Микробиология
Т- және В-лимфоциттерді бір препаратта (Е-РТК және 3С3-РТК
жүктеу/скачать 5,08 Mb. Pdf көрінісі
|
BulashevAK BMB.pdf
| Т- және В-лимфоциттерді бір препаратта (Е-РТК және 3С3-РТК
әдістерімен) анықтау. 3С 3 - кешенін дайындау ҥшін 5 мл 0,1%-ды зимозанның дистилденген судағы ерітіндісін 30 минут су моншасында қыздырып (+80ºС), 10 минут бойы 1000 айн/мин. центрифугалайды. Оны физиологиялық ерітіндімен шайғаннан кейін қайтадан 5 мл физиологиялық ерітіндімен суспензиялайды. Ампуладағы комплементті 5 мл физиологиялық ерітіндіде араластырып, оған 5 мл зимозан суспензиясын қосады да 30 минут +37°С термостатта ҧстайды. Екі мәрте физиологиялық ерітіндісімен шайып, 3 мл физиологиялық ерітіндімен немесе Игл ортасымен суспензиялайды. Нәтижесінде комплементпен ӛңделген (3С 3 - кешені) 0,17%-тік зимозан қоспасы пайда болады. Лимфоциттерді, 3С 3 -кешенін және 0,5%-ды қой эритроциттерінің қоспасын тең мӛлшерде арнайы тҥтікте араластырып, 20-22ºС температурада 25 минут бойы ҧстайды. Уақыт ӛткен соң қоспаны 5 минут аралығында 250-300 айн/мин. центрифугалап, 4ºС температурада 15-18 сағат инкубациялайды. Дайын болған препаратты зат шынысында глутаральдегидпен бекітіп, Романовский бойынша Азур-Эозинмен бояйды. Препаратқа иммерсия майын жағып, жарық микроскоп кӛмегімен кем дегенде 200-ге жуық лимфоциттерді табу қажет. Егерде ҥш және одан кӛп қой эритроциттері (Е-РОК) Т-лимфоциттерімен байланысса, ал ҥш және одан кӛп 3С 3 -РОК зимозан бӛлшектері В-лимфоциттерімен байланысса нәтиже оң деп бағаланады. Е-РОК және 3С 3 -РОК байланыстарының пайыздық кӛрсеткішін шығарады. Бақылау сұрақтары: 1 Қой эритроциттерімен розеткалардың тҥзілу реакциясының маңызы неде? 2 Қандай лимфциттерде комплементтің ҥшінші компонентіне арналған рецепторлары болады? 3 Қандай лимфоциттер антиденелерді ӛндірушілер болып табылады? 4 Жануарлардың организміне иммунитеттің Т- және В-жҥйесі жетіспеушілігінің функциональдық маңызы. 5 Лимфоциттердің қандай жҥйесінің жетіспеушілігі иммуноглобулиндердің тӛмендеуіне әкеп 102 соғады? 6 Иммундық жҥйенің қандай жасушалары лимфокиндерді тҥзеді? жүктеу/скачать 5,08 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|