Фармацевтическая

406
5.2.9. В опции Specific report («Специальный отчёт») выбрать 
стиль отчёта, например, ABC, ABC-1, Perfomance («Производитель-
ность») и т. д. Затем нажать кнопку «ОК». 
5.2.10. В параметре Instrument curve («Инструментальная кри-
вая») выбрать необходимую кривую данных и нажать «ОК». В опции 
Run Time Checklist («Контрольный список времени выполнения») вы-
брать нужный метод для запуска и нажать кнопку «ОК». 
5.2.11. Далее в диалоговом окне вводится название, чтобы опи-
сать метод. Открыть меню («File») «Файл», нажать кнопку Save as 
(«Сохранить как»); открыть Method («Метод») и ввести имя метода с 
помощью слова и нажать «ОК». 
5.2.12. Программа запросит у вас имя программы для сохранения 
программы. После присвоения имени программы убедиться, что про-
грамма сохранена в папке соответствующего инструмента. 
5.3. Процедура одиночного метода. 
5.3.1. Чтобы открыть файл Method («Метод») и выбрать Load me-
thod («Запустить метод»), необходимо найти и выбрать необходимый 
метод, который хранится в файле, и нажать «ОК». 
5.3.2. Загружают выбраный метод с его параметрами. 
5.3.3. Чтобы открыть файл Run control («Запустить контроль») и 
выбрать опцию Sample information («Данные о образце»), необходимо 
ввести имя оператора, имя подпапки, в файле данных выбрать ручной 
вариант и ввести имя файла по данным. В Sample parameter («Пара-
метры образца») вводят номер ячейки флакона, название образца, ко-
личество образца и комментарии (любой), а затем нажать Run method 
(«Запустить метод»). 
5.3.4. Теперь запускается метод, и экран изменит цвет с зелёного 
на тёмно-синий. 
5.4. Порядок создания последовательности. 
5.4.1. Чтобы создать новую последовательность, щёлкнуть меню 
файла последовательности, нажать New Sequence («Новая последова-
тельность»). По умолчанию последовательность появится. 
5.4.2. Открыть файл меню Sequence («Последовательность») и 
нажать Sequence table («Таблица последовательности»), вводят 
Template for sample name («Шаблон для имени образца»), вводят имя 
образца, выбирают Method name («Имя метода») и количество виал, 
количество инъекций на флакон, и нажимают «ОК». 
5.4.3. Открыть меню File («Файл»), кликнуть Save as («Сохранить 
как»), откроется Sequence («Последовательность»), ввести имя для 
«Последовательности» и выбрать местоположение в соответствую-
щий каталог. Нажать кнопку «ОК». 
5.4.4. Отобразится «Последовательность», которую можно редак-
тировать в соответствии с названием образца. Выбрать положение 
флакона с подвижной фазой. Объём инъекции, имя программы, имя 
метода, состояние впрыска, время впрыска и дата будут отображаться 
396

407
автоматически. Сохранить все выполненные изменения в «Последова-
тельности». 
5.5. Порядок выполнения «Последовательности». 
5.5.1. Чтобы запустить «Последовательность», открыть файл 
Run control («Запустить контроль»), нажать Run sequence («Запустить 
последовательность»). Инструмент запускается автоматически. 
5.5.2. Откроется диалоговое окно Injection list («Список впрыски-
ваний»), на котором отображаются название последовательности и 
комментарий. 
5.5.3. Во время выполнения задания хроматограмму можно про-
сматривать в онлайн-режиме. 
5.6. Порядок анализа данных. 
5.6.1. Нажать один раз на папку Data analysis («Анализ данных»), 
открыть конкретный файл с данными (после завершения обработки 
данных по образцу), чтобы посмотреть необработанные данные. Не-
обработанные данные обрабатываются автоматически в соответствии 
с методом количественного определения, указанным в файле. 
5.6.2. Необработанные данные можно интегрировать, щёлкнув 
значок Editor («Редактор») в верхней части экрана и выбрав опцию 
Detection («Обнаружение») в нижней части диалогового окна. Хрома-
тографические пики можно отметить с помощью параметра Peak table 
(«Таблица пиков») в нижней части диалогового окна «Редактора». 
5.6.3. Сохранить изменения, внесённые в метод количественного 
анализа. 
5.6.4. Нажать значок Printer layout («Макет принтера») в верхней 
части экрана. Окончательный отчёт отображается в соответствии с 
выбранным стилем отчёта. 
5.6.5. Отрегулировать масштаб хроматограммы, если требуется, 
нажать на опцию Edit («Редактировать») и выбрать свойства хромато-
граммы. Свойства хроматограммы содержат шкалы времени и сигна-
ла, которые могут корректироваться по мере необходимости. Нажать 
«ОК», чтобы закрыть окно. 
5.6.6. Сохранить все изменения в формате отчёта. Нажать на зна-
чок Print («Печать») в верхней части экрана для распечатывания хро-
матограммы. Для просмотра и распечатывания последующей хрома-
тограммы нажать Next («Далее»). 
5.6.7. Из отчёта можно выбрать параметры производительности и 
пригодности системы. 
5.7. Процедура выключения системы. 
5.7.1. После завершения анализа промыть хроматографическую 
колонку водой очищенной и соответствующим растворителем для 
консервации колонки. 
5.7.2. Открыть окно панели. Дисплей показывает меню управле-
ния. Выключить ультрафиолетовую лампу. 
397

