Х а б а р ш ы с ы в е с т н и к государственного
ВИДОВОЙ СОСТАВ И ОСОБЕННОСТИ ГИСТОМОРФОЛОГИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ
жүктеу/скачать 7,72 Mb. Pdf көрінісі
|
ВИДОВОЙ СОСТАВ И ОСОБЕННОСТИ ГИСТОМОРФОЛОГИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ ИХТИОФАУНЫ ОЗЕРА БИЛИКОЛ ПОД ВЛИЯНИЕМ ФОСФОРНЫХ ОСТАТКОВ Қ.Ж.Сейтбаев, Ж.С.Тулеубаев, Г.К.Зияева, Ғ.И.Исаев Исследования, проведенные в 2013 году показали, что видовой состав выловленной продукции не соответствует фактическому составу рыб, обитающих в озере. В конце 80-х резкое изменение отлова рыбы и постоянное снижение уровня воды в конце лета привело к изменению видовой структуры рыб имеющих промысловое значение. В 90-х годах было установлено повышение численности леща и окуня, в то время как фонд сазана и карася озера резко снизился. С 2000 года виды рыбы змей-голова превратились в доминирующие. В 2012 году по результатам отлова продуктивность рыбы на гектар составила – 0,18 кг, а в выловленных 32,350 т видовой состав рыбы составил как указано ниже.
ICHTHYOFAUNA BILIKOL UNDER THE INFLUENCE OF PHOSPHATE RESIDUE H.J.Seytbaev, J.S.Tuleybaev, G.K.Ziyaeva, G.I.Issayev The researches, conducted in 2013, showed that the species composition of caught products does not correspond to the actual composition of the fish found in the lake. In the late 80s a dramatic change of catching fish and a steady decline in water levels in late summer resulted in changes to the structure of the fish species with commercial value. In the 90s it was found increasing numbers of bream and perch while the fund carp and lake carp has sharply decreased. Since 2000, the species of fish, snakes head is turned to the dominant. In 2012, as a result of catching fish productivity per hectare was - 0.18 kg, and caught 32.350 tons of fish species composition was as follows. 181
УДК 619:616.995 С.М. Тугамбаева Государственный университет имени Шакарима г. Семей ВЛИЯНИЕ АССОЦИАТИВНЫХ ИНВАЗИЙ ОВЕЦ НА МОРФОЛОГИЧЕСКУЮ СТРУКТУРУ КИШЕЧНИКА Анотация: Выявлены различные ассоциативные инвазии у овец в районах прилегающих к бывшему семипалатинскому ядерному полигону. В кишечнике больных ассоциативной инвазией овец отмечаются значительные патоморфологические изменения. Ключевые слова: микрофлора, паразитоценоз, эймериозы, эпителий, слизистая оболочка, ооцисты, гематоксилин-эозин.
В деле увеличения поголовья овец и их продуктивности, наряду с созданием прочной кормовой базы, улучшением содержания и ухода, большая роль принадлежит мероприятиям по оздоровлению животных от гельминтозов, наносящих огромный ущерб овцеводству страны. Ведущая роль в изучении проблемы паразитизма как биологического явления принадлежит крупным ученым [1,2,3]. В овцеводческих хозяйствах Восточно-Казахстанской области из инвазионных болезней часто встречаются эймериозы и мониезиозы, которые являются компонентами паразитоценозов называемых ассоциативными инвазиями у животных. У овец чаще формируется микропаразитоценоз пищеварительного тракта. В Восточно- Казахстанской области до настоящего времени явления паразитоценозов при ассоциации эймерий, интрикаты и нематод, стронгилят у овец не достаточно изучены. В связи с этим в овцеводческих хозяйствах 3 районов Тарбагатайский, Бородулихинский (зоны минимального радиационного заражения Семипалатинского ядерного полигона) и Абайский район (чрезвычайной зоны заражения) впервые нами изучалась микроструктура кишечника овец при зараженности паразитоценозами .
