Гылыми журналы многопрофильный научный журнал
жүктеу/скачать 6,69 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- ВЕТЕРИНАРИЯ
- АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРЫ 94 УДК 575.224.22:636.2 СКРИНИНГ НА НОСИТЕЛЬСТВО МУТАЦИЙ, ДЕТЕРМИНИРУЮЩИХ
- СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ 95 SCREENING FOR MUTATIONS DETERMINING THE DEVELOPMENT OF
- АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРЫ
ВЕТЕРИНАРИЯ 98 Гемоглобин 10-16 11,9±0,16 13,7±0,19 18,9±0,13 19,6±0,14 Тромбоциты, % 130-900 247±7,6 246±7,1 258±6,9 260±5,1 Тромбокриты, % 0,15-0,25 0,19±0,01 0,16±0,02 0,18±0,03 0,12±0,01 На фоне применения исследуемого соеди - нения у кроликов опытных групп наблюдалось постоянный характер количества лимфоцитов и моноцитов. Колебания по числу эритроцитов и показателю гематокрита в крови незначительны, исключение составляло лишь число гемогло - бина, которое росло до и по истечение времени наблюдений, но в дальнейшем изменений этого показателя не происходило. Содержание гемо - глобина к концу опыта повысилось на 8,6 %, эрит - роцитов – на 9,0 %. Показатель эритроцитов на протяжении всего опытного периода во всех группах был высоким – 8,1-8,6 × 10 12 / л . Таким образом, при введении СХВ - 6 на - блюдались изменения гематологических показа - телей кроликов опытных групп, но они находятся в пределах физиологической нормы для данной возрастной группы. Экспериментальные данные свидетельствуют о хорошей переносимости пре - парата . Синтетическая «сборка» N- бензилпипери - дина и фрагментов оксима и циклопропанкарбо - новой кислоты в гидрохлорид 1- бензил -4-( цикло - пропанкарбонилоксиимино ) пиперидина (СХВ -6) оказалась целесообразной. СХВ - 6 обладает бак - терицидной активностью, низкой токсичностью (ЛД 50 2500 мг/кг), незначительным местно - раз - дражающим действием и хорошей переноси - мостью (колебания показателей крови в преде - лах физиологической нормы) и дает основание считать его перспективным антимикробным средством для дезинфекции помещений предприятий птицеводства и животноводства. Литература : 1. В.Л. Осипова. Дезинфекция. Издатель - ство ГЭОТАР –Медиа, 2009 г. 2. А.А. Поляков, Ветеринарная дезинфек - ция 3. Вартанян Р.С. 4 -N- замещенные пипери - дины (обзор) // Химико - фармацевтический жур - нал. – 1983. - № 5. – С. 540 -541. 4. Ахметова Г.С., Садырбаева Ф.М., Ю В.К., Пралиев К.Д., Жилкибаев О.Т. Пичхадзе Г.М., Насырова С.Р., Имашова Ш.О., Амиркулова М.К. Пиперидинсодержащие производные циклопро - панкарбоновой кислоты – потенциальные ФАВ //Хим. журнал Казахстана -2012.- №1.С.118 -127. 5. Методическими указаниями по оценке токсичности и опасности дезинфицирующих сре - дств МУ 1.2.1105-02 , утвержденными Главным государственным санитарным врачом РФ 10.02. 2002, Москва. 6. ГОСТ 12.1.007 - 76. Вредные вещества, Классификация и общие требования безопаснос - ти. References: 1. Yu V.K., Kabdraissova A.Zh., Praliyev K.D., Shin S.N., Berlin K.D. Synthesis and properties of novel alkoxy- and phenoxyalkyl ethers of secondary and tertiary ethynylpiperdin-4-ols possessing unusual analgesic, anti-bacterial, and anti-spasmotic activity as well as low toxicity //J. Saudi Chem. Soc.- 2009.-V.13.- P.209-217. 2. Weintraub, Philip M.; Sabol, Jeffrey S.; Kane, John M. and Borcherding, David R. Recent advances in the synthesis of piperidones and piperidines//Tetrahedron. – 2003. – 59. – Р . 2953 – 2989. 3. 9 Akhtaro, Shamim; Saify, Z.S.; Arif, M.; Mushtaq, Nousheen; Dar, Ahsana; Ahmed, Ashfaq. Synthesis and Evaluation of Novel Phenacyl Based Carboxamide Derivatives of Piperidine as Antihyper- tensive Agents// Pak. J. Physiol. – 2006. - 2(1). – 6 P 4. Пралиев К.Д., Тен А.Ю., Лим А.Р., Каб - драисова А.Ж., Ю В.К., Шин С.Н. Пропиниловый эфир 1 -(2- этоксиэтил) -4- кетоксимпиперидина как потенциальный спазмолитик //Изв. НТО «Кахак» 2008.- С .85-88. 5. Khan A., Mirsakiyeva A., Ten A., Praliyev K.D., Yu V.K. Ethers of oxymes as a potential biologically active spasmolitics // Abstracts of XIX Mendeleev Congress on General and Applied Chemistry.- 2011, Volgograd.- Vol.1. - P.511. 6. Kamali F. Osanetant Sanofi- Synthélabo// Curr.Opin.Investig.Drugs. – 2001.- 2 (7). - Р. 950 - 956. Сведения об авторах Нарбаева Динара Дарбековна - магистр ветеринарных наук, PhD докторант Казахского На - ционального Аграрного университета, г. Алматы, ул. Абая 28, тел. 877781611185; e-mail: keepstill@inbox.ru. Мырзабеков Жаксылык Бигулович - доктор ветеринарных наук, профессор Казахского Нацио - нального Аграрного университета, г. Алматы, ул. Абая 28, тел. 877752923446; e-mail: keepstill@inbox.ru. Тагаев О.О. - доктор ветеринарных наук, доцент Костанайского государственного универ - ситета имени Ахмета Байтурсынова, город Костанай, e -mail: orynbay_tagayev@mail.ru Нарбаева Динара Дарбековна - ветеринария ғылымдарының магистрі, Қазақ Ұлттық аграр - лық университетінің PhD докторанты, Алматы қаласы, Абай даңғылы 28, тел. 877781611185; e - mail: keepstill@inbox.ru. ВЕТЕРИНАРИЯ 99 Мырзабеков Жақсылық Биғұлұлы - ветеринария ғылымдарының докторы, Қазақ Ұлттық аграрлық университетінің профессоры, Алматы қаласы, Абай даңғылы 28, тел. 877752923446; e - mail: keepstill@inbox.ru. Тағаев О.О. - ветеринария ғылымдарының докторы, Ахмет Байтұрсынов атындағы Қоста - най мемлекеттік университетінің доценті, Қостанай қаласы, e -mail: orynbay_tagayev@mail.ru Narbayeva Dinara Darbekovna - Master of Veterinary Sciences, PhD doctoral student of the Kazakh National Agrarian University, Almaty, st. Abay 28, tel. 877781611185; e-mail: keepstill@inbox.ru. Myrzabekov Zhaksylyk Bigulovich - Doctor of Veterinary Science, Professor of the Kazakh National Agrarian University, Almaty, st. Abaya 28, tel. 877752923446; e-mail :. Tagaev OO - Doctor of Veterinary Science, D ocent of Kostanay State University named after Ahmet Baitursynov Kostanay city, e-mail: orynbay_tagayev@mail.ru АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРЫ 94 УДК 575.224.22:636.2 СКРИНИНГ НА НОСИТЕЛЬСТВО МУТАЦИЙ, ДЕТЕРМИНИРУЮЩИХ РАЗВИТИЕ НАСЛЕДСТВЕННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У КРУПНОГО РОГАТОГО НА ОСНОВЕ МОЛЕКУЛЯРНО - ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ Бейшова И. С. – к.с. - х.н. , доцент, Костанайский государственный университет им. А. Байтурсынова Усенбеков Е.С. – к.б.н., заведующий кафедры клинической ветеринарной медицины, Казахский национальный аграрный университет, г. Алматы Алимгазина С.Б. - ассистент кафедры акушерства, хирургия и биотехнология воспроиз - водства животных, Казахский национальный аграрный университет, г. Алматы Авторами работыпроведен мониторинг племенных быков - производителей и коров голш - тинской породы на носительство генетического заболевания – дефицита XI фактора сверты - вания крови. Для выявления инсерции нуклеотидных последовательностей (генетического дефек - та), размером 76 п.н. рекомендуется использовать метод полимеразной цепной реакции. По ре - зультатам исследования ( N= 86 ) гомозиготных и гетерозиготных носителей генетического дефекта – дефицита XI фактора свертывания крови не выявлены. По сведениям ассоциации голштинской породы Канады у крупного рогатого скота в настоя - щее время выявлено 4 62 генетически обусловленных морфологических и функциональных нару - шений и из них 46 наследственных аномалийможно идентифицировать с помощью молекулярно - генетических методов . Своевременная диагностика данных мутаций и выбраковка животных и племенного материала, а также требования генетического паспорта при закупке скота, эмбрионов, замороженной спермы позволяют элиминировать наследственные заболевания. Дефицит XI фактора свертывания крови крупного рогатого скота является ауто - сомальным рецессивным наследственным генетическим дефектом. Впервые данная патология была зарегистрирована в 1969 году у коров голштинской породы Часто, этиологическим фак - тором большинства скрытых генетических дефектов у животных являются точечные мутации в кодирующей части соответствующих генов. Известно, что генетический дефект, дефицит XI фактора свертывания крови крупного рогатого скота ( FXID) наоборот является последствием вставки нуклеотидной последовательности в составе экзона 12 гена FXI длиной 76 пар оснований. В результате инсерции появился STOPcodon (TAA). Ключевые слова: дефицит XI фактора свертывания крови, аутосомальная рецессивная болезнь, инсерция, репродуктивная функция коров. ІРІ ҚАРА МАЛДА ТҰҚЫМ ҚУАЛАЙТЫН АУРУЛАРДЫҢ ДАМУЫН ДЕТЕРМИНДЕЙТІН МУТАЦИЯ ТАСЫМАЛДАҒЫШТЫҒЫНА МОЛЕКУЛЯРЛЫҚ - ГЕНЕТИКАЛЫҚ ТӘСІЛДЕРМЕН СКРИНИНГ ЖҤРГІЗУ Бейшова И. С. – а.ш.ғ.к., А. Байтұрсынов атындағы Қостанай мемлекеттік университетінің доценті Усенбеков Е.С.– б.ғ.к., Алматы қ - сы Қазақ ұлттық аграрлық университетінің Клиникалық ветеринариялық кафедрасының меңгерушісі Алимгазина С.Б. - Алматы қ - сы Қазақ Ұлттық аграрлық университетінің Акушерлік, хирургия және жануарлардың ӛсіп - ӛну биотехнологиясы кафедрасының ассистенті Канадалық голштин тұқымы қауымдастығының мәліметтері бойынша қазіргі таңда ірі қара малдың 462 генетикалық шартталған морфологиялық және функционалдық бұзылымдары анық - талды, олардың арасында 46 тұқым қуалайтын ауытқыманы молекулярлық - генетикалық тәсіл - дердің кӛмегімен сәйкестендіруге болады. Осы мутацияларды дер кезінде диагностикалау және малдар мен асыл тұқымдық материалдың жарамсызын шығару, сондай - ақ малды, эмбриондарды, тоңазытылған шәуетті сатып алған кезде генетикалық тӛлқұжатты талап ету тұқым қуалайтын ауруларды алып тастауға мүмкіндік береді. Ірі қара мал қанының ұюының XI факторының тапшылығы аутсомалдық рецессивтік тұқым қуалағыш генетикалық ақау болып табылады. Бұл патология алғаш рет 1969 жылы голштин тұқымының сиырларында тіркелді. Малдардағы кӛптеген жасырын генетикалық ақаулардың этио - логиялық факторы болып тиісті гендердің кодтаушы бӛлігіндегі нүктелік мутация табылады. Генетикалық тапшылық, ірі қара малдың қан ұюының (FXID) XI факторының тапшылығы керісінше ұзындығы 76 жұп болатын FXI генінің 12 экзонының құрамындағы нуклеотидтік бірізділікті ендіру салдары болып табылады.Инсерция нәтижесінде STOPcodon (TAA) пайда болды. Кілтті сӛздер: қан ұюдың XI факторының дефициті, аутосомальдық рецессивтікауру, ин - серция, сиырлардың репродуктивтік қызметі. СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ 95 SCREENING FOR MUTATIONS DETERMINING THE DEVELOPMENT OF HEREDITARY DISEASES IN CATTLE BASED ON MOLECULAR GENETIC METHODS I.S. Beyshova - Associate professor in Kostanay State University named after A.Baytursynov Y.S. Usenbekov – Candidate of Biological Science, Head of Department of Clinical Veterinary Medicine of Kazakh National Agrarian University, Almaty S.B. Alimgazina – assistant professor of obstetrics, surgery and biotechnology of animal reproduction of Kazakh National