408
5.7.3. Установить скорость потока на ноль. Выключить двигатель 
насоса, термостат колонки. 
5.7.4. Закрыть диалоговые окна браузера хроматографической 
программы. 
5.7.5. Отключить питание. После завершения самодиагностики 
выключить компьютер. 
5.7.6. Отключить электропитание и нажать выключатели питания 
на всех модулях. 
5.7.7. Ввести данные об использовании хроматографической ко-
лонки и инструментов в лабораторный журнал. 
3.4.3. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 
МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ 
ХРОМАТОГРАФИИ 
Особенность метода газовой хроматографии заключается в том, что пары
анализируемой пробы распределяются между жидкой (неподвижной) и газооб-
разной (подвижной) фазами. В качестве подвижной фазы обычно используют 
азот, водород, гелий, аргон. Неподвижной фазой являются такие адсорбенты, 
как уголь, молотый кирпич, силикагель и др., а также инертные пористые носи-
тели, пропитанные жидкой фазой. Пропитанные жидкой фазой носители поме-
щают в специальные хроматографические колонки из металла или стекла. 
Обнаружение зон разделённых веществ осуществляют с помощью специ-
альных устройств (детекторов), работа которых основана на различных физико-
химических принципах. 
Вариантом газовой хроматографии является капиллярная хроматография. 
В этом случае жидкую фазу наносят на внутреннюю поверхность длинной ка-
пиллярной колонки. 
Метод газовой хроматографии применим главным образом для анализа 
летучих или других веществ, которые могут быть переведены в газообразное 
состояние без разложения. 
В варианте жидкостной хроматографии подвижной фазой является жид-
кость. Разделение обусловлено распределением компонентов смеси веществ 
между подвижной и неподвижной фазами. По колонке с сорбентом под дейст-
вием подвижной фазы, подаваемой при высоком давлении, быстрее продвига-
ются вещества, лучше растворяющиеся в подвижной фазе. 
В отличие от газовой хроматографии метод позволяет разделять вещества 
в ионной форме, разлагающиеся при повышенной температуре, обладающие 
высокой молекулярной массой. 
Идентификация и количественное определение 
Анализу подвергается субстанция препарата «Селенокс» — новое анти-
оксидантное вещество, разработанное в ООО НПК «Медбиофарм», в соответ-
ствии с ОПР 48363077-08-05 был проведен количественный анализ двух образ-
цов, полученных на двух сериях субстанции. Количественное определение 
398

409
«Селенокса», высвободившегося в среду растворения, проводили методом 
ВЭЖХ на жидкостном хроматографе с ультрафиолетовым детектором на хро-
матографической колонке, заполненной сорбентом Zorbax CN. Перед началом 
определения хроматографическую колонку промывают подвижной фазой до 
формирования стабильной базовой линии. 
Содержание «Селенокс» в анализируемых образцах рассчитывалось по 
соотношению площадей пиков раствора анализируемого образца и раствора 
стандартного образца. Раствор стандартного образца «Селенокс» известной 
концентрации готовили, используя образец «Селенокс», чистота которого под-
тверждена элементным анализом и ИК-спектром. Сравнение проводили со 
стандартным образцом состава субстанции «Селенокс» (свидетельство об ут-
верждении типа стандартных образцов № 2876). 
Пример 128.
Приготовление стандартного раствора «Селенокс». Навеску 
субстанции около 0,02 г, взвешенную с точностью до 0,0001 г, помещали в 
мерную колбу на 25 мл, для растворения добавляли 5 мл спирта изопропилово-
го и около 10 мл н-гексана (ТУ 2631-003-05807999-98). В случае неполного рас-
творения колбу можно подогреть. После растворения образца доводили объем 
раствора до метки н-гексаном. Содержимое колбы тщательно перемешивали. 
Из колбы взяли аликвоту 1 мл, добавляли 5 мл н-гексана, фильтровали через 
PTFE-фильтр и 10 мкл отфильтрованного раствора вводили в жидкостной хро-
матограф с УФ-детектором. Делали не менее 5 вколов. 
Приготовление анализируемого раствора «Селенокс» аналогично приго-
товлению стандартного раствора. Делали также не менее 5 вколов. Устанавли-
вают следующие параметры работы хроматографа Dionex: жидкостной хрома-
тограф с УФ-детектором, колонка 4,6×250 мм, сорбент Zorbax CN, аналитиче-
ская длина волны 220 нм, элюент — спирт изопропиловый : н-гексан (5:95) час-
тей. Скорость потока — 0,75 мл/мин. Продолжительность пропускания под-
вижной фазы через колонку около 10 мин. 
Две серии субстанции, которые были предназначены для проведения док-
линических исследований, были проанализированы по содержанию «Селе-
нокс». Площадь пика исследуемого образца в серии № 1 — 1 110 284 мм
2
, в се-
рии № 2 — 1 127 120 мм
2
; масса вещества стандартного образца в сериях № 1 
и 2 — 0,02 г, масса испытуемого вещества в серии № 1 — 0,02041, в серии 
№ 2 — 0,02040 г, площади пиков раствора стандартного образца в серии № 1 — 
1 095 457 мм
2
, в серии № 2 — 1 115 737 мм
2
. Степень чистоты субстанции — 
99,8%. 
Содержание активного вещества в субстанции «Селенокс» вычисляют по 
формуле

жүктеу/скачать 66,35 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: