Сабақтың мақсаты: Өсімдіктің каллустық культураларын жасушалар суспензиясынан алуды үйрену. Суспензия культурасын борпылдақ типті каллус тінінен бастау әдісін игеру және жасуша суспензиясын жаңа қоректік ортаға субкультурациялау. Материалдар мен жабдықтар:темекінің борпылдақ тіндері, өсудің стационарлық кезеңіндегі суспензиялық темекі культурасы, ламинар-бокс, MC ортасы бар стерильді колбалар-ИУК (3 мг / л), 2,4-D (0,04 мг/ л) және кинетин (0,008 мг / л) бар сұйық,скальпель, пинцет, көлемі 50-100 мл стерильді стакан, воронка, елек диаметрі 500 микрон.
Тапсырмалар: 1. Каллустық ұлпасынан суспензия культурасын алу 2. Жасушаның өміршеңдігін және суспензия культураларының агрегация дәрежесін анықтау.
3. Фитогормондардың темекі клеткалары культурасындағы морфогенез бағытына әсері
Сұйық қоректік ортада өсірілген өсімдік клеткаларының культуралары әдетте суспензия культуралары деп аталады. Жеке жасушалар, шағын топтар немесе жеткілікті үлкен агрегаттар (50-ден астам жасушалар) сұйық орта суспензияда өсіріледі
1.Суспензия культурасын алу және субкультурация. Суспензия культуралары борпылдақ каллустық тіннен алынады, оны каллустық құрамдағы сұйық қоректік ортаға салып, шайқалатын орында өсіреді (100-120 айн / мин). Аз агрегатка оңай ыдырайтын, өміршең, қарқынды түрде дамитын каллус культурасын қолдану ұсынылады.
Суспензия культуралары мыналардан тұрады: жеке жасушалар;
жасуша топтары (2-10 жасуша);
көп жасушалы агрегаттар (жүздеген және мыңдаған жасушалар).
Суспензия культуралар типтері (жинақтау дәрежесіне байланысты) -нашар жинақталған; (бір клеткадан (40%) және кішігірім агрегаттардан (60%) тұрады, агрегаттарда 10-12 жасушадан аспауы керек)
-орташа жинақталған;(бір клеткадан тұрады (40%), ұсақ агрегаттардан (40%) және ірі агрегаттар (20%)
жоғары жинақталған; (шағын (40%) және үлкен агрегаттардан тұрады (60%)
