1-15 дәрістер. Микроскопиялық техниканың негіздері Дәріс Тақырыбы
Бест әдісі бойынша гликогенді карминмен
жүктеу/скачать 152,73 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Мукополисахаридтерді анықтау және ерекшелеу.
| Бест әдісі бойынша гликогенді карминмен табу
Бұл бояу гистохимияда өте сирек қолданылады. Өте жақсы боялады. Кармин ерітіндісінің негізі 60 мл дистилденген суға 2 гр карминді еріту, 1 гр көмірқышқыл және 5 гр хлорлы калий. Алынған ерітіндіні 5 минут қайнату, суыту және сүзу. Содан кейін сүзбеге 20 мл 28% аммиак ерітіндісін қосу. Ерітіндіні 0-4° тоңазытқышта 3 айға дейін сақтауға болады. Бояуға арналған кармин ерітіндісі. 8 мл. Негізгі ерітінді 12,5 мл аммиак және 24 мл метанол қосу. Бест ерітіндісінің мүшеленуі (өңдеу үшін). 8 мл абсолютті спиртке 4 мл метанол және 10 мл дистилденген су қосу. Бояу әдісі. - Қалыңдығы 5-7 мкм парафинді кесінді депарафинизациялау және суға дейін жеткізу. - 1% целоидин сұйықтығына 2-5 минутқа салу. - Ауада кептіру. - Күштілігі өсе түсетін спирттермен жүргізіп суға дейін жеткізу. - Суда шаю. - 10-20 минут Шифф реактивіне орналастыру. - Эрлих гемалауынымен бояу - 5мин. - Суда шаю және 1% қышқылданған спиртте ядроның саралануы жақсы болу үшін шаю. - Дистилденген суда шаю. - Кармин ерітіндісінде 15-30 мин бояуға қою. - Бест ерітіндісінде 5-10 секундтан бірнеше минутқа дейін ұстап, бояудың түсі кеткенше өңдеу. - 80° спиртте шаю. - Дегидратациялап, түссіздендіріп, бальзам мен жабу. Нәтижесі. Ядро - қою көк, гликоген ашық қызыл. Мукополисахаридтерді анықтау және ерекшелеу. Қышқыл мукополисахаридтердің болуын Гале (Хейла) әдісі бойынша анықтауға болады (мұзды қатырылған кесінділер) бекіткіштер: формалин, Карнуа сұйықтығы, парафинге құю). 1. Коллоидты темір сұйықтығы. 100 мл қайнаған дистилденген суға, араластырып тұрып 8-12 мл 10% хлорлы темір сұйықтығын қосу керек. Сұйықтық қоңыр түске айналады. НС1 жою үшін диализ үшін өткізу керек. 2. Сұйықтығы -2М сірке қышқылы. 3. Ферроцианид калийдің қышқылданған сұйықтығы - сары қан тұзы және НС1. Бояу әдісі. -Қалыңдығы 5-7 мкм парафинді кесіндіні депарафинизациялау және тек абсолютті спиртке дейін жүргізу. - 2 м диализ темірмен сірке қышқылының мөлшерінде құю. Кесіндіні 10-15 мин осы ерітіндіге қою. - Дистилденген судың 3 өлшемінде мұқият жуу 3-5минут. - Жаңа дайындалған сары қанды тұзда 10 минут ұстау. - Дистилденген суда шаю. - Ядроларды кармин ашудасында немесе гематоксилин арқылы бояу. - Дегидратациялап, түссіздендіріп, бальзам мен жабу. Нәтижесі. Ядро - қызыл түске боялады, қышқыл мукополисахаридтер көк түске боялады. Қолданылатын әдебиеттер: 1. С.М. Шалгимбаева, Ж.С. Омарова, Г.Б. Джумаханова Микротехника негіздері Алматы, Қазақ университеті, 2021, 71 б. 2. Кузнецов С.Л., Мушкамбаров Н.Н. – Атлас по гистологии, цитологии и эмбриологии «МИА» 2002 3. Роскин Г. И. Микроскопическая техника. — М.: Государственное издательство «Советская Наука», 1946 4. Хегай И.В., Кобегенова С.С. Методическое руководство по курсу «Основы микротехники» Алматы. Қазақ университеті. 1999. Ғаламтор ресурстары: 1. http://elibrary.kaznu.kz/ru 2. https://studfiles.net/ 3. https://www.litres.ru жүктеу/скачать 152,73 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|