О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология



Pdf көрінісі
бет113/305
Дата20.12.2022
өлшемі14,39 Mb.
#58441
түріУчебник
1   ...   109   110   111   112   113   114   115   116   ...   305
Байланысты:
8dccb36

Реакция бактериолиза. В этой реакции комплемент лизирует бактерии в 
присутствии соответствующей (гомологичной) сыворотки. Схема реакции 
принципиально сходна со схемой реакции гемолиза. Отличие состоит в том, 
что после двухчасовой инкубации из всех пробирок делают высев на чашки 
Петри со средой, благоприятной для взятого в опыт микроорганизма, чтобы 
узнать, лизирован ли он. При правильно поставленном опыте в посевах из 2-5-
й пробирок (контроли) должен быть обильный рост. Отсутствие роста или 
слабый рост в посеве из 1-й пробирки (опыт) говорит о гибели микробов, т. е. 
о том, что они гомологичны антителу. 
Внимание! Реакцию бактериолиза необходимо проводить в асептических 
условиях. 


Контрольные вопросы 
1. Что произойдет с эритроцитами, если вместо изотонического раствора 
натрия хлорида применить дистиллированную воду? Что лежит в основе этого 
феномена? 
2. Какая реакция произойдет при взаимодействии эритроцитов с 
гомологичной иммунной сывороткой в отсутствии комплемента? 
Задание 
Поставьте реакцию гемолиза. Зафиксируйте и зарисуйте результат. 
Реакция связывания комплемента 
Реакция связывания комплемента (РСК) основана на том, что 
специфический комплекс антиген - антитело всегда адсорбирует на себе 
(связывает) комплемент. 
Эту реакцию широко применяют при идентификации антигенов и в 
серодиагностике инфекций, особенно заболеваний, вызванных спирохетами 
(реакция Вассермана), риккетсиями и вирусами. 
РСК - сложная серологическая реакция. В ней участвуют комплемент и две 
системы антиген - антитело. По существу, это две серологические реакции. 
Первая система - основная состоит из антигена и антитела (один известный, 
другой нет). К ней добавляют определенное количество комплемента. При 
соответствии антигена и антитела этой системы они соединятся и свяжут 
комплемент. Образовавшийся комплекс мелкодисперсный и не виден. 
Об образовании этого комплекса узнают с помощью второй системы 
гемолитической или индикаторной. В нее входят эритроциты барана (антиген) 
и соответствующая им гемолитическая сыворотка (антитело), т. е. готовый 
иммунный комплекс. В этой системе лизис эритроцитов может произойти 
только в присутствии комплемента. Если комплемент связан первой системой 
(при соответствии в ней антигена и антитела), то во второй системе гемолиза 
не будет - так как нет свободного комплемента. Отсутствие гемолиза 
(содержимое пробирки мутное или на дне ее осадок эритроцитов) 
регистрируют как положительный результат РСК (рис. 35). 


 
Рис. 35. Схема реакции связывания комплемента (РСК). I - положительный 
результат (нет гемолиза); II - отрицательный результат (гемолиз) 
Если в первой системе антиген не соответствует антителу, то иммунный 
комплекс не образуется и комплемент останется свободным. Оставшийся 
свободным, комплемент участвует во второй системе, вызывая гемолиз, - 
результат РСК отрицательный (содержимое пробирок прозрачно - "лаковая 
кровь"). 
Компоненты реакции связывания комплемента:
1. Антиген - обычно лизат, экстракт, гаптен;
взвесь микроорганизмов Основная
2. Антитело - сыворотка больного система
3. Комплемент - сыворотка морских свинок
4. Антиген - эритроциты барана Гемолити- 
5. Антитело - гемолизин к эритроцитам барана ческая
6. Изотонический раствор система 


Ввиду того что в РСК участвует большое количество сложных компонентов, 
они должны быть предварительно оттитрованы и взяты в реакцию в точных 
количествах и в равных объемах: по 0,5 или 0,25, реже по 0,2 мл. 
Соответственно весь опыт проводят в объемах 2,5, 1,25 или 1,0 мл (большие 
объемы дают более точный результат). Титрование компонентов реакции 
проводят в том же объеме, в каком ставят опыт, заменяя недостающие 
ингредиенты изотоническим раствором. 
Подготовка ингредиентов 
1. 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   109   110   111   112   113   114   115   116   ...   305




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет