Микробиология

120 
сҧйылтымдарын енгізеді. «Позитивті» қан сарысуы екінші қатардың 
шҧқыршығына (2А-2Н); «негативті» қан сарысуы ҥшінші қатардың 
шҧқыршығына (3А-3Н); зерттеуге алынған қан сарысулар 4-12 қатардың 
шҧқыршықтарына (А-Н) қҧйылып, 1 сағат 37ºС инкубацияланады. 
Содан кейін шҧқыршықтағы қан сарысуларын 3 рет ФТЕ-Т ерітіндісімен 
шайып тастайды. 
1Е-1Н шҧқыршықтарынан басқа, барлық шҧқыршықтарға ФТЕ-Т 
ерітіндісінде дайындалған конъюгатты 0,1 мл-ден қҧяды. Ал 1Е-1Н 
шҧқыршықтарға ФТЕ-Т ерітіндісін енгізеді. 1 сағат аралығында 37ºС 
термостатта ҧстап, уақыт ӛткен соң ФТЕ-Т ерітіндісімен 3 мәрте шаяды. 
Барлық шҧқыршыққа 0,1 мл-ден субстрат қоспасын енгізіп, 
планшеттің бетін фольгамен немесе қара қағазбен жауып, тҥсті 
реакцияның пайда болуын қадағалайды. Ферментативті реакция 10-30 
минут аралығында пада болады. 
Реакцияны әр шҧқыршыққа 0,05 мл-ден 2 М Н
2
SO
4 
ерітіндісін қосу 
арқылы тоқтатады. 492 нм толқын ҧзындығындағы спектрофотометрдің 
кӛмегімен шҧқыршықтағы ерітіндінің оптикалық тығыздығын ӛлшейді. 
Нәтижені бағалау.
Спектрофотометрмен оптикалық тығыздығын 
ӛлшегеннен кейін позитивті (2А-2Н), негативті (3А-3Н) бақылау қан 
сарысуларының орташа арифметикалық кӛрсеткішін шығарып, оларды 
зерттеуге алынған қан сарысуларының оптикалық тығыздықтарының 
кӛрсеткіштерімен салыстырады. 
Бақылау сұрақтары: 
1 ИФТ қоюдың жалпы принциптері? 2 ИФТ-
дың әр тҥрлі варианттарын қою кезіндегі негізгі этаптарын атаңыз?
3 ИФТ-дың жанама қойылымына сипаттама беріңіз? 4 ИФТ-дың 
нәтижелерін бағалау қалай жҥргізіледі? 
 
ИММУНДЫ ХРОМАТОГРАФИЯЛЫҚ ТАЛДАУ 
Иммунды 
хроматографиялық 
талдау 
(ИХТ) 
– 
бҧл 
микробӛлшектерді қос тізбек әдісі арқылы сепарациялау және 
биологиялық материалдардағы (қан, сарысу немесе қан плазмасы, 
сілекей, несеп және т.б.) антигенмен оған сәйкес антидене арасындағы 
реакцияға негізделген. Бҧл талдау сынаудың тез ӛткізілуін қамтамасыз 
ететін индикаторлық сызықтар, таяқшалар, панель немесе тест-
кассеталар арқылы жҥзеге асады. ИХТ – салыстырмалы жаңа талдау 
әдісі. Ол әдебиеттерде кӛбінесе қҧрғақ иммунохимия, стрип-тест, 
Quik 
Strip cassette, Quik Strip dipstick
, экспресс-тест немесе экспресс-талдау 
тҥрінде белгіленеді. Бҧл атаулар талдаудың ӛте тез жылдамдықта ӛтуіне 
байланысты қойылған.
Иммунды хроматографиялық талдаудың жҧмыс принципі, оны 
физиологиялық сҧйықтыққа салған кезде, оның сызық бойымен жҧқа 
қабатты хроматография принципі бойынша жылжи бастауына 
негізделген (45-сурет). Бҧл кезде жылжымалы фаза физиологиялық 

121 
ерітінді болып табылады. Сҧйықтықпен қоса бояу қосылған антиденелер 
де жылжиды. Егер бҧл сҧйықтықта зерттелетін антиген (гормон, індеттік 
немесе онкологиялық маркер) болса, онда оның бірінші және екінші тип 
антиденелерімен байланысуы жҥзеге асады. Осы кезде, ИХТ-сызығының 
тест-аймағында қатты иммобильденген антиденелердің жан-жағында 
бояу қосылған антиденелер жинақталып, қанық боялған сызықтың пайда 
болуымен сипатталады. Бояу қосылған бос антиденелер сызық бойымен 
ары қарай жылжып, амалсыз екінші бақылау аймағындағы 
антиденелермен байланысады да, осы жерде екінші (бақылау) сызығы 
пайда болады. Бақылау аймағындағы (боялған) байланысушы сызық 
зерттелетін сынамадағы антигеннің болуына немесе болмауына 
қарамастан ылғи да шығып отыруы керек (егер талдау дҧрыс 
жҥргізілсе). Нәтижелер кӛзбен шолу арқылы 3 минуттан 8 минутқа дейін 
анықталады. 

жүктеу/скачать 5,08 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: