СТИМУЛЯЦИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ МЕХАНИЗМОВ ВОССТАНОВЛЕНИЯ
Современные анаболитические стероидные гормоны, применяемые в спортивной медицине
в качестве гормонального стимулятора – одни из наиболее эффективных стимулирующих средств
коррекции естественных физиологических механизмов восстановления у спортсменов при
интенсивных физических нагрузках и психоэмоциональных, энергетических и метаболических
перегрузках, составляющих 60 % ежегодно регистрируемых у спортсменов на соревнованиях
различного уровня, а также получивших дисквалификацию /1-4/.
Тяжелые физические тренировки у спортсменов профессионалов, приводящие к
психоэмоциональному и физиологическому стрессу, перегрузкам и различным нарушениям
естественных механизмов восстановления на клеточном и ДНК, РНК - уровнях, оставляют свой
след в геноме человека. Недостаточная эффективность существующих методов коррекции и
стимуляции естественных физиологических механизмов восстановления у любителей
спортсменов, профессионалов, а также недостаточное знание действия современных
анаболитических гормонов, обладающих высокой биологической активностью и способностью в
очень малых концентрациях оказывать значительное влияние на обмен веществ значительно
усиливают синтез белков и рост мышечной ткани, что используется спортсменами для быстрого
наращивания мышечной массы /7/.
Такое влияние возможно через усиленное влияние обмена веществ на функции систем и
органов, массу тела и психоэмоциональное поведение индивидуума, а также через действующее
на ткань соответствующего избирательного количества рецепторов, чувствительность тканей
которых к разным гормонам разное. Повышение или снижения содержание гормона в крови
возникает не только из-за изменений возрастного характера в самой железе, но и в результате
нарушения регуляции со стороны других систем, а также парентеральный прием современных
анаболистичеких стероидов.
Однако длительное применение анаболитических стероидных препаратов сопровождается
подавлением секреции собственного тестестерона, а также фолликуластимулирующего гормона
(ФСГ) и лютеинизирующего гормона (ЛГ), что приводит к атрофии мужских половых органов,
подавления образования сперматозоидов и другим изменениям в половой сфере, импотенции, и
нарушениям функции печени, почек, поджелудочной железы, сердечно-сосудистой системе, в том
числе образования антител гормонов и веществам, участвующих в их образовании, определяющие
механизмы гормонального нарушения, последние из них проходят 2-6 месяцев после отмены
анаболитических стероидов, отдельные изменения носят необратимый характер /5-8/.
Все выше изложенное обуславливает актуальность изучения патогенеза действия и
естественной стимуляции механизмов восстановления организма при приеме анаболитических
стероидных гормонов и разработки способов и методов гормональной терапии и действие ее на
геном человека.
Согласно
нейро-эндокринно-имунно-аллергической
концепции
патогенетический,
патофизиологический механизмы естественного восстановления с помощью анаболитических
стероидных гормонов по основным положениям, сводятся к нарушению взаимодействия и
равновесия желез внутренней секреции и нарушению способности к нормальному
антителообразованию, которое может быть признаком более существенного расстройства
контрольных механизмов, связанных взаимодействием иммунорегуляторных клеток и гормонов
синтезирующихся в эндокринной железе и поступающих непосредственно в кровь. Важным
механизмом предрасположенности к эндокринным иммунным нарушениям, а в связи с этим и
нарушением естественных механизмов восстановления, является относительная недостаточность
нейроэндокринной, гормональной, иммунной систем, которые могут быть обусловлены
генетическими факторами контролирующими процесс нормального дифференцирования
эндокринных железистых и иммуннокомпитентных клеток, либо нарушением нейрогуморальных
регуляторных механизмов. Различные неблагоприятные факторы окружающей среды
воздействующие на организм приводят к изменению защитно-приспособительных механизмов, в
частности, создают условия для чрезмерной отрицательной нагрузки на нервную, эндокринную и
иммунную систему, что приводит к нарушению обмена веществ медиаторов и ферментов,
121
вызывающие
психовегитативные
расстройства,
приобретающие
в
дальнейшем
психосаматоантропометрический и физиологический характер.
Целью наших исследований было внедрение способа определения гормонов
монохроматором. Также был исследован гормональный фон при влиянии внешних факторов на
организм как дополнительная нагрузка.
