Гылыми журналы многопрофильный научный журнал

ВЕТЕРИНАРИЯ
 
 
 
 
95 
комплекса,  поскольку  длительная  эксплуатация 
помещений  и  технологических  оборудований 
приводит  к  накоплению  как
 
условно  патогенной, 
так  и  патогенной  микрофлоры  [
1
].  Современные 
дезинфицирующие  средства  должны  отвечать 
следующим требованиям: широкий спектр бакте
-
рицидного,  вирулицидного  и  фунгицидного  дей
-
ствия; низкая токсичность для теплокровных; от
-
сутствие коррозийных свойств; безопасность для 
окружающей  среды;  совместимость  с  обрабаты
-
ваемыми  материалами;  активность  в  широком 
диапазоне  температур;  отсутствие  канцероген
-
ных,  тератогенных,  иммунодепрессивных  свой
-
ств;  пожаро
  - 
и  взрывобезопасность;  устойчи
-
вость  к  органической  нагрузке;  экономичность  и 
удобство применения [
2]. 
Текущая  ситуация  в  органической  химии  
отражает  дефицит  новых  структур
-
лидеров,  ко
-
торые  могут  быть  оптимизированы  до  промыш
-
ленно пригодных препаратов.  В развитии иссле
-
дований  по  комплексному  изучению  многофунк
-
циональных  субстратов  заложен  потенциал  по
-
лучения  инновационных  соединений  с  уникаль
-
ными  биологическими  свойствами.  Полифунк
-
циональные  азагетероциклы,  в  частности  заме
-
щенные пиперидины, как один из перспективных 
классов  химических  соединений  вследствие  их 
высокого  фармакологического  потенциала  и 
простоты синтеза [
3,7,8, 9
],  являются объектами  
исследований  многих  крупных  мировых  иссле
-
довательских центров. Синтетический дизайн ге
-
тероцикланов привлекает интерес из
-
за широко
-
го спектра проявляемой биологической активнос
-
ти  –
 
от  антибактериальной  до  психотропной. 
Введение  в  молекулу  гетероциклов  других 
фармакофорных фрагментов приводит к появле
-
нию  у  них  новых  видов  биологической  актив
-
ности
 [4,10,11,12]. 
Экспериментальная  химическая  часть
. 
Ход  реакции  и  индивидуальность  соединений 
контролировали методом ТСХ на Al
2
O
3
 
II степени 
активности  с  детектированием  парами  иода.  ИК 
спектры записаны на спектрометре «Nicolet 5 700 
FT - 
IR» в тонкой пленке. 
 
Гидрохлорид 
1-
бензил
-4-(
циклопропанкар
-
бонилоксиимино
)
пиперидина
 (I). 
В круглодонную, 
трехгорлую  колбу,  снабженную  механической 
мешалкой,  обратным  холодильником  и  капель
-
ной  воронкой  помещают  3,0  г  (0,015  моль)  1
-
бензилпиперидин
-4-
кетоксима
 (III) 
растворенного
 
в  абсолютном  диоксане  и  медленно  прикапыва
-
ют  раствор  2,3  г  (0,022  моль)  циклопропанкар
-
бонилхлорида  в  абсолютном  диоксане.  Реак
-
ционную  смесь при перемешивании нагревают в 
течение  1 ч при температуре ~60°С и оставляют 
при  комнатной  температуре  на  24  ч.  Диоксан 
упаривают  досуха  на  роторном  испарителе.  Ос
-
таток  промывают  диэтиловым  эфиром,  кристал
-
лический  продукт  отфильтровывают  и  перекрис
-
таллизовывают из изопропанола. Получают 3,27 
г    (68,0%  от  теоретического)  гидрохлорида 
1-
бензил
-4-(
циклопропанкарбонилоксиимино
) 
пиперидина 
(I)   
в виде белых кристаллов с т.пл.
 
163-164
о
С, 
R
f  
0,89  (Al
2
O
3
,  элюент: бензол: диок
-
сан 
- 4:1).  
 
Найдено, % : С 
63,96
; Н 
6,92. 
С
16
H
21
N
2
O
2
Cl. 
 
Вычислено, % : С 63,63;  Н 7,23. 
 
 
ИК спектр ν, см
-1
: 1757(C
═
O);  1654 (C=N). 
Экспериментальная  биологическая  часть.
 
Исследования  биологических  свойств  гидро
-
хлорида 
1-
бензил
-4-(
циклопропанкарбонилокси
-
имино
) 
пиперидина  под  лабораторным  шифром 
СХВ
-6 
проводились  в  лаборатории  «Гигиена  и 
санитария объектов ветеринарного надзора» ка
-
федры  ветеринарно
-
санитарной  экспертизы  и 
гигиены
 
и  ветеринарной  клиники
 
Казахского  на
-
ционального аграрного университета. 
 
В  качестве  тест
-
штаммов  использованы 
стандартные  типовые  культуры  микроорганиз
-
мов:
 
·
  Staphylococcus aureus 209-P 
(золотистый 
стафилококк)
;  
·
  Escherichia coli 1257 
(кишечная палочка)
. 
Для  исследования  антимикробной  актив
-
ности  препаратов  в  стерильные  чашки  Петри  с 
плотной  питательной  средой  вносили  1  мл  2
-
х 
млрд.  взвеси  (в  физиологическом  растворе  хло
-
рида  натрия)  культуры  микроорганизмов.  Через 
20-
30  мин  после  дифундирования  микроорга
-
низмов  в  агар  на  поверхности  засеянной  среды 
делали  лунки  диаметром  8  мм  на  расстоянии  4 
см  друг  от  друга.  В  лунки  помещали  по  0,1  мл 
испытуемого средства.  После экспозиции в тер
-
мостате  при  37 
0
С  в  течении  18
-
24  ч  учитывали 
результаты  по  размерам  зоны  отсутствия  роста 
микрорганизмов  вокруг  дисков:
 
«устойчивый» 
(микроорганизм устойчив к действию препарата) 
 
- 
зона отсутствия роста не превышала 10 мм;
 
-   
«малочувствительный» –
 11-
14 мм;
 
-   
«чувствительный» 
- 15-
24 мм;
 
-   
«высоко
-
чувствительный» –
 
более 25 мм.
 
Острую
 
токсичность  и  местно
-
раздражаю
-
щее действие
 
на слизистые оболочки глаза СХВ
-
6 
определяли согласно МУ «Оценка токсичности 
и  опасности  дезинфицирующих  средств,  МУ 
1.2.1105-02
» [5].
 
Изучение  острой  токсичности  осуществля
-
ли  путем  перорального  введения  лабораторным 
животным  (белые  мыши  обоего  пола  живой 
массой  20
-
22  г)  испытуемого  раствора  СХВ
-
6  с 
помощью  шприца  с  тупой  иглой,  имеющим  на 
конце  булавовидное  расширение.  А  для  контро
-
ля в желудок лабораторных животных вводили 1 
мл дистиллированной воды. Острую токсичность 
оценивали  по  4  классам  опасности  согласно 
классификации по ГОСТу
 12.1.007-76 [6].  
Местно
-
раздражающее  действие  на
 
глаза 
испытуемого  средства
 
в  3 
%-
ной
 
концентрации
 
оценивали
 
на кроликах по шкале, отмечая выра
-
женность
 
гиперемии  и  отека  конъюнктивы, 
инъекцию сосудов склеры, состояние
 
роговицы и 
радужной  оболочки,  количество  и  качество  вы
-
делений из
 
глаза
.  

ВЕТЕРИНАРИЯ
 
 
 
 
96 
Результаты  обследования  каждого  живот
-
ного  суммируются,  и  выносится  заключение  о 
степени  и  характере  поражения  глаз  при  дейст
-
вии  на  него  изучаемого  соединения  или  средст
-
ва. Указывается характер конъюнктивита (повер
-
хностный, глубокий), наличие кератита. Класс по 
раздражающему действию оценивается по клас
-
сификации 
выраженности 
раздражающих 
свойств (табл. 
1). 
 
