Люминесцентная микроскопия – увеличивает разрешающую способность микроскопии по сравнению с окраской по Цилю – Нельсону на 14 – 30%.
Для окраски используют флюорохромы – органические красители, флюоресцирующие при освещение УФ, фиолетовыми и синими лучами. Такими красителями являются аурамин 00 и родамин С. Препарат исследуют с помощью люминесцентного микроскопа: МБТ светятся ярко – желтым цветом на темно – зеленом фоне.
При люминесцентной микроскопии удаётся выявить МБТ при их содержании около 1000 в 1 мл диагностического материала.
Культуральный метод– метод посева материала на питательные среды. Для получения этим методом культуры МБТ достаточно от 20 до 100 микробных клеток в 1 мл жидкого материала. Стандартной питательной средой является твердая яичная среда Левенштейна – Йенсена, на которой рост первых колоний отмечают через 4-8 недель.
Получение чистой культуры микобактерий позволяет посредством биохимических методик отличить МБТ от других нетуберкулезных микобактерий, определить их жизненоспособность, вирулентность и чувствительность к лекарственным препаратам.
Недостаток – длительность 1-2 месяца. Однако этот метод необходимо применять у всех больных с подозрением на туберкулёз, и особенно при повторных отрицательных реакциях микроскопического исследования.
Последние годы широко применяются автоматизированные микробиологические анализаторы. Например, BACTEC MGIT 960. Используется для детекции МБТ и определения чувствительности к лекарственным препаратам. Принцип работы основан на том, что размножающая популяция активно поглощает кислород, высвобождая флюоресцентный компонент, который начинает светиться при УФ – облучении.
Биологический метод –состоит в инфицировании морской свинки полученным от больного материалом, в котором предположительно содержатся МБТ. Однако этот метод сложен и высокозатратен.
В настоящее время используются более быстрые и чувствительные молекулярно – генетические методы, такие как Xpert MTB\RIF. Он даёт возможность быстрого определения наличия МБТ в патологическом материале и определения чувствительности к рифампицину за 2 часа.
Полимеразная цепная реакция ( ПЦР) –основана на амплификации специфического участка ДНК МБТ. Диагностическим материалом является мокрота или бронхиальное содержимое. ПЦР – высокочувствительный, специфичный и быстрый метод лабораторной диагностики туберкулёза. Вместе с тем высокая разрешающая способность может приводить к ложноположительным результатам, что ограничивает достоверность исследования.