Сабақ. Молекулалық-генетикалық зерттеу әдістері Ақпараттық-дидактикалық блок
жүктеу/скачать 268,83 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Максам Гилберт және Сангер
| иммуноблот ретінде де белгілі. Бұл техниканы 1979 жылы Towbin et al ұсынған болатын және қазір ол ақуызды талдау үшін зертханаларда үнемі орындалады. Қадамдар келесідей.
Үлгіден ақуыздар алынады Ақуыздар полиакриламидті гель электрофорезінің көмегімен өлшемдері бойынша бөлінеді Бөлінген молекулалар PVDF мембранасына немесе нитроцеллюлоза мембранасына электропорация арқылы тасымалданады Мембрана антиденелермен спецификалық байланыспау үшін бұғатталған Аударылған ақуыздар бастапқы антиденелермен байланысады (ферменттермен белгіленген антиденелер). Қабық арнайы емес антиденелерді жою үшін жуылады Байланысты антиденелер субстрат қосу және түзілген түсті тұнбаны анықтау арқылы анықталады Western blotting адамның қан сарысуындағы антивирустық антиденелерді анықтауда пайдалы. Western blot сонымен қатар В гепатитін растайтын тест ретінде және сиыр ауруының ақырғы сынағы ретінде қолданыла алады. Вестерн блоттинг әдісі Мутацияларды талдаудың ақырғы кезеңі оларды секвенирлеу болып табылады, яғни электрофорезде аномальді қозғалатын ДНҚ фрагментінің нуклеотидтер бірізділігін анықтау. Осы фрагменттің нуклеотидтер бірізділін қалыпты фрагментпен салыстырып, патологиялық сипатын анықтайды. Секвенирлеу ДНҚ молекуласының не оның бір фрагментінің нуклеотидтік бірізділігін анықтаудың екі әдісі белгілі Максам Гилберт және Сангер. Максам Гильберт химиялық жолмен ДНҚ молекуласын бір бірлеп нуклеотидтерге ыдыратуға негізделген, әрі өте ұзаққа созылатын қымбат әдіс. Сангер әдісі қарапайым және арзан, сондықтан оны жиі қолданады. Бұл әдіс зерттелетін ДНҚ тізбегінің синтезін белгілі бір азоттық негізге жеткенде дидезоксинуклеотидті енгізу арқылы тоқтатуға негізделінеді. жүктеу/скачать 268,83 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|