Таблица 
1 - 
Классификация по выраженности раздражающих свойств
 
дезинфицирующих 
средств на глаза
 
 
Выраженность раздражающего 
действия
 
Средний суммарный балл, 
 
конъюнктива (А+Б+В) 
 
+ роговица (А+Б)
 
Классы
 
Резко выраженное
 
более 
11 
1 
Выраженное
 
7-10 
2 
Умеренное
 
4-6 
3 
Слабое
 
1-3 
4 
Отсутствие
 
0 
5 
 
Для  исследования  гематологических  пока
-
зателей  крови  кроликов  при  обработке  кожи 
СХВ
-6  3  %-
ной
 
концентрации
 
сформировано 
2 
группы кроликов, по 
4 
голов в каждой. Все кроли
-
ки
 
находились в одинаковых условиях кормления 
и  содержания  в  соответствии  с  зоогигиеничес
-
кими параметрами. Кроликам
 
контрольной групп
-
пы  вводили  физиологический  раствор  хлорида 
натрия.  Кровь  брали  из  краевой  ушной
 
вены
 
кроликов
.  
Ранее найдено, что пиперидинсодержащие 
оксимы  и  их  производные  [5,6]  обладают  широ
-
ким  спектром  биологического  действия.  Кроме 
того,  фармакофорность  циклопропанкарбониль
-
ного  фрагмента  [7,8]  также  послужила  допол
-
нительным  аргументом  для  конструирования 
потенциального антимикробного средства
:  
 
 
 
Ацилирование  1
-
бензилпиперидин
-4-
кеток
-
сима
 (1) 
циклопропанкарбонилхлоридом привело 
к  образованию  гидрохлорида 
1-
бензил
-4-(
цикло
-
пропанкарбонилоксиимино
)
пиперидина
  (2) 
(СХВ
-
6). Реакцию проводили   в абсолютном диоксане 
при  нагревании,    ацилирующий  агент  взят  в  не
-
большом избытке. Гидрохлорид 
(2) 
представляет 
собой  белый  кристаллический  порошок    с  т.пл. 
163-164
о
С  (изопропанол),  растворимый  в  воде, 
этаноле, ацетоне.
 
Антимикробная активность СХВ
-
6 оценива
-
лась  в  сравнении  с  применяемым  препаратом 
Йодизол
 
в  сопоставимых  условиях
 
в  двух  кон
-
центрациях
 
(табл.
2). 
 
Таблица 
2 
–
 
Антимикробная активность СХВ
-
6 и Йодизола
 
 
 
Бактерицидная активность (мм) в отношении
 
 
1 %-
ная концентрация
 
3 %-
ная концентрация
 
 
E. Coli 1257 
St. aureus 209-P 
E. Coli 1257 
St. aureus 209-P 
СХВ
-6 
Задержка роста 
микроорганизмов в 
лунке
 
15 ±
 0,1 
Задержка роста 
микроорганизмов в 
лунке
 
2
5 ±
 0,3 
Йодизол
 
19
±0,
2 
16
±0,
2 
37
±0,
3 
31
±0,
2 
 
Оказалось,  что  тест
-
штаммы  отличаются 
по  своей  чувствительности  к  действию  СХВ
-6. 
Более  чувствительным  оказался 
Staphylococcus 
aureus 209-P
, менее –
 E. Coli 1257.  
Диаметр  зоны  задержки  роста  микроорга
-
низмов показывает степень чувствительности их 
к  различным  концентрациям  испытуемых
 
сред
-
ств.  Так, 
E.coli   
и 
St.aureus 
к
  1 
%  концентрации 
СХВ
-6 
малочувствительны  (задержка  роста  ми
-

ВЕТЕРИНАРИЯ
 
 
 
 
97 
кроорганизмов в лунке и 15 мм соответственно), 
а к препарату «Йодизол» 
- 
чувствительны. В 
3%-
ной
 
концентрации СХВ
-6 
диаметр зоны задержки 
роста для 
E
.с
oli 
в лунке, а для стафилококка 
-  25 
мм.  Эти  показатели  при  применении  препарата 
«Йодизол» соответственно составили 
37 
мм и 
31 
мм. 
 
Острую  токсичность  препарата  устанав
-
ливали  по  показателю  ЛД
50
.  Для  установления 
величины  ЛД
50
 
СХВ
-6 
проведен  ряд  предвари
-
тельных  опытов  с  регистрацией  каждыйого  слу
-
чая гибели и клинического проявления токсичес
-
ких реакций на вводимые дозы образца
 
(табл. 3)
.
 
 
Таблица 3 
- 
Параметры острой токсичности
  
СХВ
-6 
 
Испытуемое 
средство
 
Доза,
 
мг/кг
 
Количествов
о
 
животных
 
Пало
 
Выжило
 
Летальность, 
% 
 
 
 
 
СХВ
-6 
600 
6 
0 
6 
0 
1000 
6 
0 
6 
0 
1500 
6 
1 
5 
16 
2000 
6 
2 
4 
33 
2500 
6 
3 
3 
50 
3000 
6 
4 
2 
67 
3500 
6 
5 
1 
84 
4000 
6 
6 
0 
100 
 
Максимально  переносимая  доза  СХВ
-6 
для  взрослых  белых  мышей  равна 
600 
мг/кг, 
абсолютно смертельная доза –
  4000 
мг/кг, сред
-
нелетальная (
LD
50
) 
–
  2500 
мг/кг. Согласно ГОСТ 
12.1.007-76 
СХВ
-6 
относится  к  малотоксичным 
веществам (
IV 
класс опасности). 
 
Клинические  признаки  отравления  подо
-
пытных  мышей  начинались  проявляться  уже  че
-
рез  10
-
30  мин
 
после  перорального  ведения 
испытуемого препарата. У животных отмечалась 
вялость,  снижение  активности  в  движениях, 
шерстный  покров  был  взъерошен,  они  забива
-
лись  в  углы  клетки,  позже  наблюдалась  их  ги
-
бель.  Перед  гибелью  отмечались  клонические 
судороги. 
 
Результаты оценки местно
-
раздражающего 
действия
 
на  слизистую  оболочку  глаза  кролика 
приведены в таблице 4.
 
  
Таблица 4 
- 
Местно
-
раздражающее действие на слизистые оболочки глаза кролика
 
 
№ Кролик 
 
Роговица
 
Конъюктива
 
Сумма
 
Общая 
сумма 
баллов
 
А
 
Б
 
А
 
Б
 
В
 
Роговица
 
Конъюктива
 
1 
0 
0 
0 
1 
1 
0 
2 
2 
2 
0 
0 
0 
1 
1 
1 
2 
3 
3 
0 
0 
0 
1 
1 
1 
2 
3 
4 
0 
0 
0 
1 
1 
1 
2 
3 
Итого 
 
 
3 
 
Суммарный  балл  равен  3,    и  согласно  МУ 
12.1105-
02 СХВ
-
6 относится к 4 классу опасности 
химических веществ по токсикологическим свой
-
ствам. 
 
Установлено, что все показатели крови на
-
ходились  в  пределах  физиологической  нормы
 
и 
были  достаточно постоянными
 
(табл.5), хотя  от
-
мечена  тенденция  увеличения  изучаемых  пока
-
зателей крови, но на 10
-
е сутки они стали близки 
к иходным значениям. Несмотря на то, что коли
-
чество
 
лейкоцитов находилось в пределах физи
-
ологических границ,  через сутки после введения 
препарата количество увеличилось на 13 
%. 
  
Таблица  5 
- 
Динамика
 
изменения  гематологических  показателей  крови  кроликов  при 
обработке их кожи СХВ
-6 
 
Показатели крови
 
Норма
 
До 
обработки
 
Через 
 
сутки
 
Через
 
5 суток
 
Через 10 
суток
 
Лейкоциты,тыс./мм
3
 
2,6-9,9 
9,6±0,12
 
11,0±1,6
 
10,3±1,3
 
9,8±1,6
 
Лимфоциты, %
 
25-85 
44,6±2,3
 
47,7±2,6
 
51,2±2,1
 
49,3±1,9
 
Моноциты, %
 
2-10 
8,2±0,10
 
10,0±0,17
 
9,9±0,16
 
10,2±0,17
 
Гранулоциты, %
 
20-80 
45,4±2,3
 
48,2±2,0
 
51,9±2,1
 
50,0±1,7
 
Эритроциты, ×
10
12
/
л
 
5,2-7,8 
8,1,±0,14
 
8,9±0,12
 
8,4±0,11
 
8,6±0,11
 
Гематокриты, %
 
35-48 
43,6±1,9
 
47,1±1,7
 
45,5±1,6
 
47,7±1,1
 

жүктеу/скачать 6,69 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: