Орындау тәртібі:
Құрамы
|
Тәжірибе
|
бақылау
|
Қан сарысуы
0,9%NаСІ ертіндісі
Биурет реактивінің жұмысшы ертіндісі
|
0,1
-
5,0
|
-
0,1
5,0
|
Ақырындап көбіктенбей араластырады. 30 минуттан соң (1 сағаттан аспауы керек) ФЭК-те кювета қалыңдығы 10 мм жасыл светофильтрде (540-560 нм) бақылауға қарсы өлщейді.
Есепті калибрлік кесте арқылы жүргізеді.
Анализді орындау алгоритмі
1. Жұмысшы ерітіндіні даярлау
Негізгі биурет реактиві
40 мл 0,2 н NаОН
4,5 г сегнет тұзы КNаС4Н4О6
1,5 г CuSO4
0,5 г, КІ
до 100 мл 0,2 н NаОН
0,5% КІ ерітіндісі
(ерітіндіде 0,2 н NаОН):
0,5 г, КІ до 100 мл 0,2 н NаОН
Биурет реактивінің жұмысшы ерітіндісі:
20 мл негізгі биурет реактиві+ с 80 мл 0,5% йодида калия КІ.
2. анализді жүргізу
Т
Б
0,1 мл қан сарысуы 0,9%NаСІ ерітіндісі
Биурет реактивінің Биурет реактивінің
Жұм жұмысшы ерітіндісі жұмысшы ерітіндісі
30 минут бөлме температурасында инкубациялау
ФЭК, толқын ұзындығы - 540-560 нм, кювета - 1 см
Калибрлік кесте бойынша есептеу
Калибрлік кестені құру
Жұмысшы стандартты ертінділерін даярлайды. Ол үшін стандартты ерітіндіден (10% альбумин ерітіндісінен) таблицада көрсетілгендей сұйылту серияларын даярлайды
Стандарты ерітінділер даярлау схемасы
Пробиркалар, №
|
Белоктың стандартты ерітінді, мл
|
0,9% NаСІ ерітіндісі
|
белок концентрациясы, г/л
|
1
|
0,4
|
0,6
|
40
|
2
|
0,6
|
0,4
|
60
|
3
|
0,8
|
0,2
|
80
|
4
|
1,0
|
-
|
100
|
Әрбір сұйылтудан 0,1 мл алады және таза пробиркаларға құйяды, оған 5 мл-дан жұмысшы биурет реактивін қосады. 30 минуттан кейін ФЭК та бақылауға қарсы (биурет реактивінің жұмысшы ертіндісі) ең кіші концентрациясынан бастап экстинкцияны өлшейді.
Нәтиже бағасы:
Есеп калибрлік кесте бойынша жүргізіледі.
Қисықты миллиметрлік қағазда құрады
- Абсцисс өсінде (горизонтал) концентрацияны белгілейді, ординат осінде (вертикал) экстинкцияның орташа мағынасын алынған белок концентрациясына сәйкес,
- Белгіленген нүктелер бойынша түзу сызық сызады. Сызық бұрыш градусы 45º
жақын болатындай етіп сызылады.
Қалыпты жағдайда қан сарысуында жалпы белок: 65-85 г/л
Гиперпротеинемия – қанда жалпы белок денгейінің көбейуі.
Гипопротеинемия – қан құрамында жалпы белок денгейінің азаюы
Достарыңызбен бөлісу: |