В целях определения видового состава гельминтов были проведены гельминтологические исследования (по методу Дарлинга). Критериями отнесения ооцисты к тому или другому виду являются морфологические признаки ооцист, сроки препатентного и патентного периодов, а также сроки споруляции эймерий при определенных условиях внешней среды. Материалом для выяснения зараженности овец эймериозно-гельминтозной инвазией служили данные копрологических и клинических исследований. В целях определения видового состава гельминтов были проведены гельминтологические исследования (по методу Дарлинга). Критериями отнесения ооцисты к тому или другому виду являются морфологические признаки ооцист, сроки препатентного и патентного периодов, а также сроки споруляции эймерий при определенных условиях внешней среды. Для патологистологического исследования у овец брали кусочки из разных отделов кишечника. Кусочки фиксировали 10% раствором формалина. Фиксированный материал заливали в парафин. С помощью санного микротома для гистологического исследования готовили парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм. и окрашивали гематоксилин-эозином и Ван-Гизону. Проведенными исследованиями установлена зараженность эймериями и гельминтами овец разного возраста. На северо-востоке Казахстана ассоциативная эймериозно-гельминтозная инвазия встречается повсеместно. Экстенсивность инвазии при ассоциации эймерий и нематодир у ягнят составляет 11±0,8 - 66±1,9 %, у молодняка- 4±0,4-56±1,9%, у овцематок-13±0,6-58±1,4% соответственно при ассоциации эймерий и стронгилоидесов-16±1,3-39,5±3,3 %, 5±0,4-47±1,6 %,9±0,5- 26±0,6 % при ассоциации эймерий и мониезий- 15,5±1,3-54±4,5 %, 8±0,5-42±2 %,10±0,6-24±1,9 при ассоциации эймерий и стронгилят 5±0,2-80±0,9 %, 20±0,9-71±2,7 %,33,5±2,4-78,5±1,7 %. Эймерии и гельминты паразитируя в кишечнике создают сообщество- паразитоценоз кишечника. По результатам наших исследований установлено, что видовой состав обнаруживаемых яиц гельминтов и ооцист эймерий тонкого отдела кишечника представлен гельминтами (Bunostomum trigonocefalum, Strongyloides papillosus, Nematodirus sp., Faschiola hepatica, Trichocephalus ovis) и эймериями (E. faurei, E. intricate, E. crandallis, E. аhsata). В тонком отделе кишечника яиц гельминтов и ооцист эймерий часто содержится меньше, чем в толстом отделе кишечника. Это объясняется тем, что все выделенные яйца гельминтов и сформировавшиеся ооцисты эймерий попадают в толстый
182
отдел кишечника в том числе и из тонкого и толстого отделов, хотя общее количество видов паразитов обитает и репродуцируется больше в тонком отделе кишечника (Рис.1). В толстом отделе кишечника видовой состав обнаруженных яиц и ооцист паразитов эймериозно-гельминтозной инвазии разнообразен и представлен различными видами нематод. Половозрелые стадии обнаруженных гельминтов обитают в тонком отделе кишечника, в печени, в дыхательных путях и в толстом отделе кишечника (Bunostomum trigonocefalum, Trichocephalus ovis, Nematodirus sp., Nematodirus spatiger, Strongyloides papillosus, Haemonchus contortus, Dictyocaulus filarial), монезиями (Moniezia expansa), эймериями (E. faurei, E.arloingi, E. parva, E. intricate, E. crandallis, E. granulose, E. аhsata, E. ninaekohljakimovi). Нашими исследованиями было установлено, что распределение гельминтов в кишечнике неравномерно, т.е. каждому отделу свойственная своя видовая особенность. Таким образом, результаты наших исследований показывают, что наиболее высокая зараженность эймериозно- гельминтозными инвазиями наблюдается у овец из Абайского района (чрезвычайной зоны заражения), причем наибольшее число половозрелых паразитов обитает в тонком отделе кишечника, хотя количество и видовой состав выявленных яиц гельминтов и ооцист превалирует в толстом кишечнике. Наименьшая зараженность наблюдается у овец из Тарбагатайского района располагающейся в зоне минимального радиационного риска. Наиболее пораженным участком является средний участок тонкого отдела кишечника, меньше гельминтов найдено в переднем участке кишечника. Однако, следует отметить, что кишечная микрофлора не постоянна. Она подвергается изменениям в зависимости от кормления, возраста, условий содержания.
Рис. 1. Различные виды эймерий и гельминтов у исследованных животных при ассоциативной инвазии (х400).
