270
Здоровое питание является одним из неотъемлемых компонентов
здорового образа жизни, обеспечивающего сохранение здоровья и высокую
работоспособность и, тем самым, служащим мощным фактором профилактики
и лечения заболеваний. Идеальным продуктом для удовлетворения
потребностей человека в
экстремальных условиях Севера в биологически
активных веществах, витаминах, аминокислотах, легкоусвояемых сахарах
является мед. Мед – единственный уникальный продукт, который рекомендуют
как детям, так и взрослым для восстановления умственных и физических сил. В
настоящее время, как в России, так и за рубежом для придания меду товарного
вида – жидкого и прозрачного – его подвергают термической обработке, в
результате чего мед утрачивает свои полезные свойства и даже может вызвать
отравление.
Существует достаточное количество публикаций отечественных и
зарубежных авторов, посвященных разным аспектам исследования меда.
Однако изучение влияния избыточного температурного воздействия на мед,
еще не проводилось [1-3]. Таким образом, цель исследования – изучение
влияния высоких температур на распределение аномеров глюкозы и фруктозы с
использованием количественной спектроскопии ЯМР.
В качестве объектов исследования послужили образцы меда,
отличающиеся своим геоботаническим происхождением и годом сбора:
№1. Мед «Разнотравие», урожай 2010 г. (Алтайский край);
№2. Мед «Липовый», урожай 2010 г. (Приморский край);
№3. Мед «Гречишный», урожай 2009 г. (Амурский край);
№4. Мед «Разнотравие», урожай 2008 г. (Башкирия).
Эти же марки меда были подвергнуты термическому воздействию на
водяной бане до перехода меда в
вязко-текучее состояние с полным
расплавлением его кристаллов.
Так как глюкоза и фруктоза проявляют кольчато-цепную таутомерию, в
водном растворе через определенный промежуток времени они существуют в
271
виде 5 таутомеров: α -
и
β-аномеров пиранозных и фуранозных циклических
форм и оксо-форме, поэтому для чистоты эксперимента нами анализировались
свежеприготовленные водные пробы меда.
P
13
P
С
- спектры (рис. 1) были получены на ЯМР-спектрометре высокого
разрешения Avance III («Bruker»), имеющим рабочую частоту по углероду 100
МГц. Исследуемые образцы готовили путем растворения 200 мг меда в смеси
тяжелой и дистиллированной воды (1:9) объемом 0,5 мл.
P
13
P
С-спектры
регистрировали в режиме широкополосной развязки от протонов с
применением составной импульсной последовательности
WALTZ-16.
Параметры регистрации: количество сканов - 140, длина 30
P
о
P
-импульса - 21,6
мкс, время релаксации между сканами - 10 c. Фазовая коррекция и коррекция
базовой линии осуществлялась с
помощью пакетов, входящих в программу
TopSpin. Температура
проведения экспериментов – 27
P
о
P
С, длительность
анализов – 30 мин. Запись спектров проводилась без вращения образца. Во всех
случаях были получены спектры высокого качества с шириной линий на
полувысоте меньше 0,5 Гц. Все спектры калибровались относительно TSP.
Отнесение химических сдвигов производили при помощи электронной базы
http://www.hmdb.ca/ [4, 5], по опубликованным данным [1, 2], а также по
спектрам индивидуальных веществ, снятых нами отдельно: глюкозы, фруктозы
и сахарозы. Для каждой линии была рассчитана интегральная интенсивность,
нормированная на суммарную интенсивность линий спектра. Далее, путем
суммирования интенсивностей линий по всем атомам углерода, входящим в
молекулу аномера, и отнесением его к общей интенсивности, было рассчитано
содержание сахаров (табл.1).
Так как полученные углеродные спектры всех водных проб меда имеют
идентичный характер и отличаются только по интенсивностям отдельных
линий, то рассмотрим результаты на примере образца №2. На рисунке 1
представлена область 52-108 м.д. спектров образца меда до и после
термической обработки. Видно, что интенсивность пиков α-глюкозы в меде до
273
Таблица 1
Содержание и соотношение аномеров глюкозы и фруктозы в различных марках меда до и после их температурной
обработки (*-расчет проведен считая за 100% содержание аномеров глюкозы и фруктозы
Достарыңызбен бөлісу: