Методы прямого переноса генов в растение. Эти методы возню* ли благодаря появлению специфического объекта — изолирован ных протопластов, т. е. клеток, лишенных целлюлозной стенки. -
Методы прямого переноса генов довольно многочисленны: Трансформация растительных протопластов. Осуществляете благодаря комбинации методик кальциевой преципитации ДЬ и слияния протопластов. Для трансформации может быть испол зован практически любой ДНК-вектор. Донорная ДНК может * содержать специальных биологических сигналов (vir-областей, m граничных областей Т-ДНК).
Культуру протопластов на начальной стадии ее роста зараж! ют агробактериями, которые используют в качестве векторов.
Микроинъекции ДНК. Аналогичен методу микроинъекщ животных клеток. Этот метод можно рассматривать как наибол универсальный. Эффективность трансформации растительных клй ток — 10 — 20% независимо от типа вектора. Трансформация не видоспецифична, возможен перенос генов в любое растение.
Электропорация. Метод основан на повышении проницаемости биомембран за счет действия импульсов высокого напряжения. В результате молекулы ДНК проникают в клетки через поры в клеточной мембране.
Упаковка в липосомы. Это один из методов, позволяющих защитить экзогенный генетический материал от разрушения нук- леазами растительной клетки. Липосомы — сферические тельца, оболочки которых образованы фосфолипидами.