител при 
обязательном участии комплемента. Для реакции необходимы: 
1. Антиген - микробы, эритроциты или другие клетки. 
2. Антитело (лизин) - иммунная сыворотка, реже сыворотка больного. 
Бактериолитическая сыворотка содержит антитела, участвующие в лизисе 
бактерий; гемолитическая - гемолизины, способствующие лизису 
эритроцитов; для лизиса спирохет нужны спирохетолизины, клеток - 
итолизины и т. д. 
3. Комплемент. Больше всего комплемента в сыворотке морских свинок
Эту сыворотку (смесь от нескольких животных) обычно используют в качестве 
комплемента. Свежий (нативный) комплемент нестоек и легко разрушается 
при нагревании, встряхивании, хранении, поэтому пользоваться им можно не 
дольше двух дней после получения. Для консервации комплемента к нему 
добавляют 2% борной кислоты и 3% сульфата натрия. Такой комплемент 
можно сохранять при 4° С до двух недель. Чаще применяют сухой комплемент. 
Перед употреблением его растворяют в изотоническом растворе до 
первоначального объема (указан на этикетке). 
4. Изотонический раствор. 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   107   108   109   110   111   112   113   114   ...   305




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет