Іс-қимыл - алгоритмі:
Ингредиенттер Сынама Эталон Бақылау
жұмысшы реагент 2,0 2,0 2,0
Калибратор - 0,05 -
Қансарысуы 0,05 - -
Араластырады және 20-25 оС 7 минут инкубациялайды. Сынамаларды бақылауға қарсы жасыл светофильтрда толқын ұзындығы 520нм фотометрлейді.
Нәтиже бағасы: (Етәж/Екал) * 357 мкмоль/л.
ҚАННЫҢ СҰЙЫҚ БӨЛІГІНДЕ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ӘДІСІМЕН АЦЕТАТ
ЦЕЛЮЛОЗА ПЛЕНКАСЫНДА БЕЛОК ФРАКЦИЯЛАРЫН АНЫҚТАУ
Қанның сұйық бөлігіндегі белоктарды элетрофорез әдісімен ацетат целлюлозадан жасалған пленканы қолданы ажыратып алады.
Реактивтер:
1) барбитал – цитратты (мединал-цитрат) буфер, рН 8,6 (7,36 г. 5,5 – натрии диэтилбарбитураты – мединал және 0,3 г лимон қышқылын 700 мл дистилденген суда ерітеді, рН тексереді және 1 л дейін дистилденген сумен көлемін көтереді);
2) бромфенолкөгі ертіндісі 0,5 г/л [ 10 гсынап хлориді 10 г (!!), 20 мл мұздалған сірке қышқылын азғана көлемдегі дистилденген суда су моншасында қыздырып отырып ерітеді, ерігенше үздіксіз араластырады, өз алдына 0,5 г дистилденген суда бромфенол көкті ерітеді, екі ертіндініде араластырады, 1 л өлшемді колбюаға құйфп белгіге деиін дистилденген сумен толтырады].
3) жууышы ертінді – 50 г/л сірке қышқылы ерітіндісі;
4) ағартушы ертінді: вазелин майы, мұздалған сірке қышқылы ертіндісімен ацетон (1:1).
Іс-қимыл - алгоритмі:
1) Пленкаларды буфер ертіндісімен сулайды (буфер ертіндісіне 5 минутка малып алады).
2) Сүзгі қағазбен артық ылдғылдықты алып тастайды
3) Пленканы камерада жылтыраған жағын жоғары қаратып орналастырады (пленкалар бір бірі мен паралель орналасады, прибор қабырғасынада паралель орналасады және салбырап тұрмау керек).
4) камераны қақпағымен жауып және 150 В тоқ қуатын 5 минут бойы жібереді, кейін токты ажыратады.
Қанның сұйық бөлігін құюы. Пленканың катодты жиегіне 1-4 мкл қанның сұйық бөлігін жіңішке жолақ түрінде пленканың шетіне жетпейтіндей етіп тамызады.
Достарыңызбен бөлісу: |
