Нәтижені бағалау:
Егерде тұндыру факторлары әсерінен белоктар тұнбаға түсіп және бұл факторлар әрекеттін тоқтатқаннан кейін белоктар ерігіш күйіне өтпесе онда бұл қайтымсыз тұндыру. Қайтымсыз тұндыруы белоктардың құрылымының терең бұзылуымен және өзінің нативті қасиетін жоюымен, яғни денатурациямен байланысты
ҚАННЫҢ САРЫСУЫНДА ЖАЛПЫ БЕЛОКТЫ
БИУРЕТТІК РЕАКЦИЯМЕН АНЫҚТАУ
Мақсаты: -жай белоктар алмасуы бойынша біліміді тереңдету, пысықтау;
- қан сары суында жалпы белокты биурет әдісімен анықтауды түсіндіру;
- жалпы белокты анықтаудың диагностикалық мағынасымен таныстыру;
- калибрлік қисықты құру дағдысын дамыту
Сынаманы жүргізу көрсеткіші: - дәрігер көрсеткіші;
- гиперпротеинемияны, гипопротеинемияны анықтау
Принципі: Белоктар сілтілі ортада мыс сульфатымен әсерленіп күлгін түсті қосылыс жүйесін түзеді. Бояу қанықтығына қарай қан сарысуындағы белоктар мөлшеріне пропорционалдылығын анықтайды.
Қажетті құрал-жабдықтар:
1.Реактивтер наборы
2. ФЭК, толқын ұзындығы – 540-560 нм, кювета – 1см
3. калибрлік кесте
4. электронды таразы
5. ыдыстар (1,5,10,0,1 мл пипеткалар, пробиркалар, өлшем колбалар, цилиндрлер)
6. штатив
7. анализ нәтижелерін тіркейтін жұмысшы журнал
8. бланктер
9. миллиметрлік қағаз
Биоматериал: қан сарысуы (сыворотка)
Реактивтер:
1. 0,2 н NаОН ертіндісі
2. 0,9%NаСІ ертіндісі
3. Сегнетовая тұзы – виннокислый калий-натрий, КNаС4Н4О6
4. мыс сульфаты, CuSO4
5. калий иодиді, КІ
6. адамның немесе бұғының қансарысуының альбумині 10%
Жұмысшы ертіндісін даярлау:
1. Негізгі биурет реактиві. 4,5 г сегнетовой тұзы – виннокислого калия-натрия (КNаС4Н4О6 40 мл 0,2 н. ащы натр –да сұйылтады. Сұйылтқан соң 1,5 г мыс сульфаты CuSO4 және 0,5 г калий иодидін қосады, 100 белгісіне дейін 0,2 н ащы натр қосылады. Қараңғы жерде немесе күнгірт түсті ыдыста бір айға дейін сақталады.
2. 0,5% КІ ертіндісі (сарысуда 0,2 н NаОН):
0,5 г ащы натр тұзын сұйылтады. күнгірт түсті ыдыста 2 аптаға дейін сақталады.
3. Биурет реактивінің жұмысшы ертіндісі:
20 мл негізгі биурет реактивін 80 мл раствор йодида калия КІ араластырады . 0,5 г ащы натр тұзын сұйылтады. күнгірт түсті ыдыста 2 аптаға дейін сақталады.
4. Стандартты 10% белок ертіндісі (альбумина):
1 г альбуминді в 6-7 мл 0,9% натрия хлоридінде сүйылтады және натрий хлориді изотоникалық ертіндісімен 10 мл көлемге дейін әкеледі; 1 мл стандарты ертіндіде 0,1 г белок болады.
Достарыңызбен бөлісу: |