В результате проведенных нами клинических, патологоанатомических исследований тонкого отдела кишечника обнаружили катаральное воспаление и очажковые поражения. Тонкий отдел кишечника со стороны серозной и слизистой оболочек на значительном протяжении покрасневший, сосуды брыжейки кровенаполнены, содержимое слизистое серо-желтого цвета. На стенках кишечника со стороны слизистой и серозной оболочек просматриваются очажковые поражения в виде белых или желтовато-белых, округлых пятнышек диаметром от 1 до 2 мм. Морфологические изменения в основном обнаружены в слизистой оболочке и в эпителиоцитах. Слизистая оболочка у овец была покрыта слизью с примесью лейкоцитов и разрушенных эпителиальных клеток. Ворсинки увеличены и несколько деформированы. В некоторых участках кишечника на верхушках ворсинок эпителий слущен, строма ворсинок отечна, бокаловидные клетки расширены. Строма слизистой
оболочки набухшая, покрасневшая и обильно инфильтрирована лимфоидными клетками и нейтрофильными лейкоцитами. Следует отметить, что в стенке отдельных желез и ворсинок некоторые эпителиальные клетки находятся в состоянии гидропической и слизистой дистрофии. Крупные и мелкие сосуды слизистой оболочки кровенаполнены (Рис.2.).
183
Рис.2. Кровенополнение мелких и крупных сосудов в слизистой оболочке кишечника (окраска гематоксилин-эозин, х400)
Таким образом, под влиянием миграции и продуктов жизнедеятельности личинок происходят десквамация и разрушение покровного эпителия, кровенаполнение сосудов, образование очажковых поражений в виде белых или желтовато-белых, округлых пятнышек, что в свою очередь приводит к развитию воспалительного процесса в пищеварительном тракте.
1. Муслимова Р.И. Изучение жизненного цикла кокцидии мелкого рогатого скота//1Х конференции Украинского паразитологического общества.-Киев,1980.-Ч.З.-С.90-91 2.Петров Ю.П. Паразитоценозы и ассоциативные болезни сельскохозяйственных животных. Л.,1988. С.174-178 3. Искаков М.М. «Эймериоз сельскохозяйственных животных» г. Семей, 2011. С- 220 4.3иборов Н.А. Распространение, сезонная и возрастная динамика ассоциативного заболевания, вызванного эймериями, нематодирами и цестодами желудочно-кишечного тракта у овец на юге Казахстана. Алматы, 1996-С. 13-23.
түрлі құрамы анықталған. Ассоциативті инвазийлермен ауырған қойлардың ішек құрылымы айтарлықтай патоморфологиялық өзгеріске ұшырағаны байқалады.
S.M. Tugambaeva It is set that distribution of eggs of helmints and oocyte of in bowels unevenly, i.e. to every department the peculiar specific feature. In the bowels of patients the associative invasion of sheep is mark a desquamation and destruction of integumentary epithelium, blood filling of vessels, formation of defeats. 184
УДК 576.31/5 Г.Т.Тусупбекова 1 , Инновационный Евразийский университет города Павлодар 1 , НИИ эндокринологии и обмена веществ города Киев 2
«ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР НАДПОЧЕЧНИКОВ В НОРМЕ» Аннотация: В статье дана морфологическая характеристика структуры различных типов клеток ткани надпочечников новорожденных животных в норме на различных этапах ее культивирования in vitro. Ключевые слова: трансплантология, культура клеточной ткани, надпочечные железы, эпителиальные клетки, фибробласты, АКТГ, in vitro. В экспериментальной клинической трансплантологии пристальное внимание уделяется культуре клеточных тканей, которая имеет ряд преимуществ в использовании по сравнению с пересадкой целых органов. Введение в организм взвеси культивированных in vitro клеток, в отличие от трансплантации органов, является обычно несложной хирургической процедурой, упрощенной во многих случаях до обычной инъекции. По данным C.Ricordi и T.Starzl основными моделями клеточной трансплантации являются пересадки костного мозга, стволовых клеток, фибробластов, миобластов, гепатоцитов, клеток эпидермиса, островков поджелудочной железы, клеток надпочечника, щитовидной, паращитовидной желез и нервной системы [1]. Одной из важных проблем в трансплантологии, наряду со снижением иммуногенности донорского материала, изоляцией пересаживаемых клеток от иммунной системы реципиента и т.п., является оценка качества культивируемой ткани, подготавливаемой к трансплантации, которая невозможна без её правильной морфоцитологической характеристики. Целью предлагаемой статьи является изучение и цитологическое описание клеточной структуры ткани надпочечников новорожденных животных в норме на различных этапах культивирования. Изъятые в стерильных условиях надпочечные железы новорожденных животных суточного возраста помещают в среду 199 при 4 0 С. После 3-кратного промывания надпочечные железы измельчают глазными ножницами до кусочков размером 0,5-1 мм, переносят во флаконы и отмывают до получения прозрачной жидкости. Отмытые фрагменты ткани заливают смесью среды 199 и 0,257%-ного раствора трипсина, взятых в соотношении 1:1, с добавлением 5% бычьей сыворотки, рН 7,4 и помещают на 12-15 ч в холодильник (4 0 С). Затем исходный материал подогревают до 32 0 С,
трипсинизируют на магнитной мешалке 2-кратно по 25 мин при скорости вращения 120-140 об/мин. Надосадок сливают, а ткань помещают в питательную среду для дальнейшего культивирования. Выход жизнеспособных клеток составляет 70-90%. [2]. Однослойную культуру надпочечников новорожденных животных выращивали в пробирках на слюдяных пластинка (2×2 см) в стационарном положении при температуре 37 0 С в питательной среде, состоящей из 0,5% раствора гидролизата лактатальбумина с 10% бычьей сывороткой. В каждую пробирку вносили 600-800 тыс.клеток в 1 мл питательной среды и добавляли по 100 ед. пенициллина и 100 ед. стрептомицина. Смену среды производили каждые 3 дня. На 3-4 сутки роста культуры, когда образовывался монослой, в пробирки вносили АКТГ в концентрации 0,1 ед/мл. Как показано исследованиями Турчина И.С., Меллиной К.В. [3], используемая концентрация АКТГ является физиологической, поскольку стимулирует рост секреторных клеток и продукцию кортикостерона. При цитологическом анализе однослойных культур надпочечников новорожденных поросят было обнаружено, что уже через 2 часа после начала культивирования большая часть клеток хорошо прикрепляется к слюдяным пластинам. При просматривании этих культур через стенку пробирки в живом состоянии были видны отдельные светлые клетки с четкими контурами ядер. Количество прикрепившихся клеток через 6 часов увеличивалось. К 12 часам все жизнеспособные клетки полностью прикреплялись к слюдяным пластинкам и к стенкам пробирки. В эти сроки некоторые клетки начинали размножаться. Через 24 часа с момента посева количество клеток увеличивалось за счет их размножения. При просмотре пробирок в световом микроскопе четко видны группы клеток с коричневатой Д.С. Онищенко 2 2
185
цитоплазмой. Коричневый оттенок цитоплазмы обусловлен наличием в ней липидов. Круглые клетки в изолированном состоянии встречались редко. На фиксированных препаратах, окрашенных гематоксилином-эозином, были обнаружены клетки небольших размеров, круглой формы, с гиперхромными ядрами. В ядрах видны по одному, реже – два ядрышка. Цитоплазма компактная, эозинофильная. Росли эти клетки группами. В изолированном состоянии они встречались крайне редко. Среди групп круглых клеток встречались изолированные вытянутые клетки, которые имели овальные ядра с несколькими ядрышками. Цитоплазма их светлая, рыхлая. Особенно много этих клеток было обнаружено в культуре надпочечников эмбрионов собак и плодов человека. На вторые-третьи сутки роста количество клеток интенсивно увеличивалось за счет разрастания островков, между которыми размножались изолированные полигональные или отростчатые клетки с круглыми светлыми ядрами, вакуолизированной цитоплазмой, а также типичные фибробласты. В культурах надпочечников новорожденных животных преобладал рост полигональных клеток. Фибробласты, как правило, росли изолированно. Через 5-7 дней после начала культивирования в большинстве случаев образовывался сплошной слой клеток (рис.1).
Рис. 1. Однослойная культура клеток коры надпочечников новорожденных поросят. 7 суток роста. Окраска гематоксилин-эозин. Увеличение 7х8. Норма.
