В. В. Зверева, М. Н. Бойченко



Pdf көрінісі
бет79/180
Дата12.09.2023
өлшемі4,99 Mb.
#106913
1   ...   75   76   77   78   79   80   81   82   ...   180
Байланысты:
микробиология т-1, Зверев

5.4.3. Трансформация 
Феномен трансформации впервые был описан в 1928 г. Ф. Гриффитсом, обнаружившим 
превращение бескапсульного R-штамма пневмококков 
(Streptococcus pneumoniae) 
в штамм, 
образующий капсулу S-формы. Гриффитс ввел мышам одновременно небольшое количество 
авирулентных R-клеток и убитых нагреванием S-клеток. R-клетки были получены от штамма, 
капсульное вещество которого принадлежало к типу S II, а убитые нагреванием S-штаммы - к типу 
S III. Из крови погибших мышей были выделены вирулентные пневмококки с капсулой S III. 
В 1944 г. О. Эвери, К. Мак-Леод, М. Мак-Карти установили природу трансформирующего 
фактора, показав, что ДНК, экстрагированная из инкапсулированных пневмококков, может 
трансформировать некапсулированные пневмококки в инкапсулированную форму. Таким 
образом, было доказано, что именно ДНК является носителем генетической информации. 
Процесс трансформации может самопроизвольно происходить в природе у некоторых 
видов бактерий,
B. subtilis, H. influenzae, S. pneumoniae, 
когда ДНК, выделенная из погибших 
клеток, захватывается реципиентными клетками. Процесс трансформации зависит от 
компетентности 
клетки-реципиента 
и 
состояния 
донорской 
трансформирующей 
ДНК. 
Компетентность - 
это способность бактериальной клетки поглощать ДНК. Она зависит от 
присутствия особых белков в клеточной мембране, обладающих специфическим аффинитетом к 
ДНК. Состояние компетентности у грамположительных бактерий связано с определенными 
фазами кривой роста. Состояние компетенции у грамотрицательных бактерий приходится 
создавать искусственным путем, подвергая бактерии температурному или электрошоку. 
Трансформирующей активностью обладает только двунитевая высокоспирализованная 
молекула ДНК. Это связано с тем, что в клетку-реципиент проникает только одна нить ДНК, тогда 
как другая - на клеточной мембране - подвергается деградации с высвобождением энергии, 
которая необходима для проникновения в клетку сохранившейся нити. Высокая молекулярная 
масса трансформирующей ДНК увеличивает шанс рекомбинации, так как внутри клетки 
трансформирующая нить ДНК подвергается воздействию эндонуклеаз. Интеграция с хромосомой 
требует наличия гомологичных с ней участков у трансформирующей ДНК. Рекомбинация 
происходит на одной нити, в результате чего образуется гетеродуплексная молекула, одна нить 


120 
которой имеет генотип реципиента, а другая - рекомбинантный генотип. Рекомбинантные 
трансформанты формируются только после цикла репликации (рис. 5.5). 
В настоящее время этот метод является основным методом генной инженерии
используемым при конструировании рекомбинантных штаммов с заданным геномом. 
Рис. 5.5. Схема трансформации 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   75   76   77   78   79   80   81   82   ...   180




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет