Часть 2. Частные вопросы биотехнологии. Клеточная биотехнология
92
концевой группой одного фрагмента и 5'-фосфатной группой другого
фрагмента. Из двух типов существующих лигаз для сшивки фрагментов
ДНК обычно используют более универсальную лигазу фага Т4, которая
может соединять как «липкие», так и «тупые» концы. ДНК-лигазы
необходимы в естественных условиях в процессах репарации и
репликации ДНК.
К ферментам, изменяющим строение концов фрагментов ДНК,
относится, например, щелочная фосфатаза, которая отщепляет от
линейного фрагмента молекулы ДНК 5'-фосфатные группировки, что
значительно
снижает
количество
образующихся
случайных,
нежелательных комбинаций фрагментов ДНК. Нуклеаза Bal 31 – это
фермент, неспецифически удаляющий нуклеотиды из последовательности
ДНК. Он позволяет «подтупить» несимметричные концы ДНК, либо
укоротить фрагменты ДНК, сближая их функционально значимые
элементы.
