Учебное пособие Часть II санкт-Петербург 016 ббк 28. К 78
жүктеу/скачать 1,61 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Определение БГКП.
| Определение КМАФАнМ внутреннего содержимого яйца. По-
верхность скорлупы обмывают с помощью щеточки теплой мыльной водой, затем яйцо на 10 мин погружают в этанол и обжигают на пла- мени горелки. На остром конце яйца делают отверстие диаметром 1 см, пробивая скорлупу профламбированным инструментом (пинцетом или скальпелем). Содержимое одного или нескольких яиц, помещен- ное в колбу с шариками, гомогенизируют до однородной массы, кото- рую подогревают на водяной бане при температуре 20 ºС. Затем 10 см 3 яичной массы вносят в колбу с 90 см 3 стерильного физиологического раствора, получая разведение 10 –1 , из которого готовят последующие разведения и далее проводят определение КМАФАнМ, как это опи- сано в разделе 1.3.1. Определение БГКП. Для выявления БГКП высевают 1 см 3 раз- ведения 10 –1 исследуемой пробы в 5 см 3 среды Кесслера, посевы по- мещают в термостат с температурой 37±1 ºС на 24 ч, после чего устанавливают наличие или отсутствие признаков размножения этих бактерий. Для определения БГКП в сухих молочных продуктах готовят разведения до 10 –3 , в меланже – до 10 –4 , которые также засевают в пробирки со средой Кесслера. Определение Staphylococcus aureus. Метод определения золо- тистого стафилококка в яйцепродуктах основан на высеве самого продукта или его разведений в селективные питательные среды. Осо- бенностями золотистого стафилококка являются его способность расти на средах с повышенным содержанием натрия хлорида, коагу- лировать плазму крови, образовывать кислоту при расщеплении ман- нита и мальтозы в аэробных условиях. Навеску сухого яичного продукта массой 1 г (для жидких яич- ных продуктов – 1 см 3 ) высевают в пробирку с 9 см 3 солевого бульо- на. Посевы инкубируют в термостате с температурой 37±1 ºС в тече- ние 24 ч, после чего материал из пробирок пересевают в чашки Петри с подсушенным желточно-солевым агаром (см. прил. п.1.8). Чашки выдерживают в термостате с температурой 37±1 ºС в течение 18–24 ч. Затем в целях выявления пигментов чашки выдерживают на свету при комнатной температуре еще в течение 18–24 ч. Колонии Staphy- lococcus aureus на желточно-солевом агаре имеют форму выпуклых 58 дисков диаметром 2–4 мм желтого, кремового, лимонного или золо- тистого цвета с радужным кольцом вокруг них. Из колоний, харак- терных для S. aureus, готовят мазки, окрашивают их по Граму и мик- роскопируют. В случае присутствия в препарате грамположительных кокков, расположенных в виде виноградных гроздьев, материал из подозрительных колоний отсевают в чашки Петри на МПА. Посевы ставят в термостат с температурой 37±1 ºС на 18–24 ч. Из выросших подозрительных на S. aureus колоний ставят реакцию плазмокоагуля- ции. Для этого в две пробирки вносят по 0,5 см 3 разведенной кроли- чьей плазмы; в одну пробирку вносят петлей материал из колонии, другая пробирка служит контролем – еѐ не засевают. Пробирки ста- вят в термостат с температурой 37±1 ºС, через 2–4 ч пробирки про- сматривают, учитывая результат, и оставляют их до утра при комнат- ной температуре для окончательного учета. Реакция плазмокоагуля- ции зависит от степени активности фермента коагулазы, выделяемого золотистым стафилококком, и характеризуется следующим образом: сгусток плотный, при наклоне пробирки неподвижен (оценка в четыре плюса); сгусток имеет небольшой отсек, при наклоне пробирки по- движен, плотная коагуляция плазмы (три плюса); сгусток в виде взвешенного мешочка, неполная коагуляция плазмы с образованием подвижного сгустка в центре плазмы (два плюса). Материал из колоний, выросших на желточно-солевом агаре и подозрительных на S. aureus, пересевают петлей в чашки Петри на агаризованную среду с маннитом (или мальтозой) и феноловым крас- ным. Положительным считается результат, если вокруг колонии на среде с маннитом образуется желтая зона, четко контрастирующая с пурпурно-красным фоном среды. При наличии в мазках из характерных колоний на желточно- солевом агаре грамположительных кокков, расположенных в виде гроздьев, установлении положительной реакции плазмокоагуляции, ферментации маннита с образованием кислоты дается положитель- ный ответ на присутствие в 1 г (или 1см 3 ) яичного продукта Staphylo- coccus aureus. Методы выявления сальмонелл и бактерий рода Proteus описа- ны в разделах 1.3.3. и 1.3.4. 59 В табл. 7.1. приведены критерии микробиологической безопас- ности яичных продуктов. Таблица 7.1 жүктеу/скачать 1,61 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|