С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров



Pdf көрінісі
бет117/375
Дата31.12.2021
өлшемі2,61 Mb.
#21760
1   ...   113   114   115   116   117   118   119   120   ...   375
Байланысты:
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020


разделены  фрагменты,  размеры  которых  составляют  от  2  до  50  000 
оснований.  После  электрофореза  фрагменты  смывают  с  агарозы  при 
помощи подходящих методов. 
Выделенные  после  электрофореза  из  агарозных  гелей  фрагменты 
ДНК можно предварительно подвергнуть секвенированию, т. е. определить 
в  них  нуклеотидную  последовательность.  Для  этого  используют 
химический и ферментативный методы секвенирования. 
Химический метод основан на получении меченных радиоактивным 
фосфором  (Р
32
)  фрагментов  и  удалении  из  этих  фрагментов  одного  из 
оснований  с  последующим  учетом  результатов  радиоавтографии. 
Ферментативный  метод  основан  на  том,  что  в  конец  анализируемого 
фрагмента  вводят  нуклеотид,  используемый  затем  в  синтезе  разных 
фрагментов in vitro, анализируемых на нуклеотидную последовательность 
электрофоретически.  Для  изучения  специфических  последовательностей 
нуклеотидов в молекуле ДНК используют также гибридизацию ДНК-ДНК, 
РНК-РНК, ДНК-РНК. 
II  этап.  Фрагменты  рекомбинантных  ДНК  и  вектора,  полученные 
после действия рестриктаз и содержащие определенные гены, «сшивают» 
одним  из  трех  основных  методов,  в  зависимости  от  того,  какие  концы 
имеют фрагменты – «тупые» или «липкие». 
 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   113   114   115   116   117   118   119   120   ...   375




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет