Приготовление посевного материала для поверхностного

36 
600×400 мм и высотой борта 20–30 мм выполнены из сплошного ли-
ста оцинкованного железа, снабжены крышками с одним или двумя 
отверстиями, которые закрываются ватно-марлевыми подушками. 
Вместимость посевных кювет 400–500 г воздушно-сухих отрубей. Пи-
тательную среду стерилизуют в автоклаве в биксах по 2 кг при давле-
нии 0,15 МПа в течение 1 ч, а посевные кюветы – в стерилизационных 
шкафах при температуре 120–130°С в течение 2,0–2,5 ч. 
Содержимым одной колбы засевают 20 посевных кювет. Посев-
ной материал смешивают с питательной средой в отдельной емкости 
с соблюдением всех правил асептики и раскладывают в кюветы слоем 
толщиной 0,8–1,2 см. Между кюветой и крышкой укладывают слой 
непроклеенной бумаги для предотвращения возможной конденсации 
влаги на крышке и создания зон излишнего увлажнения растущей 
культуры. Кюветы со средой помещают на стеллажи в растильные ка-
меры, в которых поступающим через кондиционер воздухом поддер-
живается определенная влажность и температура. Камеры заполняют 
кюветами, исходя из удельной нагрузки по культуре 1–2 кг засеянной 
среды (по сухой массе) на 1 м
3
объема камеры. При этом обмен возду-
ха в камере должен быть равен 2–3 объемам камеры за 1 ч. 
Готовый посевной материал снимают с кювет и во влажном со-
стоянии помещают в стерильные пакеты, которые затем хранятся при 
температуре 3–4°С. Длительность хранения посевного материала не 
должна превышать 5–6 суток (влажная культура подвержена лизису, 
и активность ее снижается). При необходимости более длительного 
хранения посевной материал подсушивают до влажности 10–12% 
в растильной камере воздухом при температуре 28–30°С, предвари-
тельно сняв крышки с кювет. Приготовленный посевной материал 
представляет собой спороносящую культуру продуцента и должен со-
держать не менее 0,7 млрд спор в 1 г. Для получения засевной суспен-
зии посевной материал смешивают со стерильной водой в специаль-
ной емкости. Суспензия используется для засева среды в производ-
ственных условиях. 
Споровой материал отличается от спороносящей культуры незна-
чительным содержанием самой питательной среды и состоит главным 
образом из спор продуцента при небольшом содержании мицелия. 
Споровой материал
 
содержит 7–10 млрд спор в 1 г. Для получения 
спорового посевного материала поверхностную культуру подсушива-
ют до влажности 9–10% и подают в вибросепаратор, из которого воз-
душным потоком (вакуум-насосом) конидии отделяются от среды 
и собираются в приемник. Споровой материал расфасовывают в поли-

37 
этиленовые пакеты в боксе-манипуляторе. Полученный таким обра-
зом конидиальный материал может храниться без значительных изме-
нений при температуре 8–24
С до 1,5 лет. За год хранения конидии 
теряют всхожесть в среднем на 8%. 
Споры (конидии) обладают свойством гидрофобности – плохо 
смачиваются водой. Это приводит к неравномерности засева среды и, 
следовательно, к неодинаковой скорости роста культуры. Однород-
ную суспензию конидий можно получить добавлением в воду на 
каждый грамм спорового материала 25–50 см
3
ПАВ (алкилбензол-
сульфата). При этом смачиваемость спор сильно возрастает при 
неизменной всхожести. 
Применение спорового материала облегчает технологический 
процесс, позволяет более полно механизировать его. Однако получе-
ние спорового посевного материала приводит к сильному загрязнению 
воздуха конидиями. Несмотря на наличие аспирационных устройств, 
насыщенность воздуха конидиями может достигать 3·10
2
–1·10
4
на 
1 м
3
, что недопустимо в санитарно-гигиеническом отношении. Это 
приводит к необходимости применять специальную одежду и индиви-
дуальные средства защиты. Чтобы исключить возможность проникно-
вения посторонней микробиоты, в помещениях цеха чистой культуры 
поддерживается подпор воздуха (р
изб
= 0,01–0,02 МПа). 
Наиболее безопасным является получение посевного материала 
глубинным культивированием в виде мицелиальной массы. Отличие 
этого способа от рассмотренных состоит в том, что культура, выра-
щенная в колбах на отрубях, поступает для засева жидкой питатель-
ной среды в лабораторных ферментаторах объемом до 40 дм
3
. Про-
должительность культивирования обычно составляет 24–30 ч. Моло-
дая, активно растущая мицелиальная масса служит посевным матери-
алом для засева производственной среды. Такой способ позволяет 
в 2,5–3,0 раза сократить длительность приготовления посевного мате-
рала, в 4–5 раз уменьшить площадь отделения чистой культуры, 
улучшить условия труда, снизить спорообразование в готовой произ-
водственной культуре.

жүктеу/скачать 1,87 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: