Микротехника негіздері (Әдістемелік оқУ ҚҰралы) Алматы
Өсімдіктердің полихромды бояу әдісін өзгерту бірқатар жағымды жақтарға ие
жүктеу/скачать 2,96 Mb.
|
treatise176209
- Бұл бет үшін навигация:
- Эцольдке сәйкес аралас бояу [Эцольд, 1983]
| Өсімдіктердің полихромды бояу әдісін өзгерту бірқатар жағымды жақтарға ие:
1. материалды фиксациялауға және орналастыруға арналған реактивтерді үнемдеу; 2. тұрақты микропрепараттар жасау үшін уақытты айтарлықтай үнемдеу; 3. ағзаға зиянды ксилолды тұрақты препараттарды өндіру процесінен шығару; 4. әдістің қол жетімділігі. Уокердің бояуының өзгертілген әдісі - №1 микс. Барлық бояғыштар алдын-ала араласады. Бөлімдер сағат шыныларына орналастырылады, оған бояғыш ерітінділер құйылады, бояғыштардың тамшысын есептейді: акридин қызыл (1% ерітінді 50% этанол), акрифлавин (тазартылған судағы 1% ерітінді), астра көк (тазартылған судағы 1% ерітінді). Акридинді қызыл, акрифлавинді, астраблованы қолданатын полихромды бояу әдісін 2006 жылы Уокер жариялады, әдіс парафинге салғаннан кейін бөлімдерді бояу үшін ұсынылады Эцольдке сәйкес аралас бояу [Эцольд, 1983] Бұл 2 % сірке қышқылындағы 3 бояғыштың қоспасы: негізгі фуксин (1:10 000), сафранин (1: 2500), ақшыл көк (1: 1000). 2002 жылы Эцольд бояу әдісін өзгертті және сафранинді хризоидинмен алмастыруды ұсынды [Эцольд, 2002]. Бұл қоспаны қолдану да оңай және ұзақ сақталады. Бір кесіндіге 1-2 тамшыдан тамызып, кесіндіді бояғыштар қоспасында 15 мин. ұстау керек, қалған бояғыштардан шайып, содан кейін уақытша дайындық (боялған препаратты бір тамшы суға шыны табаққа салып, қақпақты жауып микроскоптың төмен ұлғайтқышымен қарап, содан кейін үлкен ұлғайтқыштармен қарау керек) жасау керек. Содан кейін бұл бояғыштар бір-бірімен араластырылып, тазартылған су қосу керек. Бұл қоспаға кесінділер орналастырылады. Бояу реакциясын жеделдету үшін сағат шынысын спирт шамының отында бірнеше секунд бойы 50-60ºС дейін қыздырып, содан кейін бояу процесі бөлме температурасында немесе жылыту үстелінде 15-20 минутқа дейін тұру керек. Содан кейін бояғыш ерітіндісі тазартылады және кесінділер таза суда бірнеше рет жуылады, кесінді артық бояғыштардан таза жуылып болғанға дейін. Түстерді дифференциалдау процесі - артық бояуды кетіру. Бұл процесс тұз қышқылымен қышқылданған 70% этанолда 10-50 секунд ішінде жүреді (уақыт көптеген факторларға байланысты). Бұл процедура стереомикроскоп арқылы тікелей бақылауда жүзеге асырылуы керек. Дифференциалдау процесін қышқылдандырылған дистилденген сумен жүргізуге болады, бірақ бұл процесс уақыт бойынша ұзағырақ болады. Бұл процесс ең маңызды және эмпирикалық жолмен таңдалады ... жүктеу/скачать 2,96 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|