В проблемной лаборатории ветеринарной радиобиоиммунологии при кафедре биологии
Семипалатинского государственного университета им. Шакарима совместно с
тригидрооксииндоловый флюорометрический метод Э. Ш. Матлиной был модифицирован в
«способ измерения катехоламинов монохроматором», который относится к области биологии и
применяется преимущественно для исследования адаптивных реакций организма к изменяющимся
условиям внешней среды с применением абсорбционного спектрального анализа. Также этот
способ может быть использован для диагностики состояния организма при помощи определения
количества катехоламинов на монохроматоре МУМ-1.720.0 ПС с высокочувствительным
вольтметром.
Все выше изложенные действия анаболиков на различные системы организма со
стрессовыми
перегрузками
и
реакциями,
патогенетические
механизмы
влияния
психоэмоционального стресса стероидов и других стрессорные факторов на нейроэндокринную и
иммунную систему и общую резистентность организма спортсменов, вопросы энергообеспечения
в иммуннокомпетентных клетках и тканях, а также геном человека и животных при этом остаются
до конца не изучены.
Выявление нейрогормональных, иммунорегуляторных и биоэнергетических процессов
адаптации организма спортсменов при стрессорном воздействии и перегрузках имеет
существенное значение при поисках естественных и искусственных средств, снижающих
отрицательное влияние психофизического стресса на нейроэндокринную и иммунную системы, а
следовательно на возникновение и течение многих естественных физиологических механизмов
восстановления клеток, в том числе при приеме различных доз растянутых во времени
анаболитических стероидных препаратов /9-11/.
Проблема естественного восстановления остается не решенной, а используемые способы и
методы не всегда приводит к желаемым результатам и нередко обладает вредным побочным
действием на организм. Накоплен значительный опыт стимуляции энергоресурсов и
восстановления анаболическими стероидными гормонами – самых различных групп спортсменов
различных стран мира, выступающих на соревнованиях различного статуса. Разработаны
различные
методы
воздействия
анаболических
средств
на
организм
спортсменов
внутрисосудистые, пероральные, ингаляционные и т.д.; воздействие на биологически активные
точки (точечный массаж с кремом, бальзамом, ультразвуки).
Остается пока область спортивной клинической и экспериментальной медицины в
восстановлении стимуляции естественных механизмов восстановления органов и систем, по
средством стволовых и фетальных клеток активированных гормонами ли выращенными на
активных гормональных питательных средах, под воздействием магнитного поля,
ультразвукового, лазероионного, инфракрасного и ультрафиолетового излучений, что позволило
бы влиять на геном человек в метахондриях, липосоме, органелле, ДНК, РНК восстанавливаемых
клеток.
Для опыта были взяты животные опытной группы, которые подвергались постоянному
воздействию низкой температуры, у них экскреция адреналина с мочой была 1,861 нг/мл. Это
ниже показателей контрольной группы в этом же возрасте.
В зимний период содержание ДОФА в моче животных равнялось в контрольной группе
0,181 нг/мл, в опытной группе 0,167 нг/мл. Через два месяца контрольной группе были равны -
0,254 нг/мл, в опытной группе - 0,239 нг/мл. Через три месяца этот показатель уравнивался и в
опытной группе стал равен - 0,224 нг/мл, в контрольной группе-0,234 нг/мл.
При колебаниях температуры воздуха от минус 2
о
С до минус 24
о
С показатели
содержания норадреналина животных опытной группы в районах максимального радиационного
риска меняются. Названные факторы влияют на организм животных опытной группы и на их
адаптационную способность. Температура воздуха на открытой площадке колеблется в
значительных пределах по сравнению с температурой воздуха в помещениях, расположенных в
районах минимального и максимального радиационного риска. При определении критерий
достоверности достоверных различий между показателями контрольной и опытной групп не
обнаружено. С возрастом показатели содержания адреналина и норадреналина уравниваются,
тогда как в первые дни жизни животных наблюдается резкое повышение этих показателей.
122
При сравнении показателей содержания катехоламинов в опытной группе находится в
пределах физиологических норм. Нами не выявлена зависимость содержания катехоламинов
в моче от температуры воздуха уже в месячном, двух и трехмесячном возрасте не зависимо
от района радиационного риска.
Cписок использованной литературы
1.
Chlebovska K.O., Smajda B. Serum proteins in rate exposed to ionizing radiation and thermal
injury // Physiol. Res. - 1993. - 42. - N. 6. - P. 403 - 407.
2.
Dantses R. Farm animal hausing . - Great Britain , 1983 . - Р . 8.
3.
Deroo V., Gerber G.B., Maes V. Biogenic amines amino acids and regional blood flow in rat
after prenatal irradiation // Radiol. Risks Developing Nervous. - 1996.
4.
Gibson S., McGeer E.G. McGeer P.L. Metabolism of catecholamines in cold exposeere rats // J.
Neorochem., 1969. - N. 16. - P. 1491-1493.
5.
Miki, Sudo. Adaptation of catecholamine rhythms to light-dark cycle reversal in the rat. Ind.
Health . - 1996. - 34, N. 2. P. 133 - 138.
6.
Shibasaki Tsumori. The response pattern of noradrenaline release to repeated stress in the
hypothalamic paraventricular nucleus differs according to the form of stress in rats // Brain Res. - 1995. -
670. - N. 1. - P. 169 - 172.
7.
Wightman R.M. Tame course of release of catecholamines from individual vesicles during exo
cytosis at adrenalmedullary cells // Вiophys. J. - 1995. - N. 1. - Р. 383 - 390.
8.
Арынова Р.А., Голиков А.Н. Адаптивная способность и нейрофизиология сенсорных систем //
Матер. Междунар. научно-практ. конф., посвящ. памяти крупнейшего ученого-коневода Садыкова Б.Х. -
Семипалатинск, 1999. - С. 70 - 73.
9.
Арынова Р.А. Адаптация к температурному фактору и радиоадаптация на ее фоне. - // Матер.
Междунар. научно- практ. конф., посвящ. памяти крупнейшего ученого-коневода Садыкова Б.Х. -
Семипалатинск, 1999. - С. 128 - 130.
10.
Гусев Б.И. Радиационная гигиеническая обстановка Семипалатинской области:
Сообщения 1,2,3 // Медико-биологические последствия ядерных испытаний на Семипалатинском полигоне:
Сб. науч. работ. - Вып. 5. - 1994. - С. 6 - 29.
11.
Денисевич Н.К., Мороцкая О.И., Крушевская И.И. Клинико-эпидемиологические
исследования по выявляемости заболеваний среди населения, постоянно проведенных в условиях
повышенного радиационного фона // Всесоюз. радиобиол. съезд. Пущино, 1989. - Т. 2. - С. 436 - 438.
0
УДК 636.3.083: 59.612.
Сатиева Калия Рамазановна, Нуржанова К.Х.
Семипалатинский государственный университет имени Шакарима
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ РАЗМНОЖЕНИЯ ОВЕЦ.
BIOTECHNOLOGICAL METHODS OF DUPLICATION OF ANIMALS
ЖАНУАРЛАРДЫ КӨБЕЙТУДІҢ БИОТЕХНОЛОГИЯЛЫҚ ӘДІСТЕРІ.
Эмбрионды трансплантациялау және жатыр ішінде ұрықтандыру арқылы жіті
көбейтуде биотехнологиялық әдістерді қолдану қой шаруашылығында асыл туқымды малдардың
генетикалық потенциалын толық пайдалунуға мүмкіндік береді.
Зерттеулерде пайдаланған жаңа жасанды фосфаты-сульфатты-комплексанатты орта
қошқар ұрықтарын ауыспалы температурада 48-54 сағатқа дейін сақтауға мүмкіндік береді.
By biotechnological methods on the basis of the accelerated duplication by a way change the
germ and внутриматочного осеменения will allow more full to use genetic potential of outstanding
animals in sheep-breedinq.
At realization artificial осеменения овцематок is recommended to use фосфатно-сульфатно-
комплексонатную environment(Wednesday) for разбавления and storage sperm
of the rams at varying temperatures during 48- 54 hours.
Биотехнологическими методами на основе ускоренного размножения путем трансплантации
эмбрионов и внутриматочного осеменения позволит полнее использовать генетический потенциал
выдающихся животных в овцеводстве.
Одним из главных звеньев трансплантации эмбрионов- технология их замораживания. Тут
необходимо снизить продолжительность культивирования эмбрионов перед замораживанием до
минимума.
Многие исследователи из Франции, США, Великобритании отмечают эмбриональную
смертность при эмбриопересадках, от недостаточного уровня прогестерона в крови, качества
123
клеток трофобластов, эндокринной функции полового тракта. На выживаемость существенное
влияние оказывают хромосомные анормальные клетки.
Экспериментальные работы по трансплантации эмбрионов овец проводятся в Австралии,
Англии, Новой Зеландии, Франции, СНГ и т.д. Проведенные учеными эксперименты показали, что
любая жизнеспособная овца за свою жизнь дает 5-6 ягнят. В то же время установлено, что у
половозрастных ярок в яичниках содержится несколько тысяч первичных яйцеклеток, а в 9- 10
летнем возрасте – около 500. Это указывает на то, что подавляющее большинство половых клеток
не завершают своего развития рождением ягнят (1).
Максимальное получение потомства достигается путем вызывания суперовуляции овец,
затем осеменением их и извлечением зародышей. После этого проводится морфологическая
селекция зародышей и принимаются меры по повышению приживляемости эмбрионов к
реципиентам.
Работа по изучению приживляемостикриоконсервированных эмбрионов проводилась
учеными в лаборатории биотехнологии размножения овец КазНИТИО. По результатам
экспериментов ими проведенными, были сделаны следующие выводы: 1. Эмбрионы выдерживают
воздействие низкой температуры (-196 С) при соблюдении запрограммированного режима, 2.
Приживляемость пересаженных криоконсервированных эмбрионов составляет 42,1%, 3.
Наибольшее число овуляций в яичниках овец происходит при суперовуляции путем введения
сывороточного гонадотропина (СЖК) в дозе 3000 м.е. на 12 сутки (2).
Лапароскопическое внутриматочное осеменение было широко принято в овцеводстве, а
процент зачатия с заморожено-оттаянным семенем часто сравнимым с таковым, полученным от
естественной случки. Имеются доклады по трансцервикальному внутриматочному
искусственному осеменению, с использованием дозального лежания и манипуляций с шейкой
матки, однако методы недостаточно отработаны для широкого использования в полевых условиях.
У овец, которые имеют относительно короткую фолликулярную фазу и более предсказуемое
время овуляции, фиксированное время маточного осеменения может быть использовано после
синхронизации эструса. Обработки на синхронизацию могут быть ответственными за
пониженную оплодотворяемость после цервикального искусственного осеменения или
естественного спаривания, но проблема может бытьь преодолена через использование
повышенной дозы спермы при осеменении. Внутриматочное осеменение с другой стороны
требует удобство синхронизированного стада и, кажется не страдает от понижения
оплодотворяемости вследствие синхронизирующих обработок, приемлемая оплодотворяемость
получена с дозами порядка 5-20 млн. подвижных сперматозоидов.
Целью исследований является повышение оплодотворяемости и воспроизводительной
функции овцематок путем совершенствования существующих биотехнологических методов
размножения животных.
Исследования проведены в крестьянском хозяйстве «Каскабулак» Восточно-Казахстанской
области. Опыты по совершенствованию методов осеменения были проведены на овцематках
казахской курдючной породы. Для осеменения брали семя баранов породы авасси. Качество
семени определяли по общепринятым методикам.
В первой части исследований уточнены некоторые особенности физиологии и анатомии
воспроизводительной системы овцематок. Учитывали величину половых органов, а также
реакцию животных на введение инструментов.
Для разбавления семени брали фосфатно-сульфатно-комплесонатную среду (ФСК),
разработанную сотрудниками лаборатории биотехнологии и воспроизводства животных.
При этом в стерильных условиях взвешивали навески всех компонентов, растворяли их в 100
мл кипяченной дистиллированной воды при температуре 70-90 С и растворяли навеску
спермосана.
Для разбавления использовалась густая сперма с подвижностью не ниже 8 баллов. Сперму
разбавляли средой в соотношении 1:2 при концентрации от 2 до 3,5 млрд в мл и 1:3 – при
концентрации более 3,5 млрд в 1 мл.
При разработке и испытании внутриматочного метода осеменения из числа отобранных в
охоте овец сформировали четыре группы.
Первую группу осеменяли парацервикально (контроль). Вторую, третью, четвертую группы
овцематок осеменяли внутриматочно и использованием лапаротомии через небольшой разрез на
брюхе. Внутриматочное осеменение проводили через брюшину. Животное фиксировали на станке,
состригали шерсть на брюхе, делали местную анестизию. Разрез длиной 3 см делали на
расстоянии 2-5 см от преднего края молочной железы. Средним и указательным пальцами через
124
разрез отыскивали матку и извлекали. Осматривали яичники, затем в среднюю треть рога матки
вводили специально приспособленным для этой цели шприцом нужную дозу спермы. После
осеменения брюшную полость орошали физраствором, накладывали швы, раневую поверхность
обрабатывали цитригеном.
Выборку овец в охоте проводили два раза в день: утром и вечером. Внутриматочное
осеменение овцематок проводили через 10-15 часов после выборки.
Определение оптимального времени внутриматочного осеменения проводили путем
двукратной выборки, определив начало охоты, затем через 4-8, 10-14, 15-16 часов делали
лапаротомию и осматривали яичники на наличие овуляции и зрелых фолликулов.
В ходе анатомо-физиологических исследований установлено следующее; шприц-катетр для
осеменения овец возможно вводить в цервикальный канал на глубину не более 0,5-1 см.; с
увеличением возраста овец увеличиваются и размеры половых органов. Влагалище у овцематок
115± 6 мм; диаметр влагалища в области преддверия 24±2 мм. Шейка матки находится в
краниально-вентральном положении влагалища и хорошо ограничена. Канал шейки матки овцы
представляет собой полость довольно сложного строения, имеющую 5-8 ярко выраженных
поперечных расширений. Весь канал с поперечными расширениями представляет собой четкий S
– образный изгиб. Поперечные складки массивные в первых трех расширениях, сглаживаются и
становятся меньше в краниальном направлении. Диаметр канала шейки матки постепенно
расширяется в сторону тела матки. Цервикальный канал с поперечными складками является
основным препятствием при введении обычного стеклянного шприца-катетера. Следовательно,
сложность строения шейки матки, различия в возрастных анатомо-физиологических особенностях
животных целесообразно учитывать при совершенствовании методов осеменения (3).
Специфическая особенность спермы баранов снижать оплодотворяющую способность в
процессе хранения в охлажденном и замороженном состоянии не позволяет эффективно их
использовать.
Учитывая
эти
факторы,
в
лаборатории
биотехнологии
и
воспроизводства
сельскохозяйственных животных Казахского НИИ овцеводства разработана новая синтетическая
среда, которая обеспечивает длительное выживание спермиев вне организма без хладоагентов и
пищевых продуктов. Данная среда получила название ФСК – фосфатно-сульфатно-
комплексонатная.
Контрольную группу овец осеменяли свежеполученной спермой. Для осеменения применяли
металлическое двухлопастное зеркало и стеклянный шприц-автомат. Суяность овец, осмененных
спермой, разбавленной ФСК, составляет 60,8 % и незначительно уступает таковой от
свежеполученной спермы – 67,8%.
Проведенные исследования показывают на возможность использования среды ФСК для
разбавления семени, которая позволяет хранить семя до 8 часов.
С целью установления оптимальной дозы спермы при внутриматочном осеменении с
уменьшением числа вводимых подвижных спермиев, овцематки сформированы в четыре группы
(табл.1).
Таблица 1
Внутриматочное осеменение овцематок различными дозами семени
Суягность
Группы
Технология
осеменения
Доза, млн.
Осеменено
овцематок
Гол.
%
Получено ягнят
1
Парацервик.
160
28
10
55,5
11
2
Внутриматоч. 120
8
4
50,0
4
3
Внутриматоч. 60
10
7
70,0
7
4
Внутриматоч.
Итого по
ВМО
30-20
14
32
9
20
64,3
62,5
9
20
Из данных таблицы видно, что внутриматочное осеменение дозами 60-20 млн. подвижных
спермиев дало приемлемые результаты ягнения, 64,3 – 70,0 %.
Для дальнейшего испытания метода внутриматочного осеменения, а также для определения
эффективности внутриматочного метода при использовании замороженного семени от барана
породы авасси.
125
Внутриматочное осеменение проводили с использованием эндоскопа свежеразбавленным
(контроль) и замороженным семенем (табл.2).
Проведенные исследования подтверждают возможность внутриматочного осеменения
уменьшенными дозами свежеразбавленного и замороженного семени, что значительно повышает
оплодотворяемость овцематок до 83,35 и 75,0%.
Таблица 2
Результаты внутриматочного осеменения уменьшенными дозами семени
Группы
Семя
Доза семени,
млн.
Осеменено, голов
Оплодот. по
перегулу, %
1.
Свежеразбавленная
10-20
12
83,3
2.
Замороженное
Итого:
20-30
20
32
75,0
78,1
Таким образом, при проведенных исследованиях получены результаты, дающие
возможность повысить эффективность осеменения овцематок, предложена фосфатно-сульфатно-
комплексонатная среда для разбавления, хранения спермы баранов, разработан внутриматочный
метод осеменения с установлением дозы семени и срока осеменения.
Достарыңызбен бөлісу: |