В исследование были включены
Diagnosis of hereditary spherocytosis, as the most common form of
жүктеу/скачать 0,59 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Таблица 1 Характеристика групп больных по полу и возрасту Группы Пол Возраст, годы Мужской Женский
- Min–max Me
| Diagnosis of hereditary spherocytosis, as the most common form of
membranopathy, is improved, thanks to advances in biotechnology and the presence of a large number of modern automatic analyzers. All this leads to a reduction in the number of patients with undiag- nosed hereditary spherocytosis and a decrease in the incidence of complications. However, despite the improvement of various methods of evaluation of red blood cells, some difficulties in the diagnosis of hereditary spherocytosis remain. In this study, the authors developed an algorithm for the laboratory diagnosis of anemias microperimetry that will allow patients with high probability of hereditary spherocytosis differential diagnosis with other types of hemolytic anemia. Key words: microspherocytosis, hemolytic anemia, hereditary spherocytosis, algorithm Таблица 1 Характеристика групп больных по полу и возрасту Группы Пол Возраст, годы Мужской Женский Min–max Me Основная группа (n = 18) 9 9 6 61 24 Контрольная группа (n = 23) 8 15 8 42 27 DOI: 10.33667/2078–5631–2019–3–22(397)-22–25 E-mail: medalfavit@mail.ru Медицинский алфавит № 22 / 2019, том № 3. Современная лаборатория 23 ческих параметров эритроцитов; опре- деление скорости лизиса эритроцитов с использованием подкисленного глице- ринового реактива, тест на определение интенсивности свечения красителя эо- зин-5-малеимида (ЭМА-тест). Венозную кровь забирали в про- бирки, содержащие в качестве ан- тикоагулянта К 3 ЭДТА (Vacuette, GreinerBio-One, Австрия) для клини- ческого анализа крови и ЭМА-теста; для определения скорости лизиса эри- троцитов — в пробирки с Li-гепарином (Vacuette, GreinerBio-One, Австрия). КАК выполняли не позднее 6 ча- сов от момента забора крови на ге- матологическом анализаторе Sysmex KX-21N (Sysmex, Япония). На осно- вании полученных данных оценивали основные эритроцитарные параме- тры и рассчитывали соотношения Hb/ MCHC, Hb/RDW и MCHC/RDW. Окраску мазков проводили по ме- тоду Паппенгеймера. Для определения морфометрических параметров эритроцитов анализирова- ли изображения окрашенных мазков с помощью аппаратно-программного комплекса (АПК) «ВидеоТесТ-Морфо- логия», который в автоматическом режи- ме выделяет, измеряет и распределяет эритроциты на классы по заложенным расчетным эритроцитарным параметрам [3]. Процесс обработки с возможностью коррекции изображения визуально кон- тролировался оператором (врачом кли- нической лабораторной диагностики) на экране монитора. Лизис эритроцитов оценивали с помощью глицеринового теста. Регистрацию скорости разрушения эритроцитов проводили на автома- тическом анализаторе Sapphire 400 (США). Изменение оптической плот- ности регистрировали в течение 10 мин. при 37 °C (длина волны 625 нм). Скорость лизиса эритроцитов оце- нивали визуально по форме графика снижения ОП во времени. Тест на связывание красителя эо- зин-5-малеимида (ЭМА-тест) основан на определении интенсивности све- чения красителя эозин-5-малеимида, который связывается с лизином-430 первой внеклеточной петли белка по- лосы 3 мембран эритроцитов. ЭМА- тест включает в себя трехкратную отмывку эритроцитов в физиологиче- ском растворе (центрифугирование при 1 500 об./мин.), инкубацию отмытых эритроцитов с красителем эозин-5-ма- леимидом в течение 60 мин., двухкрат- ную отмывку от несвязавшегося кра- сителя физиологическим раствором. После проявления окраски с исполь- зованием PBS с pH = 7,0 проводили определение средней интенсивности флюоресценции (СИФ) на проточном цитометре FC 500 (Beckman Coulter, США) с использованием программы CXPanalysis по данным 50 000 эритро- цитов, гейтированных по параметрам светорассеяния. В каждой аналитической серии СИФ пациента с подозрением на на- личие НС сопоставляли с СИФ трех пациентов с отсутствием гематоло- гических заболеваний при условии, что забор крови всех пациентов про- изводился в один день, пробы храни- лись в одинаковых условиях, анализ выполнялся одномоментно. В связи с нестабильностью краси- теля эозин-5-малеимид в разведенном состоянии и отсутствием контроль- ных материалов, результат представ- ляли как отношение СИФ пациента к сумме СИФ здоровых лиц в одной аналитической группе, выраженный в процентах: Статистическую обработку по- лученных результатов проводили с помощью пpогpаммы Statistica for Windows 6.0 с использованием пара- метрических и непараметрических критериев. Различия считали досто- верными при p < 0,05. жүктеу/скачать 0,59 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|