Процесс создания трансгенного организма достаточно сложен и
часто требует индивидуального подхода. Однако в любом случае его
можно подразделить на несколько общих этапов.
1.
Получение (выделение) нужного гена (трансгена), намеченного
для переноса.
2.
Конструирование рекомбинантной ДНК (рекДНК).
3.
Генетическая трансформация, т.е. перенос и включение
рекДНК, содержащей трансген, в клетки реципиента.
4.
Молекулярная селекция – отбор трансформантов, т.е. клонов,
несущих рекДНК.
I этап. Ген может быть выделен из естественных источников (из
подходящего генома) или из геномной библиотеки; синтезирован
искусственно – химическим (по имеющейся последовательности
нуклеотидов) или ферментативным (с использованием механизма
обратной транскрипции) путем.
После проведения фрагментации (рестрикции) ДНК из смеси
выделяют ДНК-фрагменты (ДНК-рестрикты). Для разделения ДНК-
рестриктов прибегают к электрофорезу. Разделение основано на различии
в размерах и константных отношениях электрический заряд-масса.