На этом этапе культивирования можно было четко различить несколько их типов. Одни их них были небольших размеров, полигональной формы. Росли они небольшими островками или группами. Островки клеток имели тенденцию к росту в два, а иногда и больше слоев. Границы этих клеток всегда различимы. Ядра в них имели круглую форму, гиперхромные, чаще с одним ядрышком в центре. Цитоплазма компактная, мелкозернистая, слегка вакуолизированная. Подобные клетки мы отнесли к типу эпителиальных или секреторных клеток. Как правило, именно они синтезируют и выделяют в питательную среду кортикостероиды. Клетки другого типа имели полигональную форму, росли изолированно или в виде групп. Но своими размерами вышеописанных клеток примерно в 1,5-2 раза. Эти клетки заполняли свободные промежутки между группами гиперхромных клеток. Ядра этих клеток крупные, овальные или вытянутые с нежной хроматиновой сетью и несколькими ядрышками. Цитоплазма рыхлая, в ней находились различной формы и величины эозинофильные включения. По-видимому, эти клетки относятся к малодифференцированным клеткам (рис.2, 3). Кроме вышеописанных клеток довольно часто встречались широкие клетки с крупными светлыми ядрами и типичные фибробласты с овальным ядром. Примерно в таком клеточном составе были все исследуемые культуры до 10-12 дня их роста. Разница обнаружена только в соотношении количества эпителиальных клеток и фибробластов (рис.4).
186
Рис.2. Однослойная культура клеток коры надпочечников новорожденных поросят. 8 суток роста. Окраска гематоксилин-эозин. Увеличение 7х8. Норма.
Рис. 3. Однослойная культура клеток коры надпочечников новорожденных поросят. 9 суток роста. Окраска гематоксилин-эозин. Увеличение 7х8. АКТГ 0,1 ед/мл
Рис. 4. Однослойная культура клеток коры надпочечников новорожденных поросят. 12 суток роста. Окраска гематоксилин-эозин. Увеличение 7х8. Норма.
187
Начиная с 12-14 дня роста культуры клеток надпочечников новорожденных поросят наблюдались дегенеративные изменения в секреторных клетках, которые характеризовались их округлением и пикнозом. Малодифференцированные клетки и фибробласты по-прежнему размножались. На 18-21 сутки культивирования наблюдался рост только фибробластов, а малодифференцированные клетки уменьшались в размерах и приобретали также фибробластоподобный вид, часть этих клеток дегенерировала. Оставшиеся клетки росли со сменой среды до 22-28 дней от начала культивирования, однако с третьей недели и в них отмечались выраженные деструктивные изменения. Таким образом, в первично трипсинизированной клеточной культуре надпочечников новорожденных поросят при образовании слоя хорошо выражено несколько типов клеток, между которыми имеется четкая морфологическая дифференциация. Первый тип клеток – эпителиальные (секреторные) клетки небольших размеров, которые, как правило, росли островками или небольшими группами, очень часто имели тенденцию к росту в два и больше слоев. В изолированном состоянии эти клетки встречались крайне редко. Ядра подобных клеток всегда были круглыми, гиперхромными, чаще с одним четко выраженным ядрышком. Цитоплазма компактная, зернистая, в некоторых клетках вакуолизированная, границы клеток плохо различимы. Второй тип – клетки с крупными круглыми светлыми, изредка овальными ядрами. В ядре обнаруживались несколько ядрышек. Цитоплазма рыхлая, нежно-розовая, вакуолизированная. Иногда эти клетки имели полигональную форму с несколькими цитоплазматическими отростками. Своими размерами они в 1,5-2 раза превышали секреторные клетки Третий тип клеток – типичные фибробласты. Эти клетки всегда имели вытянутую форму, заполняли промежутки между эпителиальными клетками, образуя своего рода различные тяжи. Размерами они больше секреторных клеток. Ядра в данной группе клеток всегда вытянуты, с нежной хроматиновой сетью и 1-2 ядрышками. Цитоплазма рыхлая с различной формы и величины эозинофильными и базофильными включениями. Кроме описанных выше типов клеток встречались единичные гигантские клетки. Среди малодифференцированных эмбриональных клеток и фибробластов обнаруживались формы с крупными светлыми ядрами, которые располагались небольшими группами преимущественно возле островковых клеток. В аналогичной культуре от новорожденных экспериментальных животных (щенки, морские свинки, кролики) растут, в основном, секреторные клетки. Малодифференцированные эмбриональные клетки обнаружены в небольшом количестве, культивируются небольшими группами. Редко встречаются клетки полигональной формы со светлым ядром и вакуолизированной цитоплазмой, которых очень много в клеточной культуре надпочечников цыплят. Фибробластов на ранних этапах выращивания культуры надпочечников экспериментальных животных встречалось небольшое количество, развивались они более интенсивно после дегенерации секреторных клеток.
жүктеу/скачать 7,72 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|