Agrarian University, Almaty According to the Holstein Association of Canada, 462 genetically determined morphological and functional disorders have been identified in cattle to date, with 46 of hereditary abnormalities identifiable by molecular genetic techniques. Early diagnosis of these mutations and the culling of animals and breeding material, as well as genetic passport requirements in the procurement of cattle, embryos, frozen semen, allow eliminating hereditary diseases. Coagulation factor XI deficiency in cattle is an autosomal recessive hereditary genetic defect. For the first time this pathology was recorded in 1969 in Holstein cows. Often, the causative factor of the majority of hidden genetic defects in animals are point mutations in the coding area of the corresponding genes. It is known that a genetic defect, coagulation factor XI deficiency in cattle (FXID) is the opposite effect of the insertion of the nucleotide sequence as part of exon 12 of gene FXI with 76 base pairs. Because of insertion, STOPcodon (TAA) has appeared. Keywords: deficiency of coagulation factorIX, autosomal recessivedisease, insertion, reproductive function of cows. В настоящее время в Республике Казах - стан животноводство является ведущей от - раслью сельскохозяйственного производства, поставщиком ценных продуктов питания для человека и сырья для промышленности. Вместе тем все чаще проявляются признаки генети - ческой эрозии – накопления груза вредных ре - цессивных мутаций. При этом снижаются вос - производительная способность новорожденных и молодняка, резистентность, продолжитель - ность хозяйственного использования животных, что отрицательно влияет на рентабельность производства. У крупного рогатого скота выяв - лено 46 генетических дефектов, при которых в настоящее разработаны молекулярно - генетичес - кие методы диагностики [1, 2]. По сведениям ассоциации голштинской породы Канады у крупного рогатого скота в нас - тоящее время выявлено 4 62 генетически обус - ловленных морфологических и функциональных нарушений и из них 46 наследственных ано - малий можно идентифицировать с помощью мо - лекулярно - генетических методов . Своевремен - ная диагностика данных мутаций и выбраковка животных и племенного материала, а также требования генетического паспорта при закупке скота, эмбрионов, замороженной спермы позво - ляют элиминировать наследственные заболе - вания. Дефицит XI фактора свертывания крови крупного рогатого скота является аутосомаль - ным рецессивным наследственным генетичес - ким дефектом. Впервые данная патология была зарегистрирована в 1969 году у коров голштин - ской породы. Часто, этиологическим фактором большинства скрытых генетических дефектов у животных являются точечные мутации в коди - рующей части соответствующих генов. Известно, что генетический дефект, дефицит XI фактора свертывания крови крупного рогатого скота (FXID) наоборот является последствием вставки нуклеотидной последовательности в составе экзона 12 гена FXI длиной 76 пар оснований. В результате инсерции появился STOPcodon (TAA)[3]. Высокая скорость распространения вред - ных мутаций определяется рецессивным харак - тером их наследования. Продукты таких генов, как правило, участвуют в регуляции ткане специ - фичных функций и неблагоприятные эффекты мутантного аллельного варианта компенсируют - ся в гетерозиготе нормальной функцией аллеля дикого типа. Селекция на уровне фенотипа явля - ется неэффективной в связи с низкой частотой гетерозигот по отношению к гомозиготам. Фено - типически, дефицит XI фактора ( FXID ) сверты - вания крови у телят характеризуется длитель - ным кровотечением из пупочного канатика, ане - мией. У коров, гетерозиготных носителей дефи - цита XI фактора свертывания крови молозиво розового цвета, обычно, такие животные воспри - имчивы пневмонии, маститам и эндометритам [4]. Исследованиями ученых Турции установ - лено, что дефицит FXI фактора свертывания крови у коров негативно влияет на репродук - тивную функцию коров, в частности у таких животных снижается рост фолликулов и половой цикл сопровождается снижением пиковой кон - центрации эстрадиола в крови животных. У коров, гомозиготных и гетерозиготных носителей генетического дефекта XI фактора свертывания крови низкие показатели воспроизводительной функции, часто встречаются трудные отелы и рождение нежизнеспособных телят [5]. В настоящее время молекулярно - генети - ческие основы генетических дефектов крупного рогатого скота достаточно хорошо изучены, на основании этих исследований разработаны ме - тоды диагностики наследственных заболеваний. Все наследственные заболевания животных в той или иной степени связаны с нарушением репродуктивной функции у коров, снижением резистентности организма телят, у носителей АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРЫ 96 мутации генетического дефекта часто регистри - руются эмбриональная смертность, повышение индекса осеменения в результате ранней смертности предимплантационных эмбрионов в период стельности [6]. Целью работы была разработка метода идентификации дефицита XI фактора свертыва - ния крови методом полимеразной цепной реак - ции и изучение распространенности данной па - тологии у популяции крупного рогатого скота Ак - молинской и Алматинской областей. Исследования проводились на 35 племен - ных быках АО «Асыл - Тулик» и на 24 быках ТОО «Асыл» и 37 коровах голштинской породы ТОО «Байсерке - Агро» в рамках реализации проекта «Мониторинг племенных животных Республики Казахстан на носительство генетических де - фектов с помощью молекулярно - генетических методов» в учебно - научно - диагностической ла - боратории Казахстанско - Японского инновацион - ного центра Казахского национального аграрного университета. В качестве материала для исследования были использованы замороженная сперма быков и периферическая кровь коров. ДНК из крови коров и спермы быков выделяли с помощью набора «ДНК сорб В». При выделении ДНК из замороженной спермы с целью оптимизации и выделения более качественной ДНК нами был использован способ предварительной обработки спермы следующим образом: вносили в пробир - ку 200 мкл спермы, затем добавляли 1 мл лизи - рующего буфера, имеющий состав 100 мМТрис, 20 мМ ЭДТА, 10 мМNaCI, рН 8,0 и перемеши - вали в течение 30 секунд, далее центрифуги - ровали g 10000 об/мин в течение 5 минут. После центрифугирования, суспендировали осадок в 500 мкл буфера: 100 мМТрис, 20 мМ ЭДТА, 10 мМNa CI , рН 8,0 и добавляли 8 мкл 2 - мерк - аптоэтанола. Затем перемешивали навортексе в течение 1 минуты и оставляли на 30 минут при комнатной температуре. Полимеразную цепную реакцию проводили на термоциклере «Терцик» производства Рос - сии . Для детекции носителей дефицита Xi фак - тора свертывания крови использовали прайме - ры: F- 5′ - CCCACTGGCTAGGAATCATT - 3′ и R- 5′ - CAAGGCAATGTCATATCCAC - 3′. Использо - вание данной пары праймеров позволяет ам - плифицироватьфрагмент гена FXID размером 244 п.н. у здоровых гомозиготных животных, 244 п.н. и 320 п.н. у гетерозиготных носителей и 320 п.н. у гомозиготных носителей генетического дефекта (рисунок 1). жүктеу/скачать 6,69 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|